:本發(fā)明所設(shè)及化合物化Igarisin A片劑的制備：
[0020] 取5克化合物化Igarisin A，加入糊精195克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成1000片。
[0021 ]實(shí)施例2:本發(fā)明所設(shè)及化合物化Igarisin A膠囊劑的制備：
[0022] 取5克化合物化Igarisin A，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制成1000粒。
[0023] 下面通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明其藥物活性。
[0024] 實(shí)驗(yàn)例1:化Igarisin A抗急性痛風(fēng)炎癥實(shí)驗(yàn)：
[002引 1:方法
[0026] ①溶液配制
[0027] 5g尿酸加1000ml蒸饋水煮沸，加5%化0田容液調(diào)PH 7.4，攬拌，冷卻析晶制成尿酸 鋼結(jié)晶(MSU)。將制好的MSU lOmg高壓滅菌，加不含血清的DMEM培養(yǎng)液10ml，研磨配成Img/ ml的DMEM溶液。實(shí)驗(yàn)時(shí)，此溶液再加 DMEM培養(yǎng)液配成不同濃度DMEM的MSU溶液。
[002引 Vulgarisin A 2.5mg，用二甲基亞諷(DMS0)溶解，DMS0終濃度<0.02%，再加無(wú)血 清的DMEM培養(yǎng)液，配制成濃度2.加 g/ml、25ug/ml、250ug/ml。
[0029] 陽(yáng)性藥嗎I噪美辛2.0mg，方法同化Igarisin A,配制濃度20ug/ml。
[0030] ②血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)
[0031 ]人廝靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞皿VEC株，由南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院提供，細(xì)胞經(jīng)支原 體檢測(cè)，無(wú)支原體污染，細(xì)胞經(jīng)0.25%膜蛋白酶消化，含10 %小牛血清的DMEM培養(yǎng)液中和， 離屯、（100化/min X 6min)，去上清液，加含10%小牛血清的DMEM培養(yǎng)液，移入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中， 放37°C、5 % C〇2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。
[0032] ③對(duì)MSU刺激HUVEC活力的影響
[0033] 冊(cè)VEC在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，待生長(zhǎng)至70 %~80 %融合時(shí)，W0.25%膜蛋白酶消化、離 屯、，10%小牛血清DMM培養(yǎng)液洗涂3次，用10 %小牛血清DMM培養(yǎng)液調(diào)成4 X l〇4/ml細(xì)胞懸 液，植入96孔板(每孔200ul)，培養(yǎng)24小時(shí)后輕吸出原培養(yǎng)液，進(jìn)行W下實(shí)驗(yàn)，每組各8孔，具 體分組及加液如下：對(duì)照組（200U1DMEM培養(yǎng)液）、模型組（lOOug/ml Μ洲溶液）、干預(yù)A組 (lOOug/ml Μ洲溶液+2.5ug/ml Vulgarisin A)、干預(yù)B組（lOOug/ml Μ洲溶液+25ug/ml 化Igarisin A)、干預(yù)〔組（10〇11旨/1111 MSU溶液+250ug/ml 化Igarisin A),加液后繼續(xù)放37 °C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)，收集上清液，剩余的冊(cè)VEC用于測(cè)定細(xì)胞活性，每孔再加 5mg/ml MTT液20ul，繼續(xù)放37°C、5 % C〇2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時(shí)后，棄MTT液，加入二甲基亞諷 200ul溶解，震蕩，于酶標(biāo)儀讀取吸光度值，波長(zhǎng)490nm。
[0034] 陽(yáng)性藥組加液（lOOug/ml MS陽(yáng)容液+20ug/ml嗎I噪美辛），其他方法同上。
[003引數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，細(xì)胞活力（％ )=實(shí)驗(yàn)組吸光度值/對(duì)照組吸光度值X 100 %，結(jié) 果見(jiàn)表1。
[0036] 與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞活力顯著減小（P<0.01，P<0.05)，陽(yáng)性藥嗎I噪美辛及 Vulgar is in A干預(yù)后細(xì)胞活力顯著提高（P<0.01，P<0.05)，并強(qiáng)于對(duì)照組，其中， 化Igarisin A各濃度組的細(xì)胞活力強(qiáng)于陽(yáng)性藥嗎I噪美辛。
[0037] 表1化Igarisin A對(duì)MSU刺激的血管內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響(X±s)
[0038]
[0039] 與模型組比較，*沖<0.01沖<0.05，與對(duì)照組比較嚴(yán)P<0.01#P<0.05
[0040] ④對(duì)ICAM-1表達(dá)影響
[0041 ]將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的冊(cè)VEC用0.25 %的膜蛋白酶消化，輕輕吹打，制成細(xì)胞懸液， 調(diào)整細(xì)胞密度為5X109/1，接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。待細(xì)胞長(zhǎng)滿后(約2地），棄去上清液，分為 下列組：對(duì)照組、模型組（lOOug/ml Μ洲溶液）、化Igarisin A組（lOOug/ml MSU溶液+2加 g/ ml Vulgarisin A)，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，PBS收集細(xì)胞，離屯、去上清，加入CD54單克隆抗體， 30min后，PBS洗涂，重懸細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其陽(yáng)性細(xì)胞百分率(n= 10000)，重復(fù)3 次，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0042] 表2化Igarisin A對(duì)MSU刺激的血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)的影響(X±s)
[0043]
[0044] 與模型組比較，*沖<0.01沖<0.05，與對(duì)照組比較嚴(yán)P<0.01#P<0.05
[004引 2、結(jié)果結(jié)果顯示，空白組HUVEC幾乎無(wú) ICAM-1表達(dá)，模型組ICAM-1的表達(dá)最高，與 模型組相比，化Igarisin A對(duì)ICAM-1的表達(dá)有較強(qiáng)的抑制作用。
[0046] 結(jié)論：用MSU致冊(cè)VEC損傷的急性痛風(fēng)模型評(píng)價(jià)顯示，Vulgarisin A可保護(hù)MSU致 冊(cè)VEC損傷，減少細(xì)胞調(diào)亡，提高細(xì)胞活性，抑制ICAM-1表達(dá)，具有抗急性痛風(fēng)炎癥的活性， 化Igarisin A可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. Vulgarisin A在治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用，所述化合物Vulgarisin A結(jié)構(gòu)如式 (I)所示：2. 如權(quán)利要求1所述Vulgar is in A在治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用，其特征在于 Vulgarisin A抑制ICAM-1 表達(dá)。3. -種治療急性痛風(fēng)藥物，其特征在于由權(quán)利要求1所述Vulgarisin A為活性成分添 加輔料制備而成，制備方法為取5克化合物Vulgarisin A，加入糊精195克，混勻，常規(guī)壓片 制成1000片。4. 一種治療急性痛風(fēng)藥物，其特征在于由權(quán)利要求1所述Vulgarisin A為活性成分添 加輔料制備而成，制備方法為取5克化合物Vulgarisin A，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制 成1000粒。
【專利摘要】本發(fā)明提供Vulgarisin？A在醫(yī)學(xué)中的新用途，具體地說(shuō)是Vulgarisin？A在制備治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明Vulgarisin？A對(duì)尿酸鹽致人血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的急性痛風(fēng)模型具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)，因此，Vulgarisin？A可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。本發(fā)明涉及的Vulgarisin？A在制備治療急性痛風(fēng)藥物中的用途屬于首次公開(kāi)，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對(duì)于急性痛風(fēng)的防治活性強(qiáng)得意想不到，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)，同時(shí)用于急性痛風(fēng)的防治顯然具有顯著的進(jìn)步。
【IPC分類】A61K31/22, A61P19/06
【公開(kāi)號(hào)】CN105456245
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510939083
【發(fā)明人】田麗華
【申請(qǐng)人】淄博齊鼎立專利信息咨詢有限公司
【公開(kāi)日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月16日