本發明屬于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的應用，具體涉及煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應用。

背景技術：

炎性痛是由創傷、細菌或病毒感染以及外科手術等引起的外周組織損傷導致的炎癥引起，主要特征是受損組織對熱刺激和機械刺激的敏感性增加。炎性疼痛病程長且治愈困難，患者在精神上、身心上遭受極大的痛苦，嚴重影響了患者的生活質量，并給患者帶來了沉重的經濟負擔。由于其病因多樣，發病機制復雜而導致發病率高，難治愈已經成為臨床醫療最具挑戰的難題之一。目前，藥物治療是控制癥狀的最常用也是最主要的手段。按照其作用特點和機制可以分為中樞神經系統鎮痛藥和解熱抗炎鎮痛藥兩大類。中樞神經系統鎮痛藥的代表是阿片類受體的激動劑，其代表藥為嗎啡，但由于成癮性等副作用限制了其在臨床上的應用。解熱抗炎鎮痛藥，又稱為非甾體類抗炎藥，具有抗炎、解熱作用，其中鎮痛作用主要部位在外周，并且作用機制主要是通過阻斷體內環氧合酶(cox)，從而抑制前列腺素(prostaglandin，pg)的生物合成，減弱炎癥反應和疼痛作用的發揮，其代表為阿司匹林、吲哚美辛等。但由于非甾體抗炎藥對炎性痛效果不明顯，副作用較多限制了其臨床應用。因此，研究炎性疼痛產生的病因和病理，尋找和開發新型鎮痛藥，不僅成為疼痛醫學研究的熱點和難點，而且對于最終解決這一頑癥，提高罹患人群的生活質量具有重要的臨床意義和社會意義。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(縮寫為nad⁺)，在哺乳動物體內存在氧化型(nad⁺)和還原型(nadh)兩種狀態，氧化型(nad⁺)在260nm處具有最大紫外吸收光譜，通過各種脫氨酶，從底物中接受一個氫原子和一個電子，變成還原型(nadh)，在340nm處有最大吸收。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸參與細胞物質代謝、能量合成、細胞dna修復等多種生理活動，對機體免疫能力有重要作用。在健康狀態下，人體內煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度穩定，維持各項細胞正常功能。體內的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度決定了細胞衰老的過程和程度，濃度下降會加速細胞衰老的過程。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸主要存在于酵母細胞線粒體中，目前通常選用破壁和提純的方法制備煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。

本發明人首次發現：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對炎性痛具有一定的鎮痛作用，基于上述發現經過進一步實驗從而完成本發明。

技術實現要素：

本發明提供一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物以及作為活性成分制備治療炎性痛藥物中的應用。

本發明通過以下技術方案實現：

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應用，所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的結構分子式為：

所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸作為活性成分在制備治療炎性痛藥物中的應用。

所述的炎性痛為福爾馬林或完全弗氏佐劑誘導的炎癥疼痛。

在制備治療炎性痛藥物時，所述的藥物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、混懸劑、糖漿劑、腸溶制劑或注射劑。

所述的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸作為注射劑制備治療炎性痛藥物時，將煙酰胺腺嘌呤二核苷酸溶解于生理鹽水中，采用鞘內注射、皮下注射、腹腔注射、靜脈注射，濃度為8mmol/l到800mmol/l。

進一步地，采用鞘內注射的注射量為0.1ul/g-1ul/g；采用皮下注射的注射量為1ul/g-5ul/g；采用腹腔注射的注射量為1ul/g-200ul/g；采用靜脈注射的注射量為1ul/g-100ul/g。

本發明中nad⁺通過依賴nad⁺的去乙酰化酶sirt1和sirt2參與調節福爾馬林和完全弗氏佐劑(cfa)誘發的炎癥痛，而sirt1和sirt2通過不同機制參與nad⁺對炎癥痛的抑制作用，從而達到對炎性痛具有鎮痛的作用。

附圖說明

圖1為鞘內注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對福爾馬林致小鼠舔足反應的影響；

圖2為鞘內注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對完全弗氏佐劑致小鼠足底炎癥反應的影響；

圖3為皮下注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對完全弗氏佐劑致小鼠足底炎癥反應的影響。

具體實施方式

下面結合附圖和具體實施例對本發明進行詳細說明。

實施例1

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對福爾馬林引起的炎性痛有鎮痛作用，下面通過藥效學實驗進一步說明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在福爾馬林引起的炎性痛中具有治療作用。

實驗動物為20gicr小鼠，購自同濟大學實驗動物中心，喂養條件：標準飼料，室溫保持在(24±2)℃，濕度50-60％，每日光照與黑暗時間各12h，實驗前，將動物置于實驗環境適應3天。

取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(鞘內注射，10ul)、嗎啡組(鞘內注射，350nmol/l，10ul)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(sigma-aldrich公司，濃度分別是8mmol/l，80mm/l，800mmol/l，鞘內注射，10ul)，分別于給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測量小鼠舔足時間，記錄分為兩個時相，i相為0-10min，ii相為10-45min，實驗結果如圖1所示，與生理鹽水組相比，在i相和ii相中，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l和800mmol/l)與嗎啡組(350nmol/l)降低了舔足時間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實施例2

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對完全弗氏佐劑致小鼠炎癥痛有鎮痛作用，下面通過藥效學實驗進一步說明。

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機分兩組，分別為生理鹽水組(鞘內注射，10ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l，鞘內注射，10ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別鞘內給予生理鹽水，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規的vonfrey纖維細絲利用upanddown法進行測量，分別測定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機械閾值，結果如圖2所示，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在15min-3h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實施例3

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對完全弗氏佐劑致小鼠炎癥痛有鎮痛作用，下面通過藥效學實驗進一步說明。

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機分兩組。分別為生理鹽水組(皮下注射，20ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mmol/l，皮下注射，20ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別腳掌皮下給予生理鹽水，80mmol/l的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規的vonfrey纖維細絲利用upanddown法進行測量，分別測定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機械閾值，結果如圖3所示，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在45min和1h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實施例4

取icr小鼠18只(雄性，20g左右)，隨機分兩組，分別為生理鹽水組(鞘內注射，2ul)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組(80mm/l，鞘內注射，2ul)。小鼠足底注射完全弗氏佐劑第三天，分別鞘內給予生理鹽水，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，采用常規的vonfrey纖維細絲利用upanddown法進行測量，分別測定給藥后15min，30min，45min，1h，2h，3h，6h的機械閾值，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組在15min-3h抑制了完全弗氏佐劑引起的炎性痛，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛的作用。

實施例5

本實施例取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(皮下注射)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸兩組，濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按5ul/g和1ul/g的用量進行皮下注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測量小鼠舔足時間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實施例6

取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按200ul/g和1ul/g的用量進行腹腔注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測量小鼠舔足時間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。

實施例7

本實施例取icr小鼠30只(雄性，20g左右)，隨機分五組，每組6只，分別為：生理鹽水組(靜脈注射)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸兩組，濃度分別是8mmol/l，800mmol/l，分別按100ul/g和1ul/g的用量進行靜脈注射，給藥后在所有小鼠右后足底注射5％的福爾馬林溶液20ul，立即測量小鼠舔足時間，與生理鹽水組相比，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸組降低了舔足時間，表明煙酰胺腺嘌呤二核苷酸具有抗炎性疼痛作用。