一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，包括，將殼聚糖溶解于有機(jī)溶劑中，制備均勻的殼聚糖紡絲溶液，采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有無(wú)水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素膜片上，經(jīng)后處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料。本發(fā)明制備過(guò)程簡(jiǎn)單易行、操作方便、成本低，制備的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料具有抗菌、保濕及負(fù)壓引流多重功效。可作為封閉式負(fù)壓引流敷料，治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染，也可作為抗菌敷料使用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)療器械及其制備【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種用于封閉式負(fù)壓引流技術(shù)的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]創(chuàng)面封閉式負(fù)壓引流技術(shù)(vacuum sealing drainage VSD)是今年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種創(chuàng)面治療新技術(shù)。它利用可黏貼半透膜使開(kāi)放創(chuàng)面封閉，使用負(fù)壓器產(chǎn)生一定的負(fù)壓，通過(guò)多孔敷料作用于清創(chuàng)后的創(chuàng)面，吸收創(chuàng)口滲出液并經(jīng)引流管流出。Fleischmann博士等人于1992年將傳統(tǒng)負(fù)壓引流和現(xiàn)在封閉敷料相結(jié)合，應(yīng)用于治療開(kāi)放性骨折創(chuàng)面取得成功。1997年Argenta和Morykwas等研究發(fā)現(xiàn)VSD可以促進(jìn)傷口創(chuàng)面局部血液循環(huán),促進(jìn)肉芽組織生產(chǎn)，減少組織細(xì)菌含量，提高皮瓣或游離植皮的存活率。隨著VSD技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展，越來(lái)越多的研究和臨床報(bào)告證實(shí)了 VSD技術(shù)在治療各類(lèi)急、慢性傷口包括急性軟組織缺損、各類(lèi)慢性(壓力性、血管性、糖尿病性)潰瘍、外科切口裂開(kāi)或感染等具有較好的療效。該療法能夠加速創(chuàng)面部位的血液循環(huán)，顯著促進(jìn)新生血管進(jìn)入創(chuàng)面，刺激肉芽組織的生長(zhǎng)，充分引流，減輕水腫，減少污染，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，能夠直接加快創(chuàng)面愈合，或?yàn)槭中g(shù)修復(fù)創(chuàng)造條件。目前VSD技術(shù)在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)得到了迅速推廣，被譽(yù)為當(dāng)前治療創(chuàng)傷的革命性技術(shù)，是創(chuàng)傷護(hù)理領(lǐng)域新的里程碑。并已經(jīng)普遍應(yīng)用于創(chuàng)傷、燒傷、整形等各個(gè)醫(yī)療領(lǐng)域。2003年德國(guó)、奧地利等國(guó)將該技術(shù)納入創(chuàng)口治療指南。近十年來(lái)，我國(guó)開(kāi)始引進(jìn)這一技術(shù)，并在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用方面積累了大量經(jīng)驗(yàn)。
[0003]目前創(chuàng)面封閉式負(fù)壓引流技術(shù)基本配置包括負(fù)壓源(包括醫(yī)用吸引機(jī)、負(fù)壓引瓶)，引流管，泡沫多孔敷料、可黏貼密封用半透膜、連接頭、引流容器等。其中泡沫多孔敷料作為負(fù)壓引流管和創(chuàng)面間的中介，在整個(gè)封閉式負(fù)壓引流裝置中起到關(guān)鍵性作用。它要求敷料內(nèi)部具有相互連通的多孔網(wǎng)絡(luò)，以確保負(fù)壓吸引出的組織滲出液及代謝產(chǎn)物能夠被正常吸出；同時(shí)敷料與創(chuàng)口直接接觸需要具有良好的生物相容性，能夠促進(jìn)傷口愈合。目前常用的敷料材料為聚乙烯醇，而聚乙烯醇成本較高，制造多孔結(jié)構(gòu)工藝復(fù)雜，主要依賴(lài)進(jìn)口。導(dǎo)致在我國(guó)此類(lèi)治療方法成本很高，給患者增加了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，開(kāi)發(fā)一種低成本、使用方便的替代敷料是當(dāng)務(wù)之急。
[0004]細(xì)菌纖維素(Bacterial cellulose,簡(jiǎn)寫(xiě)為BC)作為一種優(yōu)良的生物材料,具有其獨(dú)特的物理、化學(xué)性能:BC具有天然的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)；高抗張強(qiáng)度和彈性模量；高親水性，良好的透氣、吸水、透水性能，非凡的持水性和高濕強(qiáng)度。另外，大量研究表明細(xì)菌纖維素具有良好的體內(nèi)、體外生物相容性和良好的生物可降解性，這使得細(xì)菌纖維素本身可以應(yīng)用于生物醫(yī)用領(lǐng)域。國(guó)外采用單純的細(xì)菌纖維素作為敷料已有報(bào)道，并且已經(jīng)產(chǎn)業(yè)化用于臨床。因此，以細(xì)菌纖維素作為封閉式負(fù)壓引流敷料的基體材料，利用細(xì)菌纖維素本身的吸水性能，可以在保證生物安全性的基礎(chǔ)上持續(xù)有效的吸收傷口滲出液及代謝產(chǎn)物。細(xì)菌纖維素可以由多種細(xì)菌在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下在培養(yǎng)基中合成，如醋酸菌屬(Acetobacter)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、根瘤菌屬(Rhizobium)和八疊球菌屬(Sarcina)等等。其常用的發(fā)酵培養(yǎng)方法為淺盤(pán)靜置培養(yǎng)，經(jīng)發(fā)酵4-8天后，即可在培養(yǎng)基表層形成一層膜狀纖維素物質(zhì)，在本申請(qǐng)中將之稱(chēng)為細(xì)菌纖維素膜片，其含水量可達(dá)95%以上，可通過(guò)機(jī)械壓縮的方法將其中的水壓出。膜片的大小和厚度均可通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)時(shí)間來(lái)調(diào)節(jié)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法。本發(fā)明制備過(guò)程簡(jiǎn)單易行、操作方便、成本低，制備的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料具有抗菌、保濕及負(fù)壓引流多重功效。可作為封閉式負(fù)壓引流敷料，治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染，也可作為抗菌敷料使用。
[0006]一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，將分子量為5-30萬(wàn)的殼聚糖溶解于有機(jī)溶劑中，制備質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1-10%的均勻殼聚糖紡絲溶液，采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有無(wú)水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素膜片上，經(jīng)除雜處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料。
[0007]為了提高細(xì)菌纖維素的引流性能，本專(zhuān)利將殼聚糖纖維復(fù)合在細(xì)菌纖維素上。殼聚糖材料親水性能較差，在與細(xì)菌纖維素接觸后，殼聚糖纖維破壞了細(xì)菌纖維素本身的表面張力，在外加負(fù)壓的條件下，使?jié)B出液能夠順利通過(guò)殼聚糖纖維流出達(dá)到負(fù)壓引流的目的。同時(shí)，殼聚糖具有一定的抗菌性能，良好的生物相容性，已被證明能夠安全有效的應(yīng)用于傷口敷料產(chǎn)品。
[0008]本專(zhuān)利采用靜電紡絲法，將細(xì)菌纖維素與殼聚糖纖維復(fù)合得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料，制備過(guò)程中保持了細(xì)菌纖維素原有的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，從而使該敷料具有抗菌、保濕及負(fù)壓引流多重功效。可作為封閉式負(fù)壓引流敷料，治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染，也可作為抗菌敷料使用。
[0009]作為優(yōu)選的技術(shù)方案:
其中，所述的細(xì)菌纖維素是由木醋桿菌、根瘤菌屬、八疊球菌屬、假單胞菌屬、無(wú)色桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、氣桿菌屬或固氮菌屬中的一種或幾種產(chǎn)出的、經(jīng)過(guò)分離提純除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基之后得到的細(xì)菌纖維素。分離提純方法很多，如:可將細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為I~8%的NaOH水溶液中，在60~100°C的溫度下加熱3~6h。再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。
[0010]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的有機(jī)溶劑為醋酸水溶液和/或三氟乙酸。在制備殼聚糖紡絲溶液時(shí)，可選用一種或兩種上述溶劑作為混合溶劑，在機(jī)械攪拌作用下使殼聚糖溶解。一般溶解溫度為室溫，也可適當(dāng)升溫加熱以加快聚合物溶解速率。
[0011]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的采用靜電紡絲法，靜電紡絲過(guò)程主要由注射推進(jìn)裝置、靜電發(fā)生器和細(xì)菌纖維素接收裝置組成。把裝有殼聚糖溶液的注射器安裝到微量推進(jìn)裝置上，注射器前端裝有內(nèi)徑為0.1-1.0毫米的針頭，針頭與靜電發(fā)生器的正極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為l-200kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為5.0-30cm。
[0012]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的細(xì)菌纖維素膜片的含水量為50-90% (質(zhì)量百分?jǐn)?shù));或?qū)⒓?xì)菌纖維素膜片經(jīng)機(jī)械壓縮壓出大部分水后，將其浸泡在無(wú)水乙醇中，制成含50-90% (質(zhì)量百分?jǐn)?shù))無(wú)水乙醇的細(xì)菌纖維素膜片質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。
[0013]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的細(xì)菌纖維素膜片固定在接收板或旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。細(xì)菌纖維素膜為含有導(dǎo)電溶液的濕態(tài)膜片，可將細(xì)菌纖維素膜片平鋪在接收裝置上，也可將細(xì)菌纖維素膜片包裹在旋轉(zhuǎn)滾筒表面。在靜電紡絲時(shí)，噴絲針頭與靜電發(fā)生器的正極相連，細(xì)菌纖維素膜片與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連，在針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間產(chǎn)生電場(chǎng)，殼聚糖溶液細(xì)流在電場(chǎng)力的作用下均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。同時(shí)殼聚糖溶液細(xì)流與細(xì)菌纖維素內(nèi)的溶液相互作用，殼聚糖溶劑擴(kuò)散入細(xì)菌纖維素所含的溶液中，促進(jìn)殼聚糖纖維成形。
[0014]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的靜電紡絲得到的殼聚糖纖維直徑為IOO-1OOOnm之間，纖維成網(wǎng)絡(luò)狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料。
[0015]如上所述的一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，所述的靜電紡絲得到的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)30-100°C溫度處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，除去多余溶劑。然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為30-50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
(I)采用微生物培養(yǎng)制得的細(xì)菌纖維素替代泡沫多孔材料作為負(fù)壓引流敷料基體，大幅降低了生產(chǎn)成本。制備過(guò)程簡(jiǎn)單易得，不含任何有毒溶劑，不會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染以及生態(tài)危機(jī)等問(wèn)題，適合大批量生產(chǎn)，符合生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的使用要求。
[0017](2)采用靜電紡絲法制備細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料，在制備殼聚糖纖維的同時(shí)保持了細(xì)菌纖維素原有`的三維納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。本發(fā)明制備過(guò)程簡(jiǎn)單易行、操作方便、成本低，制備的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料具有抗菌、保濕及負(fù)壓引流多重功效。可作為封閉式負(fù)壓引流敷料，治愈慢性不愈性創(chuàng)傷、壓急性難治性創(chuàng)傷，燒傷以及大面積軟組織缺損和/或感染，也可作為抗菌敷料使用。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
[0019]實(shí)施例1:
(I)將由木醋桿菌發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為1%的NaOH水溶液中，在60°C的溫度下加熱6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0020](2)將分子量為5萬(wàn)的殼聚糖溶于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1%醋酸水溶液中，室溫下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1%的殼聚糖醋酸水溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為90%的細(xì)菌纖維素膜片覆蓋在旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為lkV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為5.0cm0得到的纖維直徑為600nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)30°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0021]實(shí)施例2:
(I)將由根瘤菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為2%的NaOH水溶液中，在70°C的溫度下加熱5h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0022] (2)將分子量為10萬(wàn)的殼聚糖溶于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.5%醋酸水溶液中，室溫下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為4%的殼聚糖醋酸水溶液。將含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為60%的細(xì)菌纖維素膜片覆蓋在旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為30kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為10.0cm。得到的纖維直徑為400nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)40°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為40%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0023]實(shí)施例3:
(I)將由八疊球菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為3%的NaOH水溶液中，在80°C的溫度下加熱4h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0024](2)將分子量為15萬(wàn)的殼聚糖溶于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1%醋酸水溶液中，室溫下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3%的殼聚糖醋酸水溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為90%的乙醇水溶液浸入細(xì)菌纖維素膜片中，制成含乙醇水溶液質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為70%的細(xì)菌纖維素膜片。將細(xì)菌纖維素膜片平鋪在接收板上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為50kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為15.0cm0得到的纖維直徑為500nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)100°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為30%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0025]實(shí)施例4:
(I)將由假單胞菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為4%的NaOH水溶液中，在90°C的溫度下加熱3h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0026](2)將分子量為20萬(wàn)的殼聚糖溶于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為2%醋酸水溶液中，室溫下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為5%的殼聚糖醋酸水溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為75%的乙醇水溶液浸入細(xì)菌纖維素膜片中，制成含乙醇水溶液質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為80%的細(xì)菌纖維素膜片。將細(xì)菌纖維素膜片平鋪在接收板上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為IOOkV,噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為20.0cm0得到的纖維直徑為700nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)50°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0027]實(shí)施例5:(I)將由無(wú)色桿菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為5%的NaOH水溶液中，在100°C的溫度下加熱3h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0028](2)將分子量為25萬(wàn)的殼聚糖溶于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3%醋酸水溶液中，室溫下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1%的殼聚糖醋酸水溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為95%的乙醇水溶液浸入細(xì)菌纖維素膜片中，制成含乙醇水溶液質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為50%的細(xì)菌纖維素膜片。將細(xì)菌纖維素膜片覆蓋在旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為150kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為30.0cm0得到的纖維直徑為IOOnm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)30°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為40%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0029]實(shí)施例6:
(I)將由產(chǎn)堿菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為6%的NaOH水溶液中，在100°C的溫度下加熱4h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0030](2)將分子量為30萬(wàn)的殼聚糖溶于三氟乙酸中，50°C下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為10%的殼聚糖三氟乙酸溶液。將含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為80%的細(xì)菌纖維素膜片平鋪在接收板上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為200kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為25.0cm0得到的纖維直徑為300nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)60°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為30%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0031]實(shí)施例7:
(I)將由氣桿菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為7%的NaOH水溶液中，在100°C的溫度下加熱5h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0032](2)將分子量為20萬(wàn)的殼聚糖溶于三氟乙酸和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為4%醋酸水溶液中，三氟乙酸與醋酸水溶液的質(zhì)量比例為1: 1，40°C下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為6%的殼聚糖溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為70%的細(xì)菌纖維素膜片平鋪在接收板上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為120kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為20.0cm0得到的纖維直徑為SOOnm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)70°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為40%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
[0033]實(shí)施例8:
(I)將由固氮菌屬能合成細(xì)菌纖維素的菌種發(fā)酵培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素浸泡在質(zhì)量百分含量為8%的NaOH水溶液中，在100°C的溫度下加熱6h，再用二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性。除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基。
[0034](2)將分子量為10萬(wàn)的殼聚糖溶于三氟乙酸和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為3%醋酸水溶液中，三氟乙酸與醋酸水溶液的質(zhì)量比例為2:1，37°C下配制成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為7%的殼聚糖溶液。將含無(wú)水乙醇質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為80%的細(xì)菌纖維素膜片覆蓋在旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的.負(fù)極相連。設(shè)置靜電紡絲電壓為70kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為10.0cm。得到的纖維直徑為1000nm的殼聚糖纖維均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面。細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維材料經(jīng)37°C高溫處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
【權(quán)利要求】
1.一種細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:將分子量為5-30萬(wàn)的殼聚糖溶解于有機(jī)溶劑中，制備質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1-10%的均勻殼聚糖紡絲溶液，采用靜電紡絲法將殼聚糖溶液從噴絲頭射出，射出的殼聚糖溶液細(xì)流噴射到含有無(wú)水乙醇和/或水的細(xì)菌纖維素膜片上，經(jīng)除雜處理，得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:所述的有機(jī)溶劑為醋酸水溶液和/或三氟乙酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:所述靜電紡絲法的靜電紡絲電壓為l_200kV，噴絲針頭與細(xì)菌纖維素膜片之間的距離為 5.0_30cm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:所述細(xì)菌纖維素膜片的含水量為50-90% ;或?qū)⒓?xì)菌纖維素膜片經(jīng)機(jī)械壓縮壓出大部分水后，將其浸泡在無(wú)水乙醇中，制成含質(zhì)量百分?jǐn)?shù)50-90%無(wú)水乙醇的細(xì)菌纖維素膜片。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:所述細(xì)菌纖維素膜片固定在接收板或旋轉(zhuǎn)滾筒上，且與靜電紡絲裝置的負(fù)極相連。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:所述通過(guò)靜電紡絲法制備的殼聚糖纖維直徑為IOO-1OOOnm之間，所述殼聚糖纖維成網(wǎng)絡(luò)狀均勻覆蓋在細(xì)菌纖維素表面得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是:在得到細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料之后，還包括以下步驟:將得到的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖濕性敷料經(jīng)30-100°C溫度處理，二次蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，除去多余溶劑；然后經(jīng)壓水處理得到含水質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為30-50%的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料的制備方法，其特征是，所述細(xì)菌纖維素是由木醋桿菌、根瘤菌屬、八疊球菌屬、假單胞菌屬、無(wú)色桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、氣桿菌屬或固氮菌屬中的一種或幾種產(chǎn)出的、經(jīng)過(guò)分離提純除去菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養(yǎng)基之后得到的細(xì)菌纖維素。
9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料。
10.權(quán)利要求9所述的細(xì)菌纖維素復(fù)合殼聚糖纖維濕性敷料在封閉式負(fù)壓引流用敷料或抗菌敷料中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】D01F9/00GK103480027SQ201210190044
【公開(kāi)日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2012年6月11日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月11日
【發(fā)明者】鐘春燕 申請(qǐng)人:鐘春燕