本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及一種治療非小細胞肺癌的組合物和人參皂苷f4在制備治療非小細胞肺癌的組合物中的應用。
背景技術：
：進入21世紀，惡性腫瘤死亡率呈逐年上升的趨勢，仍然是影響人類生命健康的重要疾病，死亡率居全部死因的第2位，僅次于心血管疾病。按病種分類，2004年全部死因中，肺癌居第8位，并預計在2030年將上升至第6位，位居各種癌癥之首。同時，肺癌的發病率在我國也一直處于癌譜首位。2000-2005年間我國肺癌的新發病例增加了12萬，并且每年以26.3％的速度增長，預計到2025年我國肺癌人數將達到100萬，成為世界第一肺癌大國。肺癌是最常見的肺原發性惡性腫瘤，絕大多數肺癌起源于支氣管黏膜上皮，故亦稱支氣管肺癌。從臨床治療角度，可將其分為小細胞肺癌(sclc)和非小細胞肺癌(nsclc)，其中nsclc占肺癌總數的80％-85％，非小細胞型肺癌包括鱗狀細胞癌(鱗癌)、腺癌、大細胞癌，與小細胞癌相比其癌細胞生長分裂較慢，擴散轉移相對較晚。非小細胞肺癌約占肺癌總數的80％，約75％的患者發現時已處于中晚期，5年生存率很低，其中高齡患者占多數，約50％的肺癌患者年齡大于65歲。肺癌在全部腫瘤死亡中仍占16.2％。目前國內外對于非小細胞肺癌的治療方法主要有：手術、化療、放療、靶向藥物、生物治療、中醫藥治療等。但上述方法均存在缺陷：(1)非小細胞肺癌患者早期缺乏典型的臨床表現，不能及時診斷，約70％的患者在確診時已經處于晚期，無法進行手術。即使患者達到手術標準，術后復發的機率仍較大；(2)化療方案均憑經驗給藥，這種同質化的治療往往具有很大的盲目性，且化療藥物毒副作用明顯，對自身免疫系統損傷極大，且容易產生耐藥性，多次使用后無效；(3)放療的副作用大，容易造成肺損傷和放射性肺炎；(4)目前非小細胞肺癌的靶向藥物主要是小分子egfr酪氨酸激酶抑制劑：吉非替尼、厄洛替尼及抗腫瘤血管生成藥物貝伐單抗、恩度。這些靶向藥物雖在一定程度上可以緩解腫瘤進展或改善生存質量，但在治療的同時同樣存在嚴重的副作用，很多病人無法忍受副作用帶來的痛苦而終止用藥。人參，又稱“百草之王”，古代醫藥學書籍《神農本草經》對人參的功效有重要記載：“人參味甘，微寒，主補五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目，開心益智、久服輕身延年”。人參皂苷作為人參的主要活性物質，已受到廣泛關注。近年來，對于以人參皂苷rg3為首的稀有人參皂苷在抗腫瘤領域的研究也在世界各國深入展開，并得到了國際共識，大量的臨床及非臨床試驗證明稀有人參皂苷具有抗腫瘤作用，其作用機理主要表現在如下方面：a.抑制腫瘤細胞增殖作用；b.促進細胞凋亡作用；c.抑制腫瘤組織新生血管生成，防止腫瘤轉移和擴散；d.促進免疫器官功能、增強自身免疫力。而人參皂苷的服用安全性也得到了廣泛的認可。專利cn101732332b公開了以20(s)-rg3作為藥物在治療非小細胞肺癌的中的應用。技術實現要素：本發明所要解決的技術問題是：本發明的目的在于提供一種治療非小細胞肺癌的組合物，人參皂苷f4在制備治療非小細胞肺癌的藥物中的應用。為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：一種治療非小細胞肺癌的組合物，其含有人參皂苷f4。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，所述組合物還包括靈芝提取物、黃芪提取物、西洋參提取物、三七提取物、當歸提取物、山藥提取物、淫羊藿提取物中的一種或幾種。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，所述組合物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、散劑、乳劑、注射劑、溶液劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑、霜劑或貼膏劑。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，所述組合物以人參皂苷f4為主要活性成分加上藥學上可接受的載體，所述載體包括填充劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、甜味劑中的一種或幾種。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，由如下重量份比的原料組成：人參皂苷f41份；靈芝提取物1份；黃芪提取物2份；枸杞提取物5份；淀粉10份。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，由如下重量份比的原料組成：人參皂苷f41份；微晶纖維素10份；聚維酮k303份；交聯羧甲基纖維素鈉4份；硬脂酸鎂1份。進一步的，上述的治療非小細胞肺癌的組合物中，由如下重量份比的原料組成：人參皂苷f41份；靈芝提取物1份；乳糖10份；預膠化淀粉5份；硬脂酸鎂1份。本發明的另一技術方案為：人參皂苷f4在制備治療非小細胞肺癌的組合物中的應用。進一步的，上述的應用中，所述組合物由人參皂苷f4和藥學上可接受的載體組成，所述載體包括填充劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、甜味劑中的一種或幾種。進一步的，上述的應用中，所述組合物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、散劑、乳劑、注射劑、溶液劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑、霜劑或貼膏劑。本發明的有益效果在于：本發明提供一種人參皂苷f4在制備治療非小細胞肺癌的組合物中的應用和治療非小細胞肺癌的組合物，人參皂苷f4為一類稀有人參皂苷，在天然人參中的含量極低，本發明申請人發現人參皂苷f4具有治療非小細胞肺癌的作用，通過細胞及動物實驗、臨床試驗證實，人參皂苷f4可抑制非小細胞肺癌的生長。且效果較人參皂苷rg3更佳。可作為非小細胞肺癌治療的一種潛在藥物，且該藥物高效、無毒。可長期服用。具體實施方式為詳細說明本發明的技術內容、所實現目的及效果，以下結合實施方式予以說明。本發明最關鍵的構思在于：人參皂苷f4為一類稀有人參皂苷，在天然人參中的含量極低，本發明人通過實驗發現人參皂苷f4具有治療非小細胞肺癌的作用，且效果較人參皂苷rg3更佳。可作為非小細胞肺癌治療的一種潛在藥物，且該藥物高效、無毒。實施例1一種含人參皂苷f4中藥組方顆粒劑的制備方法，原料如下：人參皂苷f4100g；靈芝提取物100g；黃芪提取物200g；枸杞提取物500g；淀粉1000g；將人參皂苷f4、靈芝提取物、黃芪提取物、枸杞提取物及淀粉混合均勻，于濕法制粒機中制粒后烘干、裝袋；最終，制備成顆粒劑190袋；每袋10g，一日三次、每次1袋。實施例2一種含人參皂苷f4的膠囊劑的制備方法，原料如下：人參皂苷f4100g；微晶纖維素1000g；聚維酮k30300g；交聯羧甲基纖維素鈉400g；硬脂酸鎂100g；將上述原輔料混合均勻后，經膠囊制備工藝制備成硬膠囊4750粒、每粒400mg。實施例3一種含人參皂苷f4的片劑的制備方法，原料如下：人參皂苷f4100g；靈芝提取物100g；乳糖1000g；預膠化淀粉400g；硬脂酸鎂100g；將上述原輔料混合均勻經制粒、烘干、整粒、壓片，制備成片劑4250片，每片400mg。實施例4肺癌細胞抑制實驗試驗材料：人參皂苷f4、人參皂苷20(s)-rg3，分別用細胞培養基(含0.5％dmso便于人參皂苷的溶解)配制濃度為500μg/ml(高劑量)、62.5μg/ml(低劑量)溶液備用。按常規腫瘤細胞培養方法將肺癌細胞nci-h460進行復蘇、培養后加入96孔板進行腫瘤細胞抑制實驗。具體步驟如下：(1)人肺癌細胞株nci-h460，用rpmi1640細胞培養液，這四種細胞均為貼壁細胞。將凍存的細胞液以1500r離心5min，棄上清，加入新鮮細胞培養液，吹勻，將其加入到培養皿中，放進含5％co2、37℃的生化培養箱中，待細胞貼壁生長24h或者48h，細胞數目達到80％左右時，加入pbs洗滌2-3遍，再加入3ml胰蛋白酶，37℃消化2min，待細胞變圓之后，加入等體積細胞培液終止消化，并將細胞從培養皿底部吹下來。收集細胞液，離心，棄上清，加入一定的培養液，吹勻，將細胞液分別加進兩個25cm培養皿中，繼續培養。(2)待腫瘤細胞生長至皿底面積80％左右時，加入pbs洗滌2-3遍，再加入3ml胰蛋白酶，37℃消化2min，待細胞變圓之后，加入等體積細胞培養液終止消化，并將細胞從培養皿底部吹下來。收集細胞液，離心，棄上清，加入一定的培養液，吹勻，取大約50μl加到細胞計數板上，在倒置顯微鏡上計數。細胞密度＝(四大格細胞數之和)×104/ml。調整細胞密度至(7-10)×104/ml，將細胞接種于96孔板中，每孔加入0.1ml，然后放入培養箱中24h。(3)24h后，吸去每個孔中的培養液，加入各濃度含有稀有人參皂苷的培養液，每個濃度設置5個復孔，接著放進培養箱中孵育48h；之后，吸去孔中的舊培養液，每孔依次加入100μl培養液和50μlmtt溶液，搖勻，放進培養箱中孵育4h，然后吸出其混合液，加入150μldmso來溶解紫色晶體甲瓚，震蕩10min，放進酶標儀中，檢測波長570nm，測定每孔的吸光度值a。抑制率＝(空白組a-實驗組a)×100％/空白組。表1為人參皂苷f4對肺癌細胞nci-h460的抑制試驗結果。表1試驗結果表明，人參皂苷rg3及人參皂苷f4對于nci-h460大細胞肺癌細胞、ltep-78肺鱗癌細胞、a549肺腺癌細胞均有抑制作用，且人參皂苷f4的抑制率較人參皂苷rg3高。實施例5人參皂苷f4治療非小細胞肺癌的動物實驗1、動物和材料t739小鼠58只，近交系，雌雄各半，體重20-22g。大細胞肺癌細胞株nci-h460。人參皂苷rg3、人參皂苷f4。2、實驗分組t739小鼠隨機分為6組，接種24小時候分組如下：(1)模型組：灌胃生理鹽水0.4ml/只/d；(2)陽性對照組：灌胃環磷酰胺0.4ml/只/d，藥物濃度5g/ml；rg3低劑量組：灌胃rg3溶液0.4ml/只/d，藥物濃度37.5g/ml；rg3高劑量組：灌胃rg3溶液0.4ml/只/d，藥物濃度375g/ml；f4低劑量組：灌胃rg3溶液0.4ml/只/d，藥物濃度37.5g/ml；f4高劑量組：灌胃rg3溶液0.4ml/只/d，藥物濃度375g/ml。3、模型建立取經鑒定的新鮮nci-h460瘤塊，無菌條件下剪碎研磨后，再經200目濾網過濾后制成腫瘤單細胞懸液，用生理鹽水將懸液稀釋至6×106/ml癌細胞懸液，取0.1ml原液，常規方法接種于各組小鼠右側腋下皮下。4、抑瘤率測定將小鼠于第14天斷頸處死，剝離瘤組織，取瘤體，稱取瘤體重量，計算抑瘤率：抑瘤率＝(模型組平均腫瘤重量-治療組平均腫瘤重量)/模型組平均腫瘤重量×100％。5、統計分析數字結果用表示，各組數據均采用spss10.0統計軟件進行分析，兩組間進行t檢驗。6、結果表2為人參皂苷f4對大細胞肺癌的抑制率(n＝10)。表2組別動物數瘤重(g)抑制率(％)模型對照組82.39±0.28陽性對照組100.48±0.1979.9**rg3低劑量組101.44±0.2239.7**rg3高劑量組100.95±0.2560.3**f4低劑量組101.06±0.2055.6**f4高劑量組100.69±0.1871.1**注：與模型對照組比較，*p＜0.01，**p＜0.001。結果顯示：與沒有用藥的模型對照組比較，人參皂苷rg3與人參皂苷f4對于小鼠大細胞肺癌均具有顯著的抑瘤作用，人參皂苷f4對癌細胞生長的抑制作用較人參皂苷rg3更佳。綜上所述，人參皂苷f4為一類稀有人參皂苷，在天然人參中的含量極低，但人參皂苷f4具有治療非小細胞肺癌的作用，通過細胞及動物實驗、臨床試驗證實，人參皂苷f4可抑制非小細胞肺癌的生長。且效果較人參皂苷rg3更佳。可作為非小細胞肺癌治療的一種潛在藥物，且該藥物高效、無毒。可長期服用。以上所述僅為本發明的實施例，并非因此限制本發明的專利范圍，凡是利用本發明說明書內容所作的等同變換，或直接或間接運用在相關的
技術領域：
，均同理包括在本發明的專利保護范圍內。當前第1頁12