用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片及載片盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片及載片盒，其中載片包括基體，在基體上開有若干培養(yǎng)液儲存槽，在每一個培養(yǎng)液儲存槽旁邊分別開有單層細(xì)胞液儲存槽，單層細(xì)胞液儲存槽與培養(yǎng)液儲存槽連通且深度淺于培養(yǎng)液儲存槽，在培養(yǎng)液儲存槽和單層細(xì)胞液儲存槽的上方設(shè)有一觀察窗，觀察窗與基體采用整體式結(jié)構(gòu)，觀察窗在對應(yīng)于培養(yǎng)液儲存槽的位置設(shè)有加液口，觀察窗在對應(yīng)于單層細(xì)胞液儲存槽的位置處設(shè)有加樣口。載片盒包括盒體和盒蓋，在盒體內(nèi)設(shè)有若干載片卡位，在載片卡位的一端設(shè)有用于放入手指取出載片的凹槽，在載片卡位下方設(shè)有吸水保濕材料。本實用新型可以制作單層細(xì)胞用于即時觀察和計數(shù)，又能較長時間培養(yǎng)細(xì)胞并持續(xù)觀察。
【專利說明】
用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片及載片盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實用新型屬于顯微容器技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片及載片盒。
【背景技術(shù)】
[0002]細(xì)胞分裂和分化發(fā)育是生命科學(xué)中的重要研究內(nèi)容，明確細(xì)胞形態(tài)變化過程是這些研究的基礎(chǔ)工作。微生物、動物和植物等相關(guān)研究都會涉及到這一研究內(nèi)容。觀察細(xì)胞分裂和分化發(fā)育往往需要對某一固定的細(xì)胞進行長時間跟蹤觀察。但如何能夠跟蹤一個指定的細(xì)胞，并保證它在長時間的被觀察過程中是活的、保持正常生長狀態(tài)?這是科研人員進行此類研究時常常遇到的問題。目前往往借助熒光標(biāo)記、轉(zhuǎn)基因標(biāo)記等復(fù)雜且昂貴的技術(shù)才能達(dá)到這一目的。因此，該研究領(lǐng)域需要一種經(jīng)濟、簡單易用的器具以方便科研人員能做此類常規(guī)實驗。
[0003]現(xiàn)階段，科研人員一般都是使用普通載玻片和蓋玻片通過人工制作單層細(xì)胞用于細(xì)胞形態(tài)觀察。制作步驟如下:首先把待觀察的細(xì)胞培養(yǎng)到預(yù)定的階段，然后將適量的含細(xì)胞的液滴滴在載玻片上;再用蓋玻片進行壓片使液滴被壓成極薄的液膜，以便形成單層細(xì)胞;最后進行顯微觀察。這種方式的缺點是:a、待觀察的細(xì)胞培養(yǎng)到預(yù)定階段后才能取樣用于制作單層細(xì)胞并立即觀察，被觀察的對象只能是某一個時間點的細(xì)胞狀態(tài);要觀察細(xì)胞的形態(tài)變化過程，需要培養(yǎng)細(xì)胞群體嚴(yán)格的同步性，并要在全程時間內(nèi)密集的取樣制片觀察;無法觀察同一個細(xì)胞個體的變化，實驗誤差大。b、基于(a)這樣的取樣特點，科研人員只能大量的連續(xù)取樣觀察，對一類細(xì)胞的形態(tài)變化過程進行大量的分析歸類，最終總結(jié)出細(xì)胞形態(tài)變化規(guī)律，工作量較大。C、基于(a)這樣的取樣特點，科研人員每次取樣觀察到的對象都是不同的細(xì)胞個體，無法對同一細(xì)胞個體進行長時間觀察，因此在細(xì)胞形態(tài)變化的數(shù)據(jù)記錄實驗誤差較大。d、由于觀察一種細(xì)胞形態(tài)變化過程需要不停取樣制作單層細(xì)胞，對實驗人員的技術(shù)穩(wěn)定性要求較高，難以保證每次實驗條件的穩(wěn)定性，實驗的人為誤差增大。
[0004]授權(quán)公告號為CN2801789Y的中國專利，公開了一種微孔細(xì)胞培養(yǎng)載片，由若干圓形凹孔構(gòu)成，該凹孔孔深為800微米?4000微米，可以加入含有足夠培養(yǎng)液的細(xì)胞樣劑，實現(xiàn)較長時間的細(xì)胞培養(yǎng)和觀察。上述技術(shù)的缺點是:如果要長時間觀察細(xì)胞，隨著培養(yǎng)時間的增加，細(xì)胞數(shù)量分裂變多，分裂后的細(xì)胞將會在凹孔培養(yǎng)液中交疊，不會形成單層細(xì)胞；由于一般的細(xì)胞(包括細(xì)菌、真菌和人類細(xì)胞等)的大小一般在一微米到一百微米之間，如需人工在這凹孔中滴上含細(xì)胞的液滴，使之形成單層細(xì)胞便于顯微觀察，技術(shù)難度又非常大。所以，該技術(shù)難以達(dá)到單層細(xì)胞觀察的目的。
[0005]不論是上述哪種載玻片，為確保攜帶和儲存的安全，一般都會放置在載玻片盒中進行保存。而現(xiàn)有載玻片盒基本采用中空的結(jié)構(gòu)，內(nèi)部環(huán)境與外界空氣無異，達(dá)不到細(xì)胞培養(yǎng)所需的濕度，無法阻止細(xì)胞液的揮發(fā)，只適合空載片的存放，對含有細(xì)胞液的載玻片則難以實現(xiàn)長期的活性儲存。【實用新型內(nèi)容】
[0006]本實用新型的目的在于提供一種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片及載片盒，既能實現(xiàn)單層細(xì)胞的即時觀察，又能對單層細(xì)胞進行長時間培養(yǎng)實現(xiàn)持續(xù)觀察。
[0007]本實用新型提供的這種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，包括基體，在該基體上開有若干培養(yǎng)液儲存槽，在每一個培養(yǎng)液儲存槽旁邊還分別開有單層細(xì)胞液儲存槽，該單層細(xì)胞液儲存槽與培養(yǎng)液儲存槽連通且深度淺于培養(yǎng)液儲存槽，在培養(yǎng)液儲存槽和單層細(xì)胞液儲存槽的上方設(shè)有一觀察窗，所述觀察窗與基體采用整體式結(jié)構(gòu)，觀察窗在對應(yīng)于培養(yǎng)液儲存槽的位置設(shè)有加液口，觀察窗在對應(yīng)于單層細(xì)胞液儲存槽的位置處設(shè)有加樣口，所述加液口用于向培養(yǎng)液儲存槽內(nèi)添加培養(yǎng)液，加樣口用于向單層細(xì)胞液儲存槽內(nèi)滴入細(xì)胞液并自動形成單層細(xì)胞。
[0008]為使本實用新型適合一般細(xì)胞的觀察，所述單層細(xì)胞液儲存槽的深度為I?100微米。
[0009]為方便本實用新型向單層細(xì)胞液儲存槽內(nèi)加樣，所述加樣口采用中間寬兩端窄的結(jié)構(gòu)。
[0010]所述觀察窗與基體一次成型。
[0011]所述觀察窗與基體固接成一整體。
[0012]為使本實用新型可滿足無菌培養(yǎng)單層細(xì)胞的實驗要求，所述基體與觀察窗由耐高溫、耐高壓、透明的高分子材料制成。
[0013]—種與上述用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片配套使用的載片盒，包括盒體和盒蓋，在盒體內(nèi)設(shè)有若干載片卡位，在載片卡位的一端設(shè)有用于放入手指取出載片的凹槽，在載片卡位下方設(shè)有吸水保濕材料。
[0014]為方便本實用新型可以高溫滅菌，實現(xiàn)無菌培養(yǎng)的實驗要求，所述盒體和盒蓋由耐高溫、耐高壓的材料制成。
[0015]為確保本實用新型在培養(yǎng)過程中的無菌效果，所述盒蓋內(nèi)沿環(huán)繞有密封圈，該密封圈與盒體上口外沿密封連接。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型具有以下優(yōu)點:
[0017]—、只要將合適細(xì)胞濃度的培養(yǎng)液滴到加樣口中就能在單層細(xì)胞液儲存槽與觀察窗之間的微小夾層中自動形成單層細(xì)胞，直接用于觀察，省去用蓋玻片進行人工壓片的手工步驟，且單層技術(shù)穩(wěn)定；
[0018]二、培養(yǎng)液儲存槽與單層細(xì)胞液儲存槽是連通的，可以提供一定量的營養(yǎng)成分使被觀察的細(xì)胞在較長一段時間(約24小時或更長的時間)內(nèi)保存活性狀態(tài)(在這段時間內(nèi)可保持細(xì)胞分裂或形態(tài)分化等變化)，由于單層細(xì)胞液儲存槽中的液體幾乎不流動，因此細(xì)胞位置盡可能的被固定下來，可以長時間對載片中同一個細(xì)胞個體的形態(tài)變化過程進行固定跟蹤觀察，增加了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性；
[0019]三、觀察窗與培養(yǎng)液儲存槽和單層細(xì)胞液儲存槽的個數(shù)相匹配，基體上可以制作數(shù)個重復(fù)結(jié)構(gòu)單元;可同時對多個細(xì)胞樣品進行培養(yǎng)觀察，增加了單個載片的樣品通量，非常方便科研人員對不同處理細(xì)胞樣品的對照觀察；
[0020]四、制作一配套的載片盒，通過吸水保濕材料可在一定程度上延緩載片中培養(yǎng)液的揮發(fā)，延長了細(xì)胞活體觀察時間。
[0021]本實用新型結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，既可以制作單層細(xì)胞用于即時觀察和計數(shù)，又能較長時間的培養(yǎng)細(xì)胞并對同一細(xì)胞個體進行持續(xù)觀察其形態(tài)變化。
【附圖說明】

[0022]圖1為本實用新型用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片的結(jié)構(gòu)示意圖一。
[0023]圖2為圖1A-A處局部剖視結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]圖3為本實用新型用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片的結(jié)構(gòu)示意圖二。
[0025]圖4為本實用新型載片盒的剖視結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026]圖5為本實用新型用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片置于盒體內(nèi)的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實施方式】
[0027]以下是本實用新型中用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片的實施例一
[0028]從圖1和圖2可以看出，本實用新型這種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，包括基體I和觀察窗2，在基體I上開有若干成陣列排布的培養(yǎng)液儲存槽11，在每一個培養(yǎng)液儲存槽11的同一邊分別開有單層細(xì)胞液儲存槽12，單層細(xì)胞液儲存槽12與培養(yǎng)液儲存槽11連通，單層細(xì)胞液儲存槽12的深度淺于培養(yǎng)液儲存槽11的深度，觀察窗2設(shè)在培養(yǎng)液儲存槽11和單層細(xì)胞液儲存槽12的上方，基體I與觀察窗2通過一次成型的方式形成整體式結(jié)構(gòu)，在培養(yǎng)液儲存槽11上方與基體I相接處的觀察窗2上設(shè)有加液口 21，在單層細(xì)胞液儲存槽12上方與基體I相接處的觀察窗2上設(shè)有加樣口 22。
[0029 ]從圖1還可以看出，本實用新型的加液口 21和加樣口 22分別設(shè)在觀察窗2的兩端。
[0030]從圖1還可以看出，本實用新型的加樣口22可采用中間寬兩端窄的燕尾形。
[0031]在本實用新型中，基體I與觀察窗2均由耐高溫、耐高壓、透明的高分子材料制成，單層細(xì)胞液儲存槽12的深度一般為I?100微米，也可針對不同的細(xì)胞類型進行制定不同深度，如用于一般細(xì)菌時，單層細(xì)胞液儲存槽12的深度為I?10微米;如用于一般真菌、動物或植物細(xì)胞時，單層細(xì)胞液儲存槽12的深度為10?30微米;也可針對一些個體大的細(xì)胞制定單層細(xì)胞液儲存槽12的深度為30?60微米或60?100微米等。
[0032]以下是本實用新型中用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片的實施例二
[0033]從圖3可以看出，實施例二與實施例一的不同點在于，基體I與觀察窗2通過固定連接的方式形成一個整體。
[0034]在上述實施例中，加樣口22還可采用中間寬兩端窄的圓弧形。
[0035]以下是本實用新型中載片盒的實施例
[0036]從圖4和圖5可以看出，本實用新型這種載片盒，包括盒體3和盒蓋4，在盒體3內(nèi)沿水平方向設(shè)有若干載片卡位31，在載片卡位31的一端設(shè)有凹槽32，在載片卡位31下方設(shè)有吸水保濕材料33，在盒蓋4內(nèi)沿環(huán)繞有密封圈41，盒蓋4安裝盒體3上，密封圈41與盒體3上口外沿密封連接。
[0037]本實用新型的盒體3和盒蓋4由耐高溫、耐高壓的材料制成，吸水保濕材料33由無菌水或其他保濕材料制成。
[0038]本實用新型用于制作并立即觀察單層細(xì)胞的過程如下:
[0039]1、將含有適當(dāng)細(xì)胞數(shù)量的微量培養(yǎng)液(如10微升)從加樣口 22滴入到單層細(xì)胞液儲存槽12中，培養(yǎng)液會由于毛細(xì)現(xiàn)象被自動吸入并充滿單層細(xì)胞液儲存槽12，單層細(xì)胞樣品即制作完成。
[0040]2、將上述樣品置于顯微鏡下，通過觀察窗2觀察單層細(xì)胞液儲存槽12內(nèi)的單層細(xì)胞即可。立即觀察而不需要長時間培養(yǎng)的樣品，無需在培養(yǎng)液儲存槽11中加培養(yǎng)液。
[0041 ]本實用新型用于長時間培養(yǎng)觀察單層細(xì)胞的過程如下:
[0042]1、將含有適當(dāng)細(xì)胞數(shù)量的微量培養(yǎng)液從加樣口 22滴入到單層細(xì)胞液儲存槽12中，培養(yǎng)液會由于毛細(xì)現(xiàn)象被自動吸入并充滿單層細(xì)胞液儲存槽12;
[0043]2、將微量的新鮮培養(yǎng)液從加液口21滴入至培養(yǎng)液儲存槽11內(nèi)，培養(yǎng)單層細(xì)胞樣品即制作完成；
[0044]3、取出盒體3，在載片卡位31下方加入無菌的吸水保濕材料33，把上述樣品載片放到盒體3的載片卡位31中，蓋上盒蓋4，放入合適溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。觀察時，只需打開盒蓋4，將手指從凹槽32內(nèi)放入取出相應(yīng)的載片即可。
【主權(quán)項】
1.一種用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，包括基體(I)，在該基體(I)上開有若干培養(yǎng)液儲存槽(11)，其特征是:在每一個培養(yǎng)液儲存槽(11)旁邊還分別開有單層細(xì)胞液儲存槽(12)，該單層細(xì)胞液儲存槽(12)與培養(yǎng)液儲存槽(11)連通且深度淺于培養(yǎng)液儲存槽(11)，在培養(yǎng)液儲存槽(11)和單層細(xì)胞液儲存槽(12)的上方設(shè)有一觀察窗(2)，所述觀察窗(2)與基體(I)采用整體式結(jié)構(gòu)，觀察窗(2)在對應(yīng)于培養(yǎng)液儲存槽(11)的位置設(shè)有加液口(21)，觀察窗(2)在對應(yīng)于單層細(xì)胞液儲存槽(12)的位置處設(shè)有加樣口(22)，所述加液口(21)用于向培養(yǎng)液儲存槽(11)內(nèi)添加培養(yǎng)液，加樣口( 22)用于向單層細(xì)胞液儲存槽(12 )內(nèi)滴入細(xì)胞液并自動形成單層細(xì)胞。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，其特征在于:所述單層細(xì)胞液儲存槽(12 )的深度為I?10微米。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，其特征在于:所述加樣口(22)采用中間寬兩端窄的結(jié)構(gòu)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，其特征在于:所述觀察窗(2)與基體(I) 一次成型。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，其特征在于:所述觀察窗(2)與基體(I)固接成一整體。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片，其特征在于:所述基體(I)與觀察窗(2)由耐高溫、耐高壓、透明的高分子材料制成。7.—種與權(quán)利要求1所述的用于培養(yǎng)和顯微觀察單層細(xì)胞的載片配套使用的載片盒，其特征在于:包括盒體(3)和盒蓋(4)，在盒體(3)內(nèi)設(shè)有若干載片卡位(31)，在載片卡位(31)的一端設(shè)有用于放入手指取出載片的凹槽(32)，在載片卡位(31)下方設(shè)有吸水保濕材料(33)。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的載片盒，其特征在于:所述盒體(3)和盒蓋(4)由耐高溫、耐高壓的材料制成。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的載片盒，其特征在于:所述盒蓋(4)內(nèi)沿環(huán)繞有密封圈(41)，該密封圈(41)與盒體(3)上口外沿密封連接。
【文檔編號】G02B21/34GK205691851SQ201620604853
【公開日】2016年11月16日
【申請日】2016年6月20日 公開號201620604853.0, CN 201620604853, CN 205691851 U, CN 205691851U, CN-U-205691851, CN201620604853, CN201620604853.0, CN205691851 U, CN205691851U
【發(fā)明人】李智敏, 嚴(yán)準(zhǔn), 嚴(yán)理, 余永廷, 高春生, 曾糧斌, 陳佳, 程毅, 孫向平, 薛召東
【申請人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所