本申請屬于醫學領域，具體涉及stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用。

背景技術：

1、心肌梗死是一種由冠狀動脈急性閉塞引起的臨床常見心臟疾病，導致相應心肌區域持久且嚴重的缺血。這種缺血通常伴隨著組織壞死以及炎性細胞的浸潤，其病理過程涉及到多種炎性介質和生化反應，包括但不限于缺血損傷、氧化應激損傷、補體系統的激活、白細胞介素的釋放及中性粒細胞的聚集/浸潤等。

2、目前，對于心肌梗死的治療手段主要包括介入手術(例如冠狀動脈支架植入)、藥物治療以及心臟康復。介入手術能夠在短時間內迅速恢復冠狀動脈的血流，然而這種方法并不能完全替代藥物治療，也不能修復已經受損的心肌組織。藥物治療在緩解癥狀和減少并發癥方面起到了重要作用，但同樣無法實現對受損心肌組織的全面修復。心臟康復則是通過一系列綜合措施幫助患者逐步恢復心臟功能，提高生活質量，但其效果也有限，無法徹底治愈心肌梗死。

3、斯鈣素(stanniocalcin，stc)由一種硬骨魚類位于腎臟附近的斯坦尼斯小體產生，主要參與該魚類體內鈣磷的調節，是一種保守的糖蛋白。1995年，wagner等研究發現，人體內亦存在魚樣stc蛋白，根據蛋白質序列同源性不同，stc又分為stc-1和stc-2，其中stc-1是一種由247個氨基酸組成的蛋白質，氨基酸序列與魚stc具有約60％的同源性。stc-1基因在許多組織中均廣泛表達，但通常在血清中檢測不到stc-1，表明stc-1可能更傾向于作為一種旁分泌/自分泌因子而不是作為一種內分泌激素。stc-1在脾臟和胸腺的定位表明，其在免疫和炎癥反應中也可能具有一定作用。stc-1本身具有多種有益的生物學效應，例如可抑制哺乳動物體內超氧化物生成、炎癥以及細胞凋亡等。

4、但是，目前并沒有關于stc-1重組蛋白在治療心肌梗死方面或者改善心肌纖維化方面研究的記載與報道，因此為后續臨床上開發新型治療心肌梗死的藥物提供了新的策略。

技術實現思路

1、針對現有技術中并沒有關于stc-1重組蛋白在治療心肌梗死方面或者改善心肌纖維化方面研究的記載與報道，本申請提供一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用。

2、本申請的技術方案如下：

3、stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，用于制備治療心肌梗死的藥物和/或用于制備改善心肌纖維化的藥物。

4、優選的，所述stc-1重組蛋白的制備方法包括如下步驟：

5、步驟s1.熱激法轉化質粒：

6、將感受態宿主細胞冰浴融化后加入編碼stc-1基因的純質?；蜻B接stc-1基因的產物，吹打均勻，繼續冰浴30min得到菌液，將菌液熱激并在2×yt-ag培養基上培養擴增至od600值為0.6，得到培養菌液；

7、步驟s2.iptg誘導蛋白表達：

8、取1ml培養菌液作為誘導前標本，剩余培養菌液離心，去除上層清液，用50mm/ph7.4的pbs洗滌兩次后，重新懸浮于不含葡萄糖的2×yt-ai培養基中，并加入終濃度為1mmol/l的iptg來誘導目的基因表達得到誘導菌液；

9、步驟s3.提取重組蛋白和純化

10、將誘導菌液初步離心去除上層清液，將菌體用pbs重懸，隨后超聲破碎再次離心，取破碎后的上層清液跑電泳，沉淀繼續用50mm/ph?7.4的pbs重懸之后跑電泳，確認重組蛋白在破碎上層清液和沉淀中的分布情況，若重組蛋白在破碎上層清液中，則對破碎上層清液中的蛋白基于ni+親和層析法進行純化，若重組蛋白在沉淀中，則對沉淀中的蛋白基于ni+親和層析法進行純化，得到stc-1重組蛋白。

11、優選的，所述步驟s1中感受態宿主細胞為hb2151大腸桿菌。

12、優選的，所述步驟s1中所述感受態宿主細胞μl與編碼stc-1基因的純質?；蜻B接stc-1基因的產物μl的比為100:1。

13、優選的，所述步驟s1中菌液熱激的條件為先放入42℃水浴中熱激90s，再放入冰浴中2min。

14、優選的，所述步驟s1中，培養的溫度為37℃。

15、優選的，所述步驟s2中，離心的條件，溫度為4℃，轉速為3000rpm，時間為10min誘導基因表達的條件為，溫度為37℃，時間為15h。

16、優選的，所述步驟s3中，

17、初步離心的條件：溫度為4℃,轉速為8000rpm，時間為15min；

18、超聲破碎的條件：振幅為10μm，時間為1min；

19、再次離心的條件：溫度為4℃，轉速為12000rpm，時間為10min。

20、本申請的有益效果如下：

21、本申請的stc-1(stanniocalcin-1)重組蛋白在治療由心肌梗死誘發的小鼠系列癥狀方面效果較好，為后續臨床上開發新型治療心肌梗死的藥物提供了全新的視角和可能性。由于心肌梗死是一種由于冠狀動脈血流供應不足導致心肌壞死的嚴重疾病。在心肌梗死發生后，心肌細胞會經歷快速的死亡過程，并伴隨著一系列不良的心臟重構，這些都會嚴重影響心臟的功能。當前的治療方法，如藥物干預、介入手術和冠狀動脈旁路術等，雖然能夠改善臨床癥狀，但往往無法從根本上修復壞死的心肌組織。stc-1作為一種多功能效應蛋白，在多種生物過程中發揮著重要作用。哺乳動物中，stc-1在多種器官中均有表達，包括小腸、回腸、腎臟、胎盤等，并展現出多種生理效應。stc-1能夠保護心肌細胞免受氧化應激損傷，減少細胞凋亡，從而維持心肌細胞的活力和功能。同時，stc-1還可能通過調節心臟細胞內的鈣離子濃度，影響心肌細胞的收縮和舒張功能，進一步改善心臟的整體性能。stc-1重組蛋白作為制備心肌梗死的藥物，與傳統的治療方法相比，stc-1重組蛋白具有潛在的優勢，直接針對心肌細胞進行保護，減少心臟重構的發生，從而可能實現更好的治療效果。此外，stc-1作為一種內源性蛋白，其安全性和耐受性也可能更高，降低了藥物副作用的風險。

技術特征：

1.stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，用于制備治療心肌梗死的藥物和/或用于制備改善心肌纖維化的藥物。

2.根據權利要求1所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述stc-1重組蛋白的制備方法包括如下步驟：

3.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s1中感受態宿主細胞為hb2151大腸桿菌。

4.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s1中所述感受態宿主細胞μl與編碼stc-1基因的純質?；蜻B接stc-1基因的產物μl的比為100:1。

5.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s1中菌液熱激的條件為先放入42℃水浴中熱激90s，再放入冰浴中2min。

6.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s1中，培養的溫度為37℃。

7.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s2中，離心的條件，溫度為4℃,轉速為3000rpm，時間為10min誘導基因表達的條件為，溫度為37℃，時間為15h。

8.根據權利要求2所述的一種stc-1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用，其特征在于，所述步驟s3中，

技術總結
本申請屬于醫學領域，具體涉及一種STC?1重組蛋白在制備治療心肌梗死藥物中的應用。本申請的STC?1重組蛋白用于制備治療心肌梗死的藥物和/或用于制備改善心肌纖維化的藥物。本申請的STC?1(Stanniocalcin?1)重組蛋白在治療由心肌梗死誘發的小鼠系列癥狀方面效果較好，為后續臨床上開發新型治療心肌梗死的藥物提供了全新的視角和可能性，同時STC?1重組蛋白作為制備心肌梗死的藥物，與傳統的治療方法相比，STC?1重組蛋白具有潛在的優勢，直接針對心肌細胞進行保護，減少心臟重構的發生，從而可能實現更好的治療效果。此外，STC?1作為一種內源性蛋白，其安全性和耐受性也可能更高，降低了藥物副作用的風險。

技術研發人員：張保儉,祖麗比婭·艾薩,王瀟,葛振嶸,唐曉潔
受保護的技術使用者：新疆醫科大學第四附屬醫院
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28