專利名稱：3-(4-{[4-(4-{[3-(3,3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物、其制備方法、包含該化合物的藥物組合物及其治療各種疾病的用途，特別是呼吸道的炎性和/或過敏性疾病。

背景技術(shù)：
過敏性鼻炎、肺部炎癥和充血是通常與其它疾病如哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、季節(jié)性過敏性鼻炎和常年性過敏性鼻炎相關(guān)的醫(yī)學狀態(tài)。一般，這些狀態(tài)至少部分是由與各種細胞(特別是肥大細胞)的組胺釋放有關(guān)的炎癥介導(dǎo)的。
過敏性鼻炎，也稱作“枯草熱”，影響了全世界大部分的人群。存在兩種類型的過敏性鼻炎，季節(jié)性的和常年性的。季節(jié)性過敏性鼻炎的臨床癥狀通常包括鼻癢和刺激，噴嚏及通常伴隨著鼻塞的流涕。常年性過敏性鼻炎的臨床癥狀相似，但鼻堵塞更突出。兩者中任一類型的過敏性鼻炎都可以引起其它癥狀，如喉和/或眼癢，淚溢和眼周圍的水腫。過敏性鼻炎的癥狀在強度上可以從麻煩不便到消耗性不等。
過敏性鼻炎和其它的過敏狀態(tài)與各種細胞類型的組織胺的釋放有關(guān)，但特別是與肥大細胞有關(guān)。組織胺的生理效應(yīng)典型地通過三種受體亞型介導(dǎo)，稱為H1、H2和H3。H1受體廣泛分布于整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周，并且參與到失眠和急性炎癥中。H2受體介導(dǎo)響應(yīng)于組織胺的胃酸分泌。H3受體出現(xiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周的神經(jīng)末端梢，并介導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的抑制[Hill等人，Pharmacol.Rev.，49253-278，(1997)]。最近發(fā)現(xiàn)了組胺受體家族的第四個成員，稱為H4受體[Hough，Mol.Pharmacol.，59415-419，(2001)]。雖然H4受體的分布表現(xiàn)為局限于免疫和炎癥系統(tǒng)的細胞，該受體的生理作用還有待研究。
血管和神經(jīng)末梢中H1受體的激活是許多過敏性鼻炎癥狀的原因，包括鼻癢、噴嚏和清鼻涕的產(chǎn)生。抗組胺化合物，例如選擇性H1受體拮抗劑藥物如氯苯那敏(chlorphenyramine)和西替利嗪，在治療與過敏性鼻炎相關(guān)的鼻癢、噴嚏和流涕方面是有效的，但對于鼻塞癥狀無效[Aaronson，Ann.Allergy，67541-547，(1991)]。因此H1受體拮抗劑被與擬交感神經(jīng)藥物如偽麻黃堿或羥甲唑啉聯(lián)用以治療過敏性鼻炎的鼻塞癥狀。這些藥物被認為通過激活鼻粘膜中的β-腎上腺素受體并增加血管的緊張度產(chǎn)生解充血作用。擬交感神經(jīng)藥物治療鼻塞的用途經(jīng)常受到中樞神經(jīng)系統(tǒng)刺激特性及它們對血壓和心率的作用的限制。因此，沒有中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)效應(yīng)的減輕鼻塞的治療方法可以具有超過現(xiàn)有療法的優(yōu)勢。
組織胺H3受體同時在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)末梢廣泛表達，并介導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的抑制。對分離的人大隱靜脈中的外周交感神經(jīng)進行體外電刺激導(dǎo)致去甲腎上腺素釋放的增加和平滑肌收縮，這可以被組織胺H3受體激動劑抑制[Molderings等人，Naunyn-Schmiedeberg’s Arch.Pharmacol.，34646-50，(1992)；Valentine等人，Eur.J.Pharmacol.，36673-78，(1999)]。H3受體激動劑也抑制交感神經(jīng)激活對豬鼻粘膜中的血管緊張度的作用[Varty & Hey.，Eur.J.Pharmacol.，452339-345，(2002)]。在體內(nèi)，H3受體激動劑抑制由交感神經(jīng)激活產(chǎn)生的鼻腔氣道阻力的降低[Hey等人，Arzneim-ForschDrug Res.，48881-888，(1998)]。人鼻粘膜中的組織胺H3受體的激活抑制交感神經(jīng)性血管收縮[Varty等人，Eur.J.Pharmacol.，48483-89，(2004)]。另外，H3受體拮抗劑與組胺H1受體拮抗劑聯(lián)用顯示出逆轉(zhuǎn)肥大細胞激活對鼻腔氣道阻力和鼻腔容量-鼻塞的指標-的作用[Mcleod等人，Am.J.Phinol.，13391-399，(1999)]，且進一步的表明H3受體對組胺誘導(dǎo)的鼻堵塞起作用的證據(jù)由在正常人體受試者中進行的組胺鼻激發(fā)研究提供[Taylor-Clark等人，Br.J.Pharmacol.，144，867-874，(2005)]，雖然與此相關(guān)的H3機理可能是新的和沒有先例的。
現(xiàn)發(fā)現(xiàn)一類新的化合物是組胺H1和H3受體的雙拮抗劑。組織胺H1和H3受體“雙”拮抗劑意指該化合物對兩個受體亞型都有活性。特別是，對H1受體的活性可以在對H3受體的活性的大約十倍之內(nèi)，更特別是，這類化合物可以對兩種受體亞型是大致等效的。


發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明在第一方面提供式(I)的化合物或其鹽如藥物上可接受的鹽
其中 萘環(huán)可以在2、3、4、5、6、7或8位被R1取代，且R1表示-CH2CH2COOH或-CH＝C(CH3)COOH。
本發(fā)明的化合物可望用于治療各種與細胞如肥大細胞的組胺釋放有關(guān)的病癥，特別是炎性和/或過敏性疾病，如呼吸道的炎性和/或過敏形疾病，比如過敏性鼻炎。
本發(fā)明的化合物可顯示超過已知的H1/H3受體雙拮抗劑激動劑的特性，它們可以具有一種或多種如下特性 (i) pKi大于約7的H3受體拮抗劑活性； (ii)pKi大于7的H1受體拮抗劑激動劑活性； (iii)低中樞神經(jīng)系統(tǒng)穿透性； (iv)改善的生物利用度； (v)更低的清除率和/或更長的血中半衰期。
具有這一特性的化合物可望是口服有效的，和/或能夠每日一次給藥和/或與其它現(xiàn)有治療相比可能進一步具有改善的副作用形象。
在本發(fā)明的一個實施方式中，R1表示-CH2CH2COOH。
在本發(fā)明的另一實施方式中，萘環(huán)在4位被R1取代。
式(I)的化合物包括下面描述的實施例的化合物及其鹽，如藥物上可接受的鹽。
因此，本發(fā)明在另一方面提供化合物3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，或其鹽如藥物上可接受的鹽。
應(yīng)進一步理解，下面提到的本發(fā)明化合物或本發(fā)明的化合物包括一種或多種式(I)的化合物及其鹽如藥物上可接受的鹽。
本發(fā)明涵蓋式(I)化合物的幾何異構(gòu)體，包括順式和反式構(gòu)型，及位置異構(gòu)體(regioisomer)，包括外雙鍵和內(nèi)雙鍵(如，-CH＝C(CH3)COOH和-CH-C(＝CH2)COOH)，不管是作為分離的單個異構(gòu)體如基本沒有其它異構(gòu)體(即純的)，還是作為其混合物。因此，例如，本發(fā)明涵蓋分離的單個異構(gòu)體，如基本沒有其它異構(gòu)體(即純的)，從而存在的其它異構(gòu)體低于10％，例如低于1％或低于0.1％。幾何異構(gòu)體的分離可以通過常規(guī)技術(shù)實現(xiàn)，如通過分步結(jié)晶、層析法或HPLC。
式(I)的特定化合物可能以幾種互變異構(gòu)形式中的一種形式存在。可以理解本發(fā)明涵蓋式(I)的化合物的所有互變異構(gòu)體，不管是單個互變異構(gòu)體還是其混合物。
式(I)的化合物可以是晶體或無定形形式。另外，式(I)的化合物可以以一種或多種多晶型形式存在。因此，本發(fā)明的范圍包括式(I)化合物的所有多晶型形式。一般，式(I)化合物的熱力學穩(wěn)定性最高的多晶型形式是特別有意義的。
式(I)化合物的多晶型形式可以利用許多常規(guī)的分析方法進行定性和區(qū)分，包括但不限于，X射線粉末衍射(XRPD)圖、紅外(IR)光譜、拉曼光譜、差示掃描量熱法(DSC)、熱重分析(TGA)和固態(tài)核磁共振(NMR)。
可以認識到，許多有機化合物可能與溶劑形成溶劑化物，其中它們在該溶劑中反應(yīng)或從該溶劑中沉淀或結(jié)晶。例如，與水的溶劑化物稱為“水合物”。具有高沸點的溶劑和/或具有高的形成氫鍵傾向的溶劑，如水、二甲苯、N-甲基吡咯烷酮和甲醇，可以被用于形成溶劑化物。鑒定溶劑化物的方法包括但不限于，NMR和微量分析。因此，式(I)化合物的溶劑化物在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的化合物可以為藥物上可接受的鹽的形式和/或以藥物上可接受的鹽施用。關(guān)于合適的鹽，參見Berge等人，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19。合適的藥物上可接受的鹽包括酸和堿加成鹽。
典型地，藥物上可接受的鹽可以方便地通過使用需要的適宜的酸或堿制備。該鹽可以從溶液中沉淀并通過過濾收集或可以通過蒸發(fā)溶劑而回收。
藥物上可接受的酸加成鹽可以通過式(I)化合物與合適的無機或有機酸(如氫溴酸、鹽酸、甲酸、硫酸、硝酸、磷酸、琥珀酸、馬來酸、乙酸、富馬酸、檸檬酸、酒石酸、苯甲酸、對甲苯磺酸、甲磺酸或萘磺酸)，任選在合適的溶劑如有機溶劑中，反應(yīng)形成，生成的鹽通常通過例如結(jié)晶和過濾分離。因此，式(I)化合物的藥物上可接受的酸加成鹽可以是例如氫溴酸鹽、鹽酸鹽、甲酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、乙酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、苯甲酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽或萘磺酸鹽。
在一種實施方式中，提供了化合物3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸的鹽酸鹽。
在另一實施方式中，提供了化合物3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸的氫溴酸鹽。
藥物上可接受的堿加成鹽可以通過式(I)的化合物與合適的無機或有機堿(如三乙胺、乙醇胺、三乙醇胺、膽堿、精氨酸、賴氨酸或組氨酸)，任選在合適的溶劑如有機溶劑中，反應(yīng)形成，生成的堿加成鹽通常通過例如結(jié)晶和過濾分離。
其它合適的藥物上可接受的鹽包括藥物上可接受的金屬鹽，例如藥物上可接受的堿金屬或堿土金屬鹽，如鈉、鉀、鈣或鎂鹽；特別是藥物上可接受的可存在于式(I)化合物中的一個或多個羧酸部分的金屬鹽。其它的非藥物上可接受的鹽，如草酸鹽或三氟乙酸鹽，可以用于，例如，分離本發(fā)明的化合物，并且被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的范圍包括式(I)化合物的鹽的所有可能的化學計量和非化學計量形式。
包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)的還有本發(fā)明化合物和鹽的所有的溶劑化物如水合物以及多晶型形式。
本發(fā)明還提供制備式(I)化合物或其鹽的方法。
按照第一方法(A)，式(I)的化合物可以通過脫保護和任選地氫化式(Ia)的化合物而制備，
其中

表示單鍵或雙鍵，且萘環(huán)在2、3、4、5、6、7、8位被R1a取代，R1a表示R1的保護衍生物，如R1的酯，例子有-CH2CH2COORx或-經(jīng)CH＝C(CH3)COORx，其中各Rx獨立地表示羧酸保護基團如C1-C6烷基，例子有甲基、乙基或叔丁基，特別是甲基或乙基。其它合適的保護基團包括芳烷基如芐基。
脫保護可以在標準條件下進行。因此，羧酸酯的水解可以在合適的水性溶劑系統(tǒng)(如甲醇/水或四氫呋喃/水)中，任選在升高溫度下(如在回流情況下)，在適宜的堿如氫氧化鈉或氫氧化鉀存在下進行。或者，羧酸酯例如叔丁基酯的水解可以在酸水解的標準條件下在合適的酸(如二氧六環(huán)中氯化氫)存在下進行。當保護基團是芳烷基如芐基時，可以采用通過在標準條件下-例如在如鈀/碳催化劑的金屬催化劑存在下-的氫解進行脫保護。
可以在標準條件下進行氫化。因此，氫化可以在合適的氫化劑(如鈀/碳或氧化鉑)的存在下在合適的溶劑(如乙醇)中，任選在大氣壓下及任選在升高溫度下(例如40-60℃)進行。
在方法A的一個實施方式中，R1a定義如上，且

表示單鍵，在這種情況下氫化步驟不需要。
式(Ia)化合物可以通過式(II)化合物與式(III)化合物在酰胺形成條件下反應(yīng)而制備，
其中R1a定義如式(Ia)，
其中

表示單鍵或雙鍵。
式(Ia)的酰胺可以在酰胺偶聯(lián)的標準條件下制備，例如在合適的偶聯(lián)劑(如O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU))存在下，在合適的堿(如三乙胺)存在下，在適宜的溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)中。
或者，化合物(Ia)可以通過式(II)化合物的酰氯與胺(III)在0-20℃的溫度下在溶劑(如二氯甲烷)中在合適的堿(如三乙胺或碳酸鉀)存在下反應(yīng)而制備。
其中R1a表示-CH2CH2COORx且Rx定義如上的式(II)化合物可以通過式(IV)化合物的氫化制備，
其中萘環(huán)在2、3、4、5、6、7或8位被R1b取代，且R1b表示-CH＝CH-COORx，Rx定義如上。
氫化在標準條件下進行。因此，氫化可以在合適的氫化劑(如鈀/碳或氧化鉑)存在下在合適的溶劑(如乙醇)中，任選在大氣壓下及任選在升高溫度(如40-60℃)下進行。
如上定義的式(IV)化合物可以通過Heck反應(yīng)制備，其中式(V)化合物或其保護衍生物與丙烯酸酯(如丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸叔丁酯和丙烯酸芐酯)反應(yīng)，
其中萘環(huán)在2、3、4、5、6、7或8位被溴或碘取代。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，Br/I取代基處于式(IV)化合物中要引入羧酸酯基團的位置。
一般，Heck反應(yīng)可以通過在升高溫度下(例如大約100℃)下在合適的溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)中在合適的堿(如三乙胺)、膦(如三苯基膦)、合適的催化劑(如鈀(II)乙酸鹽)存在下完成。
在一替代方法中，上述式(IV)化合物可以通過維蒂希反應(yīng)(Wittigreaction)制備，其中式(VI)的相應(yīng)化合物與含有烷氧羰基亞甲基基團(-CH-COORx，其中Rx表示C1-6烷基)的磷內(nèi)鎓鹽(如烷氧羰基亞甲基-三苯基膦)在合適的溶劑(如甲苯)中在升高溫度下(如回流)反應(yīng)，
其中萘環(huán)在2、3、4、5、6、7或8位被CHO取代。
R1a表示-CH＝C(CH3)COORx且Rx定義如上的式(II)化合物可以通過Heck反應(yīng)制備，其中式(V)化合物或其保護衍生物與丙烯酸酯(如甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯或甲基丙烯酸叔丁酯)在與如上所述的Heck反應(yīng)相似的條件下反應(yīng)。
或者，R1a表示-CH＝C(CH3)COORx且Rx定義如上的式(II)的化合物可以通過維蒂希反應(yīng)制備，其中如上所述的式(VI)的化合物與含有烷氧羰基亞甲基基團(-CH-COORx，其中Rx表示C1-6烷基)的內(nèi)鎓鹽(如烷氧羰基亞甲基-三苯基膦)在與如上所述的維蒂希反應(yīng)相似的條件下反應(yīng)。
式(V)和(VI)的化合物是已知的方法或按照這里描述的方法由商購的材料(例如，1，4-二溴萘可以從Acros和/或Alfa購得)制備。5-溴-1-萘羧酸可以通過J.E.Baldwin等人，Tetrahedron，1990，46，3019-28中描述的方法制備，4-溴-1-萘羧酸可以通過Can.J.Chem.1981，59，2629-41中描述的方法制備，而8-甲酰基-1-萘羧酸可以通過J.Am.Chem.Soc.，1949，71，1870中描述的方法制備。
丙烯酸酯是已知的和/或可商購的。丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯和丙烯酸芐基酯可從Aldrich和/或Acros和/或ABCR和/或Chemos得到。
式(III)的化合物可以按照下面的反應(yīng)路線制備
其中， 1.碳酸鉀，2-丁酮； 2.碘化鈉，碳酸鉀，乙腈； 3.nBuLi，THF；可選擇地，在環(huán)境溫度下可以用異丙基氯化鎂代替nBuLi； 4.a)三乙基硅烷，三氟乙酸，二氯甲烷；b)醚中的2M HCl，以產(chǎn)生式(III)化合物的混合物； 5.任選的氫化步驟，10％wt鈀碳，乙醇； 6.氯化氫，乙醇。
可以理解，如上所示的式(III)化合物的混合物可以在后續(xù)反應(yīng)中應(yīng)用而不需要進行氫化步驟5。
4-碘苯酚、1-溴氯丙烷、3，3-二甲基哌啶和N-Boc-哌啶酮是已知的和/或可商購得到，例如從Aldrich、Alfa、Manchester Organics、Matrix Scientific、ASDI和/或Chem Service得到。
按照第二方法(B)，式(I)化合物可以通過以下步驟制備 (i)將式(II)化合物與式(III)化合物反應(yīng)以形成式(Ia)的化合物；和 (ii)將式(Ia)化合物脫保護和任選地脫氫以形成式(I)化合物。
在方法(B)中，中間體保護的酰胺(例如酰胺酯)(Ia)不被分離。酰胺偶聯(lián)和脫保護(如通過羧酸酯水解)及任選的氫化可以在如上所述的標準條件下進行。
按照第三方法(C)，其中R1表示-CH2CH2COOH的式(I)化合物可以通過式(Ic)化合物的氫化和脫保護制備，
其中

表示單鍵或雙鍵，且萘環(huán)可以在2、3、4、5、6、7或8位被R1c取代，R1c表示-CH＝CHCOORx，其中Rx表示合適的羧酸保護基團如芳烷基(如芐基)。
氫化和脫保護(通過水解)可以在標準條件下進行，如在這里描述的那些條件，并且可以組合在單一步驟中。
式(Ic)化合物可以通過式(IV)的化合物與式(III)的化合物反應(yīng)制備。
按照第四方法(D)，式(I)化合物可以通過其它式(I)化合物的互變制備。因此，式(I)的化合物也可以利用常規(guī)的互變方法(如幾何異構(gòu)體的異構(gòu)化)由其它式(I)化合物制備，比如，順式和反式異構(gòu)體之間的互變及外雙鍵和內(nèi)雙鍵之間的互變，舉例來說，-CH＝C(CH3)COOH與-CH2-C(＝CH2)COOH之間的互變。它也可以包括改變式(I)的化合物的平衡離子(counterion)和鹽形式的過程。因此，從式(I)其它化合物的互變(方法D)構(gòu)成本發(fā)明的進一步的一個方面。
因此，本發(fā)明提供制備式(I)化合物或其鹽的方法，該方法選自這里的方法(A)、(B)、(C)或(D)，并且任選地隨后形成鹽。
典型地，鹽可以方便地利用需要的適當?shù)乃峄驂A制備。該鹽可以從溶液中沉淀并通過過濾收集或可以通過蒸發(fā)溶劑而回收。可以理解，式(I)化合物的游離堿可以根據(jù)需要在鹽形成前分離或不分離。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，在式(I)的化合物的制備中使用中間體的保護衍生物可能是理想的。因此，上述方法可能需要作為中間步驟或終步驟的脫保護以產(chǎn)生所需要的化合物。功能基團的保護和脫保護可以利用常規(guī)手段進行。因此羧酸基團可以任何常規(guī)的保護基團進行保護，例如，在Protective Groups in Organic Chemistry，Ed.J.F.W.McOmie(Plenum Press，1973)或Protective Groups in Organic Synthesisby Theodora W.Green(john Wiley and Sons，1991)或P.J.Kocienski inProtecting Groups，Georg Thieme Verlag 1994中描述的。
合適的羧酸保護基團的例子包括選自烷基(如甲基、乙基或叔丁基)、芳烷基(如芐基、二苯基甲基或三苯基甲基)和如三烷基甲硅烷基的甲硅烷基(如叔丁基二甲基甲硅烷基)。羧酸保護基團可以通過常規(guī)技術(shù)除去。因此，例如烷基和甲硅烷基可以通過溶劑分解除去，如通過酸性或堿性條件下的水解。如三苯基甲基的芳烷基可以相似地通過溶劑分解除去，如在酸性條件下的水解。如芐基的芳烷基可以通過在金屬催化劑(如鈀碳催化劑)存在下的氫解作用進行切割。
式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽可望具有有利的抗炎和/或抗過敏效果的疾病狀態(tài)的例子包括，呼吸道疾病，如支氣管炎(包括慢性支氣管炎)、哮喘(包括過敏原誘發(fā)的哮喘反應(yīng))、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、囊性纖維化病、竇炎和過敏性鼻炎(季節(jié)性的和常年的)。其它疾病狀態(tài)包括胃腸道疾病，如包括炎性腸病(如克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)的腸的炎性疾病和輻射暴露或過敏原接觸繼發(fā)的腸的炎性疾病。
另外，本發(fā)明的化合物可用于治療腎炎、皮膚病(如牛皮癬)、濕疹、過敏性皮炎和超敏反應(yīng)。
本發(fā)明的化合物也可以用于治療鼻息肉病、結(jié)膜炎或瘙癢癥。
另外的疾病包括胃腸道的炎性疾病，如炎性腸病。
特別值得關(guān)注的疾病是過敏性鼻炎。
作為H3受體拮抗劑的化合物也用于其它疾病，如非過敏性鼻炎。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，這里所指的治療或療法延及所述疾病的預(yù)防及治療。
如上所述，式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽可用作治療藥劑。
本發(fā)明的一個進一步的方面提供用于治療的式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽用于制造治療任何上述疾病的藥物的用途。
在又一個方面中，提供了一種在需要的人或動物受試者中治療任何上述疾病的方法，該方法包括施用有效量的式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽。
當用于治療時，式(I)化合物通常配制成合適的藥物組合物。這種藥物組合物可以采用標準方法制備。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽的組合物，任選具有一種或多種藥物上可接受的載體和/或賦形劑。
本發(fā)明的組合物，其可以適當?shù)卦诃h(huán)境溫度下和大氣壓下通過混合制備，可適用于口服、胃腸外、直腸或鼻內(nèi)給藥，因而可以是片劑、膠囊、液體制劑(如口服液體制劑)、粉劑、顆粒劑、錠劑、可重配粉末、可注射或輸注的溶液或懸浮液、或栓劑。合適的組合物可以對于各組合物的特定類型按照現(xiàn)有技術(shù)中熟知的方法制備。
適宜口服給藥的組合物特別有意義。
適于口服給藥的藥物組合物可以表現(xiàn)為離散的單元，如膠囊或片劑；粉末或顆粒劑；水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；可食性泡沫或泡劑(whip)；或者水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。
例如，對于片劑或膠囊形式的口服，活性藥物成分可以與口服的非毒性的藥物可接受的惰性載體(如乙醇、甘油、水等等)結(jié)合。適于引入片劑或膠囊的粉末可以通過碾磨化合物到適當?shù)募毝?如通過微粉化)并與類似地制備的藥物載體(如可口服的碳水化合物，舉例來說，淀粉或甘露醇)混合而制備。調(diào)味劑、防腐劑、分散劑和著色劑也可以存在。
膠囊可以通過制備如上所述的粉末混合物并填充形成的膠囊殼而制造。助流劑和潤滑劑(如硅膠、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇)可以在填充操作之前加入粉末混合物中。也可以加入崩解劑或增溶劑(如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉)以改善膠囊被咽下時的藥物利用度。
另外，當想要或必要時，合適的粘合劑、助流劑、潤滑劑、甜味劑、調(diào)味劑、崩解劑和著色劑也可以加入混合物中。合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然和合成的樹膠(如阿拉伯樹膠、黃芪膠或藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等等。在這些劑型中使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、皂土、黃原膠等等。片劑通過，例如，制備粉末混合物，制粒或壓制，加入潤滑劑和崩解劑并壓制成片而配制。粉末混合物通過混合適當?shù)胤鬯榈幕衔锱c如上所述的稀釋劑或基質(zhì)及任選的粘合劑(如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、或聚乙烯吡咯烷酮)、溶解延遲劑(如石蠟)、吸收加速劑(如季鹽)和/或吸收劑(如皂土、高嶺土或磷酸二鈣)。粉末混合物可以通過用粘合劑如糖漿、淀粉糊、阿拉伯膠漿(acadia mucilage)或者纖維素物質(zhì)或聚合物的溶液潤濕并強制通過篩網(wǎng)而成粒。作為成粒的替代方式，粉末混合物可以通過壓片機，結(jié)果未完全成形的小塊破碎成粒。顆粒通過加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石粉或礦物油被潤滑以防止粘結(jié)到壓片模上。潤滑的混合物隨后被壓成片。本發(fā)明的化合物也可以與自由流動的惰性載體結(jié)合并被直接壓成片而不經(jīng)過成粒或成塊步驟。可以設(shè)置由蟲膠的密封層、糖或聚合材料的涂層和蠟的上光層構(gòu)成的透明或不透明的保護性涂層。染料可以加入到這些涂層中以區(qū)分不同的單位劑型。
口服液，如溶液、糖漿和酏劑，可以被制備成劑量單位形式，從而既定的量包含預(yù)定量的化合物。糖漿可以通過將化合物溶解在適當調(diào)味的水性溶液中制備，而酏劑通過利用非毒性醇載體制備。懸浮液可以通過將化合物分散于非毒性載體中配制。增溶劑和乳化劑(如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐劑、調(diào)味添加劑(如薄荷油)或者天然甜味劑或糖精或其它的人造甜味劑等等也可以加入。
合適的情況下，口服的劑量單位組合物可以是微囊包封的。該制劑也可以通過例如在聚合物、蠟等等中涂覆或包埋顆粒材料而制成延長或持續(xù)釋放的形式。
對于鼻腔內(nèi)給藥，合適的組合物可以任選地包含一種或多種助懸劑、一種或多種防腐劑、一種或多種潤濕劑和/或一種或多種等滲調(diào)節(jié)劑。
助懸劑的例子包括羧甲基纖維素、硅鋁酸鎂(veegum)、黃芪膠、皂土、甲基纖維素和聚乙二醇，例如微晶纖維素或羧甲基纖維素鈉。
為了穩(wěn)定性的目的，本發(fā)明的組合物可以通過包含防腐劑加以保護而免于微生物污染和生長。藥物可接受的抗菌劑或防腐劑的例子可以包括季銨化合物(如苯扎氯銨、芐索氯銨、溴棕三甲銨和氯化十六烷吡啶)、汞劑(如硝酸苯汞、乙酸苯汞和硫柳汞)、醇劑(如氯丁醇、苯乙醇和苯甲醇)、抗菌酯(如對羥基苯甲酸的酯)、螯合劑(如乙二胺四乙酸(EDTA))和其它抗菌劑(如氯己定、氯甲酚、山梨酸及其鹽、和多粘菌素)。
組合物，如包括懸浮藥劑的鼻用組合物，可以包括藥物可接受的潤濕劑，其起到潤濕藥劑顆粒以利于其在組合物的水相中分散的作用。典型地，使用的潤濕劑的量在混合過程中不會引起分散體起泡。潤濕劑的例子包括脂肪醇、酯和醚，如聚氧乙烯(20)山梨醇單油酸酯(聚山梨醇酯80)。
可以添加等滲調(diào)節(jié)劑以獲得與體液(如鼻腔液)的等滲性，從而降低刺激水平。等滲調(diào)節(jié)劑的例子包括氯化鈉、右旋糖和氯化鈣。
本發(fā)明的鼻腔內(nèi)組合物可以通過使用預(yù)壓縮泵(如VP3、VP7或改進型，Valois SA制造的型號)施用到鼻腔通道中。這一類型的泵據(jù)認為是有利的，因為它們可以保證組合物不被釋放或霧化直到充分的壓力施加其上，否則施用的劑量可能不夠。典型地，這些預(yù)壓縮泵可以與能夠容納8-50ml組合物的瓶子(玻璃或塑料)一起使用，且各次噴射一般釋放50-100μL。
對于胃腸外給藥，流體單位劑型利用本發(fā)明的化合物或其藥物上可接受的鹽和無菌載體(vehicle)制備。根據(jù)載體和所用的濃度的不同，化合物可以懸浮或溶解在載體中。在溶液的制備中，化合物可以溶解于注射用和過濾滅菌的載體中，然后注入合適的小瓶或安瓿并密封。有利地，輔料，如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑，被溶解在載體中。為增強穩(wěn)定性，組合物可以在注入小瓶后冷凍，在真空下除去水。胃腸外懸浮液以基本相同的方式制備，除了該化合物被懸浮在載體中而不是被溶解，且滅菌不可能通過過濾完成。化合物可以在懸浮于滅菌載體之前通過暴露于環(huán)氧乙烷滅菌。表面活性劑或潤濕劑可以包括在組合物中以利于化合物的均勻分布。
組合物可以根據(jù)施用方法的不同包含從約0.1％wt至99％wt的活性物質(zhì)，如從約10％wt至60％wt。用于治療前述病癥的化合物的劑量以常用的方式依據(jù)疾病的嚴重程度、患者的體重和其它類似因素變化。但是，作為總的指導(dǎo)原則，合適的單位劑量可能是0.05-1000mg，更合適是約1.0-200mg，例如20-100mg，且這一單位劑量可以一天多次施用，例如一天兩次或三次。這一治療的時間可能為幾周或幾個月。在一種實施方式中。根據(jù)本發(fā)明的化合物和藥物組合物適用于口服和/或能夠一天一次施用，例如在20-200mg范圍內(nèi)的劑量(如約20-100mg)。
根據(jù)本發(fā)明的化合物和藥物組合物也可以與一種或多種其它治療藥物聯(lián)用或包含一種或多種其它治療藥物，例如其它抗組胺劑(如H4受體拮抗劑)、抗膽堿能藥、抗炎藥(如皮質(zhì)類固醇，比如氟替卡松丙酸酯、二丙酸氯地米松、糠酸莫米他松、丙炎松、布地縮松和WO02/12265中公開的類固醇)，或非甾類抗炎藥物(NSAID)(如色甘酸鈉、尼多考米鈉(nedocromil sodium))、PDE-4抑制劑、白三烯拮抗劑、脂肪氧合酶抑制劑、趨化因子拮抗劑(如CCR3、CCR1、CCR2、CCR4、CCR8、CXCR1、CXCR2)、IKK拮抗劑、iNOS抑制劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶拮抗劑、β-2整聯(lián)蛋白拮抗劑和腺苷2a激動劑，或β類腎上腺素能藥劑(如沙美特羅、沙丁胺醇、福莫特羅、非諾特羅、特布他林和WO 02/66422、WO 02/270490、WO02/076933、WO03/024439和WO 03/072539中描述的β激動劑或其鹽)，或抗感染藥，如抗生素藥和抗病毒藥。本領(lǐng)域技術(shù)人員很清楚，在適當?shù)那闆r下，其它藥劑可以以鹽(如堿鹽或胺鹽或酸加成鹽)、或前藥、或酯(如低級烷基酯)或溶劑化物(如水合物)的形式使用，以優(yōu)化該藥劑的活性和/或穩(wěn)定性和/或物理性質(zhì)(如溶解度)。也很清楚，在適當?shù)那闆r下，藥劑可以以光學純的形式使用。
因此本發(fā)明在進一步的方面提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽加上一種或多種(如一種或兩種，舉例說，一種)其它藥物活性劑的組合，任選具有一種或多種藥物可接受載體和/或賦形劑。
其它的組織胺受體拮抗劑，其可以單獨使用或與H1/H3受體雙拮抗劑聯(lián)用，包括H4受體拮抗劑(和/或反向激動劑)，例如在Jablonowski等人，J.Med.Chem.463957-3960(2003)中公開的化合物。
在一種實施方式中，本發(fā)明提供包括式(I)化合物和β2-腎上腺素受體激動劑的組合。
β2-腎上腺素受體激動劑的例子包括沙美特羅(其可以是消旋體或單個對映體，如R-對映體)、沙丁胺醇(其可以是消旋體或單個對映體，如R-對映體)、福莫特羅(其可以是消旋體或單個非對映體，如R，R-非對映體)、沙甲胺醇、非諾特羅、卡莫特羅、依坦特羅、那明特羅、克侖特羅、吡布特羅、氟丁特羅(flerbuterol)、茶丙特羅、班布特羅、茚達特羅、特布他林及其鹽，例如沙美特羅的羥萘甲酸(1-羥基-2-萘甲酸)鹽、沙丁胺醇游離堿的硫酸鹽或福莫特羅的富馬酸鹽。在一種實施方式中，本發(fā)明的組合可以包括長效β2-腎上腺素受體激動劑，如提供大約12小時或更長時間的有效支氣管擴張的化合物。
其它的β2-腎上腺素受體激動劑包括那些在WO 02/066422、WO02/070490、WO 02/076933、WO 03/024439、WO 03/072539、WO03/091204、WO 04/016578、WO 2004/022547、WO 2004/037807、WO2004/037773、WO 2004/037768、WO 2004/039762、WO 2004/039766、WO 01/42193和WO 03/042160中描述的β2-腎上腺素受體激動劑。
β2-腎上腺素受體激動劑的例子包括 3-(4-{[6-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3-(羥甲基)苯基]乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺； 3-(3-{[7-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3-(羥甲基)苯基]乙基}氨基)庚基]氧基}丙基)苯磺酰胺； 4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2，6-二氯芐基)氧基]乙氧基}己基)氨基]-1-羥乙基}-2-(羥甲基)苯酚； 4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(環(huán)戊基磺酰基)苯基]丁氧基}己基)氨基]-1-羥乙基}-2-(羥甲基)苯酚； N-[2-羥基-5-[(1R)-1-羥基-2-[[2-4-[[(2R)-2-羥基-2-苯乙基]氨基]苯基]乙基]氨基]乙基]苯基]甲酰胺； N-2{2-[4-(3-苯基-4-甲氧基苯基)氨基苯基]乙基}-2-羥基-2-(8-羥基-2(1H)-喹啉酮-5-基)乙胺；和 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙基氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮。
β2-腎上腺素受體激動劑可以是與選自硫酸、鹽酸、富馬酸、羥萘甲酸(如1-或3-羥基-2-萘甲酸)、肉桂酸、取代的肉桂酸、三苯基乙酸、氨基磺酸、對氨基苯磺酸、萘丙烯酸、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-或4-羥基苯甲酸、4-氯苯甲酸和4-苯基苯甲酸的藥物可接受的酸形成的鹽。
在另一實施方式中，本發(fā)明提供包括式(I)化合物和腺苷2a激動劑的組合。
A2a激動劑包括在國際專利申請PCT/EP2005/005651中公開的那些A2a激動劑，如(2R，3R，4S，5R，2’R，3’R，4’S，5’R)-2，2’-{反式-1，4-環(huán)己烷二基二[亞氨基(2-{[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基}-9H-嘌呤-6，9-二基)]}二[5-(2-乙基-2H-四唑-5-基)四氫-3，4-呋喃二醇]。
在另一實施方式中，本發(fā)明提供一種包括式(I)化合物和抗炎藥物的組合。
抗炎藥物包括皮質(zhì)類固醇類。可以與本發(fā)明的化合物組合使用的合適的類固醇類藥物是那些具有抗炎活性的口服和吸入的類固醇及其前藥。實例包括甲基強的松龍、強的松龍、地塞米松、氟替卡松丙酸酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃甲酰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯(氟替卡松糠酸酯)、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-(2-氧代-四氫-呋喃-3S-基)酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基羰基)氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氰甲基酯和6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯、倍氯米松酯(例如17-丙酸酯或17，21-二丙酸酯)、布地縮松、氟尼縮松、莫美他松酯(例如糠酸莫美他松)、去炎舒松、羅氟奈德、環(huán)索奈德、(16α，17-[[(R)-環(huán)己基亞甲基]二(氧基)]-11β，21-二羥基-孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮)、布替可特丙酸酯、RPR-106541和ST-126。特別重要的皮質(zhì)類固醇類可能包括氟替卡松丙酸酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃甲酰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基羰基)氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氰甲基酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯和糠酸莫美他松。在一種實施方式中，皮質(zhì)類固醇為6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃甲酰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯或糠酸莫美他松。
可能對反式阻遏具有超過反式激活的選擇性并可用于聯(lián)合治療的具有糖皮質(zhì)激素激動作用的非甾族化合物包括在下面的專利申請和專利中公開的那些WO03/082827、WO98/54159、WO04/005229、WO04/009017、WO04/018429、WO03/104195、WO03/082787、WO03/082280、WO03/059899、WO03/101932、WO02/02565、WO01/16128、WO00/66590、WO03/086294、WO04/026248、WO03/061651、WO03/08277、WO06/000401、WO06/000398和WO06/015870。
抗炎藥物包括非甾體抗炎藥物(NSAID)。
NSAID包括色甘酸鈉、奈多羅米鈉、磷酸二酯酶(PDE)抑制劑(如，茶堿、PDE4抑制劑或混合PDE3/PDE4抑制劑)、白三烯拮抗劑、白三烯合成抑制劑(如孟魯司特)、iNOS(誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶)抑制劑(如口服iNOS抑制劑)、IKK拮抗劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整聯(lián)蛋白拮抗劑和腺苷受體激動劑或拮抗劑(如腺苷2a激動劑)、細胞因子拮抗劑(如趨化因子拮抗劑，例如CCR1、CCR2、CCR3、CCR4或CCR8拮抗劑)或細胞因子合成抑制劑、或5-脂肪氧合酶抑制劑。iNOS抑制劑包括在WO93/13055、WO98/30537、WO02/50021、WO95/34534和WO99/62875中的公開的那些。
在一種實施方式中，本發(fā)明提供式(I)化合物與磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑聯(lián)用的用途。可用于本發(fā)明的這一方面的PDE4特異性抑制劑可以是任何已知抑制PDE4酶或被發(fā)現(xiàn)可作為PDE4抑制劑的化合物，且其僅為PDE4抑制劑，不是除PDE4外還抑制PDE族其它成員如PDE3和PDE5的化合物。
可能有益的化合物包括順式-4-氰基-4-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-羧酸、2-甲氧羰基-4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-酮和順式-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-醇]。還有，在1996年9月3日批準的美國專利5552438中描述的順式-4-氰基-4-[3-(環(huán)戊氧基)-4-甲氧基苯基]環(huán)己烷-1-羧酸(也稱作西洛司特)及其鹽、酯、前藥或物理形式(physical form)。
其它PDE4抑制劑包括來自Elbion的AWD-12-281(Hofgen，N.等人，15th EFMC Int.Symp.Med.Chem.，(Sept 6-10，Edinburgh)1998，Abst.P.98；CAS索引號247584020-9)；命名為NCS-613(INSERM)的9-芐基腺嘌呤衍生物；來自Chiroscience和Schering-Plough的D-4418；稱為CI-1018(PD-168787)且由Pfizer所有的苯并二氮雜

PDE4抑制劑；Kyowa Hakko于WO99/16766中公開的苯并二氧雜環(huán)戊烯衍生物；來自Kyowa Hakko的K-34；來自Napp的V-11294(Landells，L.J.等人，Eur.Resp.J.[Ann.Cong.Eur.Resp.Soc.(Sept 19-23，Geneva)1998]1998，12(Suppl.28)Abst P2393)；來自Byk-Gulden的羅氟司特(CAS索引號162401-32-3)和phthalazinone(WO99/47505)、普馬芬群，(-)-p-[(4aR*，10bS*)-9-乙氧基-1，2，3，4，4a，10b-六氫-8-甲氧基-2-甲基苯并[c][1，6]二氮雜萘-6-基]-N，N-二異丙基苯甲酰胺，其為Byk-Gulden(現(xiàn)在為Altana)制備并公開的混合PDE3/PDE4抑制劑；由Almirall-Prodesfarma開發(fā)的阿羅茶堿；來自Vernalis的VM554/UM565；或T440(Tanabe Seiyaku；Fuji，K.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，284(1)162，(1998))和T2585。
其它可能值得關(guān)注的化合物在公布的國際專利申請WO04/024728(Glaxo Group Ltd)、WO04/056823(Glaxo Group Ltd)和WO04/103998(Glaxo Group Ltd)中公開。
在再另一種實施方式中，本發(fā)明提供包括式(I)化合物與抗膽堿能藥物的組合。
抗膽堿能藥物為那些用作毒蕈堿性受體拮抗劑的化合物，特別是那些作為M1或M3受體的拮抗劑、M1/M3或M2/M3受體的雙拮抗劑或M1/M2/M3受體的泛拮抗劑(pan-antagonist)。通過吸入施用的代表化合物包括異丙托品(例如，商品名為愛喘樂(Atrovent)的溴化物，CAS22254-24-6)、氧托品(例如，溴化物，CAS 30286-75-0)、和噻托(例如，商品名為適喘樂(Spiriva)溴化物，CAS 136310-93-5)。值得關(guān)注的還有瑞伐托酯(例如，氫溴酸鹽，CAS 262586-79-8)和WO01/04118中公開的LAS-34273。口服的代表化合物包括哌侖西平(例如，CAS 28797-61-7)、達非那新(例如，CAS 133099-04-4或商品名為Enablex的氫溴酸鹽，CAS 133099-07-7)、奧昔布寧(例如，商品名為尿多靈(Ditropan)的CAS 5633-20-5)、特羅地林(例如，CAS15793-40-5)、托特羅定(例如，CAS 124937-51-5或商品名為Detrol的酒石酸鹽CAS 124937-52-6)、otilonium(例如，商品名為斯巴敏(Spasmomen)的溴化物，CAS 26095-59-0)、托司氯銨(例如，CAS10405-02-4)和素非那新(例如，CAS 242478-37-1或CAS 242478-38-2或商品名為Vesicare也稱為YM-905的琥珀酸鹽)。
其它的抗膽堿能藥物包括式(XXI)的化合物，其在美國專利申請60/487981中公開
其中連接在托烷環(huán)上的烷基鏈的特定定向是內(nèi)，R31和R32獨立地選自直鏈或支鏈的優(yōu)選具有1-6個碳原子的低級烷基基團、具有5-6個碳原子的環(huán)烷基基團、具有6-10個碳原子的環(huán)烷基-烷基、2-噻吩基、2-吡啶基、苯基、由不超過4個碳原子的烷基取代的苯基和由不超過4個碳原子的烷氧基取代的苯基； X-表示與N原子的正電荷結(jié)合的陰離子，X-可以為，但不限于，氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、苯磺酸根和甲苯磺酸根。這些化合物包括，例如 (3-內(nèi))-3-(2，2-二-2-噻吩乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物； (3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物； (3-內(nèi))-3-(2，2-二苯基乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓雙環(huán)[3.2.1]辛烷甲基苯磺酸鹽； (3-內(nèi))-8，8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-噻吩基)乙烯基]-8-氮雜鎓雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物；和/或 (3-內(nèi))-8，8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-吡啶基)乙烯基]-8-氮雜鎓雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物。
另外的抗膽堿能藥物包括式(XXII)或(XXIII)的化合物，其在美國專利申請60/511009中公開
其中 所指示的H原子處于外位置； R41-表示與N原子的正電荷結(jié)合的陰離子。R1-可以是，但不限于，氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、苯磺酸根和甲苯磺酸根； R42和R43獨立地選自直鏈或支鏈低級烷基基團(優(yōu)選具有1-6個碳原子)、環(huán)烷基基團(具有5-6個碳原子)、環(huán)烷基-烷基(具有6-10個碳原子)、N或O為雜原子的雜環(huán)烷基(具有5-6個碳原子)、N或O為雜原子的雜環(huán)烷基-烷基(具有6-10個碳原子)、芳基、任選取代的芳基、雜芳基和任選的取代的雜芳基； R44選自(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-雜芳基、-OR45、-CH2OR45、-CH2OH、-CN、-CF3、-CH2O(CO)R46、-CO2R47、-CH2NH2、-CH2N(R47)SO2R45、-SO2N(R47)(R48)、-CON(R47)(R48)、-CH2N(R48)CO(R46)、-CH2N(R48)SO2(R46)、-CH2N(R48)CO2(R45)、-CH2N(R48)CONH(R47)； R45選自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-雜芳基； R46選自(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-雜芳基； R47和R48獨立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)環(huán)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C1-C6)烷基-芳基和(C1-C6)烷基-雜芳基，這些化合物包括，例如 (內(nèi))-3-(2-甲氧基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； 3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙腈； (內(nèi))-8-甲基-3-(2，2，2-三苯基-乙基)-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛烷； 3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙酰胺； 3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙酸； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物； 3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙-1-醇； N-芐基-3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙酰胺； (內(nèi))-3-(2-氨基甲酰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； 1-芐基-3-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； 1-乙基-3-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； N-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-乙酰胺； N-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-苯甲酰胺； 3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二-噻吩-2-基-丙腈； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； N-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-苯磺酰胺； [3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； N-[3-((內(nèi))-8-甲基-8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-甲磺酰胺；和/或 (內(nèi))-3-{2，2-二苯基-3-[(1-苯基-甲酰氧基)-氨基]-丙基}-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物。
可以使用的特定抗膽堿能化合物包括 (內(nèi))-3-(2-甲氧基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物； (內(nèi))-3-(2-氨基甲酰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物； (內(nèi))-3-(2-氰基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷碘化物；和/或 (內(nèi))-3-{2，2-二苯基-3-[(1-苯基-甲酰氧基)-氨基]-丙基}-8，8-二甲基-8-氮雜鎓-雙環(huán)[3.2.1]辛烷溴化物。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與PDE4抑制劑一起的組合。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與β2-腎上腺素受體激動劑一起的組合。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與抗膽堿能藥物一起的組合。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與抗炎藥(如這里描述的那些類的化合物)一起的組合。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與皮質(zhì)類固醇一起的組合，如氟替卡松丙酸酯或6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃甲酰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-羧硫代酸S-氟甲基酯或糠酸莫美他松。這種組合可能對于鼻腔內(nèi)給藥是特別有意義的。
因此，本發(fā)明進一步提供包括式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽與A2a受體激動劑一起的組合，如在PCT/EP2005/00565 1中描述的化合物，比如(2R，3R，4S，5R，2’R，3’R，4’S，5’R)-2，2’-{反式-1，4-環(huán)己烷二基二[亞氨基(2-{[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基}-9H-嘌呤-6，9-二基)]}二[5-(2-乙基-2H-四唑-5-基)四氫-3，4-呋喃二醇]。
上面所指的組合可以方便地以藥物組合物的形式應(yīng)用，因此包含上述組合及藥物上可接受的稀釋劑或載體的藥物組合物代表了本發(fā)明的另外一個方面。
這種組合的單個化合物可以以單獨的或組合的藥物組合物的形式順序地或同時地施用。合適地，單個化合物以組合的藥物組合物同時施用。已知的藥劑的適宜劑量很容易為本領(lǐng)域技術(shù)人員掌握。
本領(lǐng)域技術(shù)人員很清楚，在適當?shù)那闆r下，其它的藥物成分可以以鹽如堿鹽或胺鹽或酸加成鹽、或前藥、或酯如低級烷基酯、或溶劑化物如水合物的形式使用，以優(yōu)化該藥物成分的活性和/或穩(wěn)定性和/或物理性質(zhì)如溶解度。也很清楚，在適當?shù)那闆r下，藥物成分可以以光學純的形式使用。
本發(fā)明的化合物可以通過下面描述的方法或通過類似的方法制備。因此，下面的中間體和實施例用于舉例說明本發(fā)明的化合物的制備，而不認為是限制本發(fā)明的范圍。

具體實施例方式 一般實驗 在所有中間體和實施例中，下面的縮略詞可能被使用 DCM二氯甲烷 DIPEAN，N-二異丙基乙胺 EtOAc乙酸乙酯 EtOH乙醇 h小時 HBTUO-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸鹽 HCl鹽酸 HPLC高效液相 L升 LCMS液相色譜質(zhì)譜 MDAP質(zhì)量導(dǎo)向的自動制備HPLC純化(mass directedautopreparative HPLC purification) MeOH甲醇 min分鐘 ml毫升 NaCl氯化鈉 NaHCO3碳酸氫鈉 NaOH氫氧化鈉 NMP1-甲基-2-吡咯烷酮 RT保留時間 TBTUO-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸鹽 THF四氫呋喃 快速硅膠指Merck Art No.9385；硅膠指Merck Art No.7734。
SCX柱是固定相為聚合苯磺酸的離子交換SPE柱。可用于分離胺類。
SCX2柱是固定相為聚合丙磺酸的離子交換SPE柱。可用于分離胺類。
有機溶液可以例如在硫酸鎂或硫酸鈉上干燥。
如果需要，反應(yīng)可以在氮氣下進行。
LCMS在以水中的0.1％HCO2H和0.01M乙酸銨(溶劑A)和乙腈中的0.05％HCO2H和5％水(溶劑B)洗脫的SupelcosilLCABZ+PLUS柱(3.0cm×4.6mmID)上進行，使用如下的洗脫梯度0.0-7min 0％B、0.7-4.2min 100％B、4.2-5.3min 0％B、5.3-5.5min 0％B，流速為3ml/min。質(zhì)譜在Fisons VG Platform分光儀上利用電噴射正和負模式(ES+ye和ES-ve)記錄。
Flashmaster II是自動多用戶快速色譜系統(tǒng)，由ArgonautTechnologies Ltd.提供，其利用一次性、正常相、SPE柱(2g-100g)。它提供四元在線溶劑混合以能夠運行梯度方法。樣本采用管理溶劑、流速、梯度曲線和收集條件的多功能開放存取軟件(open accesssoftware)排成隊列。該系統(tǒng)配備有Knauer可變波長uv-檢測器和兩個能夠自動提取流分、收集和跟蹤的Gilson FC204流分收集器。
用于分析化合物晶型的XRPD方法如下 XRPD分析在PANalytical X’Pert Pro X-ray粉末衍射儀上進行，型號X’Pert Pro PW3040/60，序列號DY1850，使用X’Celerator檢測器。采集條件是輻射CuKα，發(fā)電機電壓40kV，發(fā)電機電流45mA，開始角2.0°2θ，結(jié)束角40.0°2θ，步長0.0167°2θ，每步時間190.5秒。樣本通過將幾毫克的樣品安置在硅片(零背景)板上制備，得到薄層的粉末。峰位置利用Highscore軟件測量。
DSC溫譜圖用TA Q1000熱量計(序列號1000-0126)得到。樣本在鋁盤中稱量，盤蓋置于頂上并輕輕地壓接而不密封該盤。實驗采用10℃min-1的加熱速率進行。
中間體1 1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯 將無水2-丁酮(300ml)中的對-碘苯酚(20g，91mmol)、碳酸鉀(25.2g，182mmol)和1-溴-3-氯丙烷(商購，例如，來自Aldrich)(18g，114mmol)的混合物加熱回流72h，冷卻至室溫，過濾并蒸發(fā)至干。所得殘留物通過SPE過濾(70g二氧化硅柱，用20∶1環(huán)己烷-乙酸乙酯洗脫)純化，獲得標題化合物(24.9g)；1H NMR(CDCl3)δ7.5(2H，d)，6.7(2H，d)，4.1(2H，t)，3.8(2H，t)，2.2(2H，q)。
中間體2 1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}-3，3-二甲基哌啶 將無水乙腈(100ml)中的1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯(例如，按照中間體1制備的)(6.5g，20mmol)、3，3-二甲基哌啶(商購，例如來自Alfa)(3.39g，30mmol)、碘化鈉(2.99g，20mmol)和碳酸鉀(3.3g，20mmol)的混合物加熱回流過夜。讓混合物冷卻到室溫，蒸發(fā)至干并用水處理(quench)和用二氯甲烷萃取，干燥、過濾并濃縮，獲得標題化合物(8g)。LCMS RT＝2.37min，ES+ve m/z 374(M+H)+。
中間體3 4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-4-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯 將無水THF(30ml)中的1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}-3，3-二甲基哌啶(例如，按照中間體2制備的)(3g，8.02mmol)溶液在氮氣下冷卻到-78℃并用nBuLi(1.6M己烷溶液，6.02ml，9.63mmol)處理，0.5h后，滴加THF(10ml)中的N-Boc-4-氧哌啶(商購，例如來自Aldrich)(1.99g，10mmol)。讓混合物升溫至室溫并攪拌過夜。該混合物用氯化銨溶液處理并用EtOAc萃取，在硫酸鎂上干燥、過濾并濃縮。所得到的殘留物通過FlashMaster II色譜法純化，采用100g柱，用100％環(huán)己烷洗脫5分鐘，15分鐘內(nèi)從100％環(huán)己烷至100％EtOAc，5分鐘內(nèi)從100％EtOAc至100％DCM，和40分鐘內(nèi)從100％DCM至DCM中的30％MeOH(含1％三乙胺)，然后保持恒定5分鐘，在254nm監(jiān)測，獲得標題化合物(1.25g)。LCMS RT＝2.48min，ES+vem/z447(M+H)+。
中間體4 3-二甲基-1-(3-{[4-(4-哌啶基)苯基]氧基}丙基)哌啶二鹽酸鹽 無水DCM(10ml)中的4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-4-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯(例如，按照中間體3制備的)(1.25g，2.8mmol)溶液用三乙基硅烷(2.2ml，13.7mmol)處理并在氮氣下室溫攪拌0.5h。將該溶液冷卻到-78℃并加入三氟乙酸(3ml)。使該反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌過夜。將混合物蒸發(fā)至干，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。所得到的殘留物在SCX-2柱(20g)上純化，用MeOH洗脫，隨后用MeOH中的2M氨溶液洗脫，提供黃色粘稠油狀物，其用乙醚中的2M氯化氫處理，蒸發(fā)獲得標題化合物(886mg)，其含有一些4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)1，2，3，6-四氫吡啶二氯化物，所以將該混合物的一部分(0.54g)在大氣壓下使用10wt％鈀/碳(0.5g)在室溫下在EtOH(15ml)中氫化2h。通過Celite過濾除去催化劑，用乙醇清洗且蒸發(fā)濾液至干，獲得標題化合物(448mg)。LCMS RT＝1.77min，ES+ye m/z 331(M+H)+。
中間體5 4-[(1E)-3-(甲氧基)-3-氧代-1-丙烯-1-基]-1-萘羧酸 a)將無水DMF(8ml)中的4-溴-1-萘羧酸(可以通過Can.J.Chem.1981，59，2629-41中描述的方法制備)(100mg，0.4mmol)、三乙胺(0.42ml，3mmol)、醋酸鈀(12mg，0.04mmol)、三苯基膦(13mg，0.04mmol)和丙烯酸甲酯(1.19ml，0.11mmol)的混合物在氮氣下加熱到100℃ 4h。讓該混合物冷卻至室溫，減壓蒸發(fā)至干并通過氨丙基柱純化，用MeOH洗脫，接著用二氧六環(huán)中的4M HCl洗脫，然后用MeOH中的2M氨洗脫。合并甲醇中氨的流分，獲得的殘留物在DCM和水之間分配，合并DCM層，在硫酸鎂上干燥、過濾并蒸發(fā)，獲得標題化合物(99mg，97％)。LCMS RT＝3.25min，ES-ve m/z 255(M-H)-。
b)將無水DMF(95ml)中的4-溴-1-萘羧酸(9.42g)、三乙胺(25ml)、醋酸鈀(0.85g)、三苯基膦(0.98g)和丙烯酸甲酯(9.68g)的混合物在氮氣下加熱到100℃ 1h。讓混合物冷卻至室溫，通過Celite過濾并用二乙醚/水清洗。濾液用乙醚萃取，然后用EtOAc萃取。水相用2M鹽酸水溶液酸化到大約pH 1。固體被濾出，用水清洗并在40℃真空干燥，獲得標題化合物(8.2g)。
中間體6 4-[3-(甲氧基)-3-氧代丙基]-1-萘羧酸 a)將4-[(1E)-3-(甲氧基)-3-氧代-1-丙烯-1-基]-1-萘羧酸(例如，按照中間體5制備的)(1.73g，5.09mmol)在乙醇(50ml)中在鈀/碳(10wt％，350mg)上氫化4h。通過Celite過濾除去催化劑，且將該混合物用新鮮催化劑(350mg)再次氫化過夜。該混合物通過Celite過濾并濃縮，獲得標題化合物。
b)將500mL乙醇中的4-[(1E)-3-(甲氧基)-3-氧代-1-丙烯-1-基]-1-萘羧酸(例如，按照中間體5制備的)(4g，5.09mmol)在鈀/碳(10wt％，1g)上氫化大約2h。通過Celite過濾除去催化劑，蒸發(fā)溶劑，所得固體在真空下保持過夜，獲得標題化合物(3.8g)。ES+ve m/z 258(M+H)+。
中間體7 3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸甲酯 無水DMF(2ml)中的4-[3-(甲氧基)-3-氧代丙基]-1-萘羧酸(例如，按照中間體6制備的)(0.197g，0.76mmol)溶液用HBTU(0.29g，0.77mmol)和二異丙基乙胺(0.6ml，3.82mmol)處理，將該混合物在室溫下攪拌20分鐘，加入3，3-二甲基-1-(3-{[4-(4-哌啶基)苯基]氧基}丙基)哌啶二鹽酸鹽(例如，按照中間體4制備的)(250mg，0.63mmol)且該混合物在室溫下攪拌4h。混合物蒸發(fā)至干并在SCX-2柱(5g)上純化，用MeOH洗脫，隨后用甲醇中的2M氨溶液洗脫，獲得標題化合物(238mg)。LCMS RT＝2.79min，ES+ve m/z571。
實施例1 3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，甲酸(1∶1)
將在甲醇(15ml)-水(1ml)中的3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸甲酯(例如，按照中間體7制備的)(238mg，0.42mmol)和氫氧化鉀(117mg，2.08mmol)的混合物加熱回流約2h，冷卻到室溫，蒸發(fā)，殘留物通過質(zhì)量導(dǎo)向的自動制備HPLC純化，獲得標題化合物(60mg)。LCMS RT＝2.73min，ES+ve m/z557(M+H)+。
1H NMRδ(250MHz；DMSO-d6，120℃)8.19(1H，s)，8.18-8.12(1H，m)，7.89-7.82(1H，m)，7.64-7.54(2H，m)，7.44(1H，d，J＝7.5Hz)，7.37(1H，d，J＝7.5Hz)，7.18-7.12(2H，m)，6.89-6.82(2H，m)，4.02(2H，t，J＝6.5Hz)，3.38(2H，t，J＝7.5Hz)，3.10-2.97(2H，m)，2.84-2.73(1H，m)，2.69(2H，t，J＝7.5Hz)，2.38(2H，t，J＝7.0Hz)，2.34-2.27(2H，m)，2.03(2H，s)，1.90-1.74(4H，m)，1.66-1.48(4H，m)，1.23-1.17(2H，m)，0.92(6H，s). 實施例2 3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，游離堿 化合物可以按照下面反應(yīng)路線制備

其中 Bn表示芐基， BOC表示叔丁氧羰基。
中間體8(階段0) 1，4-二溴萘 在0-10℃下將氯仿(400ml)中的溴(120.9ml，3eqv)溶液在6h內(nèi)加入氯仿(200ml)和DMF(19ml)中的萘(100g)溶液中。反應(yīng)物在0-30℃攪拌最多約24h，然后加入氯仿(100ml)。反應(yīng)混合物用亞硫酸氫鈉水溶液(1×600ml)清洗，然后用5％碳酸氫鈉水溶液(1×300ml)清洗，然后用水清洗，然后蒸發(fā)。殘留物通過加熱到65-70℃并冷卻到20-30℃ 3-4h從甲醇(2600ml)中結(jié)晶。濾出產(chǎn)物，并在50-55℃下真空干燥(干重117g)。
中間體9(階段1) 4-溴-1-萘羧酸 將THF(500ml)中的1，4-二溴萘(100g)溶液在大約2h內(nèi)加入THF(200ml)中的鎂(8.49g)和碘(痕量)中，并在65-75℃加熱最多7h(通常3-4h)，以制備格氏試劑溶液。將該溶液冷卻到0-10℃，并且使二氧化碳氣體通過該溶液10-16h。緩慢地加入水(100ml)，并且在0-10℃攪拌約30min后，用鹽酸酸化(通常達到pH 2-3)。分離THF層，并濃縮。將殘留物加至碳酸鈉水溶液(20％，500ml)中并用甲苯(2×200ml)清洗。水溶液用鹽酸處理(通常到pH 2-3)。濾出產(chǎn)物，用水清洗，并在約90-100℃下真空干燥約12h(干重60g)。
中間體10(階段2) 4-{(1E)-3-氧代-3-[(苯甲基)氧基]-1-丙烯-1-基}-1-萘羧酸 將4-溴-1-萘羧酸(100g)、丙烯酸芐酯(96.8g)、三苯基膦(10.2g)、醋酸鈀(II)(2g)、三乙胺(258ml)和DMF(600ml)的混合物在90-100℃加熱4-10h(通常10-12h)。在攪拌過程中按照4小時的間隔加入另外兩份醋酸鈀(II)(20g)。混合物用木炭(3×15g)在50-80℃(通常70-80℃)處理，在各次裝料后在40-50℃過濾。然后在80-90℃下真空蒸餾掉DMF，且將殘留物冷卻至25-35℃。將二氯甲烷(100ml)和水(100ml)加入殘留物中，且混合物用濃鹽酸酸化并在20-35℃攪拌約30min。過濾混合物且使固體產(chǎn)物干燥。殘留物在90-100℃下溶解于DMF(600ml)和水(400ml)的混合物中并攪拌1-1.5h。將溶液在80-85℃下過濾，冷卻到20-35℃，并攪拌約2h。濾出產(chǎn)物并干燥(干重43g)。
中間體11(階段3) 3，3-二甲基-1-(苯甲基)-2，6-哌啶二酮 二甲苯(1.87L)中的二甲基戊二酸(250g)溶液用對甲苯磺酸(5.9g)處理并加熱回流。在約2h內(nèi)加入二甲苯(6ml)中的芐胺(165.5g)溶液，且回流持續(xù)約24h，共沸完全去除水。將混合物冷卻，且通過減壓蒸餾除去溶劑，獲得需要的產(chǎn)物(干重321g)。
中間體12(階段4) 3，3-二甲基-1-(苯甲基)哌啶 在-5℃至+5℃下，將THF(400ml)中的3，3-二甲基-1-(苯甲基)-2，6-哌啶二酮(200g)的溶液在1-4h(例如1-2h)內(nèi)加入THF(2L)中的氫化鋰鋁(68g)溶液中。然后將該混合物加熱到20-35℃約1-2h，再回流24-30h。然后將混合物冷卻到-5℃至+5℃并緩慢加入乙酸乙酯(280ml)，隨后加入硫酸鈉水溶液(1.4L水中257g)，并進一步加入乙酸乙酯(1L)。將混合物在25-35℃下攪拌約1h。有機層通過Hyflow床過濾，用乙酸乙酯(2×2L)清洗。合并濾液層，然后用鹽水(1L)清洗并蒸發(fā)以產(chǎn)生產(chǎn)物。該產(chǎn)物可進一步通過柱層析法純化(用石油醚和乙酸乙酯混合物洗脫)或通過分餾純化(干重105g)。
中間體13(階段5) 3，3-二甲基哌啶 在15min內(nèi)，向冷卻到0-15℃(通常0-5℃)的二氯甲烷(560ml)中的1-氯乙基氯甲酸酯(94.6g)溶液中加入3，3-二甲基-1-(苯甲基)哌啶(112g)，且將反應(yīng)混合物攪拌約1h，使其升溫到20-30℃。該反應(yīng)物加熱回流2-20h(例如約2h)，然后在真空中除去溶劑。將甲醇(560ml)在5-30℃(通常20-30℃)下加入殘留物中，然后使混合物加熱回流3-20h(例如3-4h)，再冷卻到5-30℃并濃縮。加入二乙醚(400ml)和異丙醇(20ml)，然后在25-35℃攪拌混合物30min至2h。濾出固體物質(zhì)并用二乙醚(200ml)清洗。將固體溶解于水(336ml)和二乙醚(560ml)中，然后在20-30℃下加入10M氫氧化鈉(200ml)。將層分離，且水層用二乙醚(560ml)萃取。濃縮合并的醚溶液，產(chǎn)物通過分餾進行純化(干重41g)。
中間體1(階段6) 1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯 將4-碘苯酚(250g)、碳酸鉀(313.6g)和2-丁酮(1500ml)的混合物攪拌15-20min。在約10分鐘內(nèi)在25-30℃下加入1-溴氯丙烷(357.71g)。在進一步攪拌10min后，將反應(yīng)物質(zhì)加熱至回流(約80-85℃)22-24h。在冷卻至25-30℃后，過濾混合物，濾餅用2-丁酮(750ml)清洗。濾液在50-60℃下減壓濃縮。加入乙酸乙酯(3750ml)并攪拌10-20min，得到澄清溶液。用2N氫氧化鈉溶液(1250ml)、水(2500ml)和氯化鈉水溶液(2500ml)清洗并用硫酸鈉干燥。溶劑在50-60℃下減壓濃縮。在25-30℃下加入正庚烷(250ml)并攪拌約20min。然后使溶液冷卻到-5至-10℃并攪拌約30min。過濾出固體，用冷正庚烷(125ml，0-5℃)清洗，且使固體干燥。
第二次收獲物分離(crop isolation) 將合并的濾液和清洗液濃縮，加入正庚烷(70ml)，在25-30℃下攪拌混合物約20min。使溶液冷卻到-5至-10℃，攪拌約35min，過濾出固體并用冷正庚烷(30ml，0-5℃)清洗。兩次收獲的產(chǎn)物在35-40℃下真空干燥6-10h，得到標題化合物(285g)。
中間體2(階段7) 1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}-3，3-二甲基哌啶 將1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯(100g)和乙腈(600ml)的混合物在25-35℃下攪拌約5min，然后在約10min內(nèi)加入碳酸鉀(93.07g)、接著加入3，3-二甲基哌啶(49.53g)。加入碘化鉀(2.24g)，然后攪拌混合物約15min，之后將其加熱到78-82℃ 22-24h。使反應(yīng)混合物冷卻到25-35℃，過濾固體殘留物，并用乙腈(200ml)清洗。濾液和清洗液在50-60℃下減壓濃縮，產(chǎn)生粘稠液體，其在25-30℃下與正庚烷(100ml)攪拌約30min。然后使溶液冷卻到-5℃至10℃并攪拌約30min。濾出固體、用冷正庚烷(50ml，0-5℃)清洗，然后在35-40℃下真空干燥6-10h，獲得標題化合物(97g)。
第二次收獲物分離(crop isolation) 將合并的濾液和清洗液濃縮成粘稠漿液，加入正庚烷(50ml)，并在25-30℃下攪拌約20min。使溶液冷卻到-5至-10℃，攪拌約40min，然后濾出固體，并用冷正庚烷(40ml，0-5℃)清洗。將固體在35-40℃下真空干燥6-10h，得到標題化合物。標題化合物的總干重(來自第一次和第二次收獲)為92.1g。
中間體3(階段8) 4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-4-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯 將THF(125ml)中的1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}-3，3-二甲基哌啶(25g)攪拌約15min，然后冷卻到0-5℃。在0-5℃下在約40min時間內(nèi)加入異丙基氯化鎂溶液(70.5ml，1.9M)，然后在0-5℃攪拌混合物2-3h。然后將該混合物冷卻到-78至-80℃，并在約1-2h內(nèi)加入THF(125ml)中的N-Boc哌啶酮(16g)的預(yù)冷溶液(-20至-30℃)，在-78至-80℃下攪拌反應(yīng)混合物約1.5h。使反應(yīng)混合物升溫至25-30℃，然后攪拌23-24h。在25-30℃下加入飽和氯化銨溶液(375ml)，隨后加入乙酸乙酯(500ml)，且攪拌混合物約50min。水層用乙酸乙酯(250ml)萃取。合并的有機層用水(375ml)清洗，在硫酸鈉上干燥，并減壓濃縮，得到標題化合物粗品(30.3g)。
中間體14(階段9) 4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1，2，3，6-四氫吡啶 將95％乙醇(500ml)中的4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-4-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯(100g)粗品的混合物冷卻至5-10℃，且在5-10℃下在約45min內(nèi)加入濃鹽酸(300ml)，然后攪拌約15min。然后將該混合物加熱回流(約80-85℃)約6h。該混合物在50-60℃下真空濃縮，然后加入水(500ml)。然后使混合物冷卻到5-10℃，且在5-10℃下用2N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到10-12。使該混合物升溫到25-35℃，并用乙酸乙酯(500ml，隨后2×200ml)萃取。合并的乙酸乙酯層用水(200ml)清洗，然后用10％氯化鈉水溶液(200ml)清洗。真空下除去溶劑，且產(chǎn)物通過柱層析(100-200目硅膠)利用MeOH/DCM 0-70％的線性梯度純化，獲得標題化合物(21.7g)。
中間體15(階段10) (2E)-3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶基]羰基}-1-萘基)-2-丙烯酸芐酯 將乙酸乙酯(570ml)中的4-{(1E)-3-氧代-3-[(苯甲基)氧基]-1-丙烯-1-基}-1-萘羧酸(63.3g)混合物在25-35℃下攪拌10-15min，在25-35℃下在約10min內(nèi)加入三乙胺(73.6g)，接著在25-35℃下在約5min內(nèi)加入TBTU(61.2g)。攪拌混合物約35min，然后冷卻到0-10℃。在0-10℃下在約15min內(nèi)加入乙酸乙酯(570ml)中的4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1，2，3，6-四氫吡啶(57g)溶液，且攪拌約15min。溫度緩慢上升到25-35℃并攪拌2.5-3.5h。在25-35℃下加入乙酸乙酯(570ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(570ml)并攪拌約70min。分離水層，且乙酸乙酯層用水(570ml)和氯化鈉水溶液(570ml)清洗。有機層在低于約55℃的溫度下減壓濃縮，得到粘稠液體。加入丙酮(114ml)，使溶液冷卻到25-35℃并攪拌約20min。緩慢加入正庚烷(114ml)，隨后使混合物冷卻到0-5℃，攪拌約60min，濾出固體并用冷正庚烷(57ml)清洗。固體在35-40℃和真空下干燥，獲得標題化合物(47g)。
實施例2(階段11) 3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，游離堿 將甲醇(705ml)中的(2E)-3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-3，6-二氫-1(2H)-吡啶基]羰基}-1-萘基)-2-丙烯酸芐酯(47g)溶液加入氫化燒瓶中。加入10％Pd/C(11.75g，50％濕度)，且混合物在60-70psi氫壓力下加熱到40-45℃并振搖約2-3h。使反應(yīng)混合物冷卻到25-30℃，并通過Celite過濾，用MeOH(235ml)清洗。濾液在低于約60℃的濕度下真空濃縮，得到標題化合物(37.2g)。NMR分析確認該化合物為標題化合物。
實施例3 3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，鹽酸鹽 在30-35℃和氮氣下，在5-10min內(nèi)，將3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸(321.2g)加入異丙醇(1.93L)中并以約300-400rpm攪拌。加入更多的異丙醇(1.61L)，使混合物升溫到65-70℃，得到溶液，然后使該溶液冷卻到40-45℃并以約300rpm攪拌。在約1h內(nèi)加入濃鹽酸(50ml)，且在約40min后，將確認的3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸，鹽酸鹽(1.6g)種子作為漿液加入異丙醇(約10-12ml)中。然后讓混合物在約4h內(nèi)冷卻到約15℃。混合物然后在該溫度下攪拌過夜。過濾懸浮液，用異丙醇(1.2L和0.6L)清洗固體，然后使固體干燥約4h，隨后在50-60℃下真空干燥21h，獲得標題化合物(干重236g)。
種子如下制備將游離堿(300mg)加熱溶解于異丙醇(3.3ml)中。在環(huán)境溫度下將濃鹽酸(37％，0.0465ml，1.05當量)加入到游離堿溶液中。反應(yīng)液保持在溫度循環(huán)(0-40℃)下一個周末。分離白色固體，用異丙醇清洗并風干約2h，隨后在40℃真空爐中干燥過夜(重137g)。
3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸的鹽酸鹽(實施例3)的代表性XRPD圖如

圖1所示。
峰角度列表如下。

3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸的鹽酸鹽(實施例3)的代表性溫譜圖如圖2所示，其具有約164℃的熔融溫度。
生物學數(shù)據(jù) 可以檢測本發(fā)明化合物的體外和/或體內(nèi)生物活性，例如按照下面的或相似的分析方法進行檢測 H1受體細胞系產(chǎn)生和FLIPR分析方案 1.組胺H1細胞系的產(chǎn)生 人H1受體可以利用在文獻[Biochem.Biophys.Res.Commun.，201(2)894(1994)]中描述的已知方法克隆。穩(wěn)定表達人H1受體的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞可以按照在文獻[Br.J.Pharmacol.，117(6)1071(1996)]中描述的已知方法產(chǎn)生。
組胺H1功能拮抗劑分析功能性pKi值的確定 組胺H1細胞系在非覆蓋黑壁透明底384孔組織培養(yǎng)板上接種于α最小必需培養(yǎng)基(Gibco/Invitrogen cat no.22561-021)[補充有10％經(jīng)透析的胎牛血清(Gibco/Invitrogen cat no.12480-021)和2nM L-谷氨酰胺(Gibco/Invitrogen cat no.25030-024)]中，并在37℃、5％CO2下保持過夜。
從各孔中除去多余的培養(yǎng)基以留下10μl。將30μl裝載染料(loading dye)(250μM亮黑，2μM在Tyrodes緩沖液+丙磺舒(145mM NaCl，2.5mM KCl，10mM HEPES，10mM D-葡萄糖，1.2mMMgCl2，1.5mM CaCl2，2.5mM丙磺舒，pH用1.0M NaOH調(diào)至7.40)中稀釋的Fluo-4)加入到各孔中，培養(yǎng)板在37℃、5％CO2中孵育60min。
向各孔中加入在Tyrodes緩沖液+丙磺舒中稀釋到需要的濃度的10μl測試化合物(或10μl Tyrodes緩沖液+丙磺舒作為對照)，培養(yǎng)板在37℃、5％CO2中孵育30min。然后，將培養(yǎng)板放置在FLIPRTM(Molecular Devices，UK)中以在添加10μl組胺之前和之后按照Sullivan等人，(InLambert DG(ed.)，Calcium Signaling Protocols，NewJerseyHumana Press，1999，125-136)中描述的方式監(jiān)測細胞熒光(λex＝488nm，λEM＝540nm)，添加的組胺的濃度導(dǎo)致組胺的最終分析濃度為EC80。
功能拮抗由利用FLIPRTM系統(tǒng)(Molecular Devices)測定的組胺誘導(dǎo)的熒光增加的抑制來體現(xiàn)。借助濃度效應(yīng)曲線，采用標準藥理學數(shù)學分析來確定功能性親和性。
組胺H1功能性拮抗劑分析拮抗劑pA2的確定 如上所述將表達組胺H1受體的CHO細胞接種在非覆蓋黑壁透明底96孔組織培養(yǎng)板上。
在培養(yǎng)過夜后，從各孔中移除生長培養(yǎng)基，用200μl的磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗并用50μl裝載染料(250μM亮黑，1μM在Tyrodes緩沖液+丙磺舒(145mM NaCl，2.5mM KCl，10mM HEPES，10mM D-葡萄糖，1.2mM MgCl2，1.5mM CaCl2，2.5mM丙磺舒，pH用1.0MNaOH調(diào)至7.40)中稀釋的Fluo-4)替換。細胞在37℃孵育45min。移除裝載緩沖液，且如上所述清洗細胞，向各孔中加入90μl的Tyrodes緩沖液+丙磺舒。向各孔中加入在Tyrodes緩沖液+丙磺舒中稀釋到需要的濃度的10μl測試化合物(或10μl Tyrodes緩沖液+丙磺舒作為對照)，培養(yǎng)板在37℃、5％CO2中孵育30min。
然后，將培養(yǎng)板放置在FLIPRTM(Molecular Devices，UK)中以在添加50μl在1mM-0.1nM濃度范圍上的組胺之前和之后按照Sullivan等人，(InLambert DG(ed.)，Calcium Signaling Protocols，NewJerseyHumana Press，1999，125-136)中描述的方式監(jiān)測細胞熒光(λex＝488nm，λEM＝540nm)。所獲得的濃度反應(yīng)曲線通過采用標準四參數(shù)邏輯斯諦方程的非線性回歸進行分析，以確定組胺的EC50，即產(chǎn)生對組胺的最大反應(yīng)的50％所需的組胺濃度。拮抗劑pA2采用下面的標準等式計算pA2＝log(DR-1)-log[B]，其中DR＝劑量比，其定義為EC50拮抗劑處理的/EC50對照，[B]＝拮抗劑濃度。
2.H3受體細胞系的產(chǎn)生，膜制備和功能性GTPγS分析方案 組胺H3細胞系的產(chǎn)生 通過用酶BamH1和Not-1限制性消化質(zhì)粒DNA從其保持載體(holding vector)pCDNA3.1 TOPO(InVitrogen)上分離組胺H3 cDNA，并連接到用同樣的酶消化的可誘導(dǎo)表達載體pGene(InVitrogen)中。GeneSwitchTM系統(tǒng)(其中在沒有誘導(dǎo)物存在時轉(zhuǎn)基因表達關(guān)閉、在誘導(dǎo)物存在時轉(zhuǎn)基因表達打開的系統(tǒng))按照美國專利5,364,791、5,874,534和5,935,934中描述地進行。將連接的DNA轉(zhuǎn)化到感受態(tài)DH5α大腸桿菌宿主細菌細胞中并平板接種在含有50μgml-1的ZeocinTM(允許篩選表達在pGene和pSwitch上存在的sh ble基因的細胞的抗生素)的Luria Broth(LB)瓊脂上。通過限制性分析鑒定含有重連接質(zhì)粒的菌落。用于轉(zhuǎn)染到哺乳動物細胞中的DNA從含有pGeneH3質(zhì)粒的宿主細菌的250ml培養(yǎng)物中制備，并使用DNA制備試劑盒(Qiagen MidiPrep)按照制造商的指導(dǎo)(Qiagen)進行分離。
先前轉(zhuǎn)染有pSwitch調(diào)節(jié)質(zhì)粒(InVitrogen)的CHO K1細胞在使用前24h按照2×106細胞/T75瓶的密度接種在含有補充了10％v/v透析胎牛血清、L-谷氨酰胺和潮霉素(100μgml-1)的Hams F12(GIBCOBRL，Life Technologies)培養(yǎng)基的完全培養(yǎng)基中。按照制造商的指導(dǎo)(InVitrogen)采用Lipofectamine Plus將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染到細胞中。轉(zhuǎn)染后48h，將細胞置于補充有500μgml-1的ZeocinTM的完全培養(yǎng)基中。
選擇后10-14天，將10nM米非司酮(Mifepristone)(InVitrogen)加入到培養(yǎng)基中以誘導(dǎo)受體的表達。誘導(dǎo)后18h，使用乙二胺四乙酸(EDTA；1∶5000；InVitrogen)使細胞從瓶上脫離，隨后用磷酸鹽緩沖液(pH7.4)清洗數(shù)次，然后懸浮在含有最小必需培養(yǎng)基(MEM)的分選培養(yǎng)基(Sorting Medium)中，其中沒有苯酚紅，補充有Earles鹽和3％胎克隆II(foetal Clone II)(Hyclone)。如下檢測大約1×107細胞的受體表達用針對組胺H3受體N-端域的兔多克隆抗體4a染色，在冰上孵育60min，隨后在分選培養(yǎng)基中清洗兩次。通過細胞與結(jié)合Alexa 488熒光標記(Molecular Probes)的羊抗兔抗體在冰上孵育60min檢測受體結(jié)合的抗體。在分選培養(yǎng)基中再清洗兩次后，細胞通過50μm的FilconTM(BD Biosciences)過濾，然后在配備有自動細胞沉積單元的FACS Vantage SE流式細胞儀上進行分析。對照細胞為以類似方法處理的非誘導(dǎo)細胞。陽性染色細胞作為單細胞被分到含有含500μgml-1 ZeocinTM的完全培養(yǎng)基的96孔板中，并可以在擴增后通過抗體和配體結(jié)合研究重新分析受體表達。選擇克隆3H3進行膜制備。
培養(yǎng)細胞的膜制備 該方法的所有步驟都在4℃下使用預(yù)冷試劑完成。將細胞團塊重懸在10倍體積的勻漿緩沖液(50mM N-2-羥乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)、1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，用KOH調(diào)節(jié)pH至7.4，補充有10-6M亮抑酶肽(乙酰基-亮氨酰-亮氨酰-精氨酰；SigmaL2884)、25μgml-1桿菌肽(Sigma B0125)、1mM芐基磺酰氟(PMSF)和2×10-6M胃蛋白酶抑制劑A(Sigma))中。然后細胞在1升玻璃韋林氏攪切器中通過2×15秒沖擊(burst)勻漿，隨后以500g離心20min。然后上清液以48000g旋轉(zhuǎn)30min。通過渦旋(vortex)5秒將沉淀物重懸在勻漿緩沖液(4×原始細胞團塊的體積)，接著在杜恩斯勻漿器中勻漿(10-15沖擊)。此時，將制備物均分到聚丙烯管中并在-80℃保存。
組胺H3功能性拮抗劑分析 對于各個被分析的化合物，在固體白色384孔板中加入 (a)0.5μl在DMSO中稀釋到需要濃度的測試化合物(或0.5μlDMSO作為對照)； (b)30μl珠/膜/GDP混合物，其通過以下步驟制備混合麥胚凝集素聚苯乙烯(Wheat Germ Agglutinin Polystyrene)Lead

(WGAPS LS)閃爍近似分析(SPA)珠和膜(按照上述方法制備的)，并在分析緩沖液(20mM N-2-羥乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)+100mMNaCl+10mM MgCl2，用NaOH調(diào)pH至7.4)中稀釋，得到30μl的終體積(每孔包含5μg蛋白質(zhì)、0.25mg珠)，及10μM終分析濃度的鳥苷5’二磷酸(GDP)(Sigma，在分析緩沖液中稀釋)，在室溫下在滾筒上孵育60min； (c)15μl 0.38nM[35S]-GTPγS(Amersham；放射活性濃度＝37MBqml-1；比活性＝1160Cimmol-1)，組胺(其濃度導(dǎo)致組胺的終分析濃度為EC80)。
2-6h后，板以1500rpm離心5min并在Viewlux計數(shù)器上使用613/55濾板計數(shù)，每板5min。數(shù)據(jù)使用四參數(shù)邏輯斯諦方程(logisticalequation)分析。基礎(chǔ)活性用作最小值，即組胺未加入孔中的值。
體內(nèi)抗炎風團(wheal)及潮紅(flare)模型 使用1ml注射器將測試化合物或載體施用到500g-1kg的雄性Dunkin-Hartley豚鼠的口腔中(0.5ml/kg，口服)，或通過耳緣靜脈施用(0.33ml/kg，靜脈內(nèi))。化合物在5％DMSO/45％PEG200/50％水中配制。
化合物口服2小時后或靜脈注射15min后，豚鼠用異氟烷(5％，2-3l/min O2)麻醉，并通過耳緣靜脈接受伊文思藍溶液(2％，在生理鹽水中)，0.33ml/kg，靜脈內(nèi)。
緊接著施用伊文思藍之后，且同時仍然處于異氟烷麻醉下，動物被置于俯臥位，且剃去背部的毛。將組胺(10μg/100μl×4)和載體(1×100μl PBS)皮內(nèi)注射到剃去毛發(fā)的背面。
在組胺激發(fā)后，使動物從麻醉中蘇醒，并在30分鐘后用超劑量的戊巴比妥經(jīng)腹膜內(nèi)實施安樂死。仔細地去除背部皮膚，并且通過用工程卡尺測量兩個垂直直徑并計算平均半徑而從內(nèi)皮表面測量風團面積(染藍)。該值用于計算各風團的面積，隨后對各動物計算所有組胺誘導(dǎo)的風團的平均值。如果在載體激發(fā)的風團中觀察到伊文思藍，則從數(shù)據(jù)組中排除該動物。
對各個測試化合物構(gòu)建劑量-反應(yīng)曲線，且可以對各給藥途徑(口服和靜脈內(nèi))確定ID50值。
中樞神經(jīng)系統(tǒng)滲透 (i)通過濃注(bolus)給藥的中樞神經(jīng)系統(tǒng)滲透 將化合物按照1mg/kg的標稱劑量水平靜脈注射到雄性CDSprague Dawley大鼠體內(nèi)。化合物在5％DMSO/45％PEG200/50％水中配制。在用異氟烷終期麻醉的情況下在給藥后5分鐘采集血樣，也取出腦以檢測腦滲透。血樣直接采集到肝素化管中。血樣使用蛋白質(zhì)沉淀進行準備以用于分析，而腦樣通過利用勻漿和隨后的蛋白質(zhì)沉淀從腦中提取藥物而進行準備。血和腦提取物中母體藥物的濃度通過采用化合物特異性質(zhì)量轉(zhuǎn)變的定量LC-MS/MS分析進行確定。
(ii)在穩(wěn)定狀態(tài)靜脈輸注后的中樞神經(jīng)系統(tǒng)滲透 將裝載劑量的化合物以0.4mg/kg的標稱劑量水平給予雄性CDSprague Dawley大鼠。隨后以0.1mg/kg/h的標稱劑量水平靜脈輸注化合物4小時。化合物在2％DMSO/30％PEG200/68％水中配制。在給藥后0.5、1.5、2.5、3、3.5和4小時抽取系列或末期血樣。最終血樣在用異氟烷終期麻醉的情況下采集，也取出腦以檢測腦滲透。血樣直接采集到肝素化管中。血樣使用蛋白質(zhì)沉淀進行準備以用于分析，而腦樣通過利用勻漿和隨后的蛋白質(zhì)沉淀從腦中提取藥物而進行準備。血和腦提取物中母體藥物的濃度通過采用化合物特異性質(zhì)量轉(zhuǎn)變的定量LC-MS/MS分析進行確定。
大鼠藥代動力學 將化合物分別以1mg/kg和3mg/kg的標稱劑量水平通過單次靜脈給藥或口服給予雄性CD Sprague Dawley大鼠。化合物在5％DMSO/45％PEG200/50％水中配制。靜脈內(nèi)特征譜通過在給藥后0.083、0.25、0.5、1、2、4和7小時抽取系列或最終血樣(某些研究可采取12和24小時樣本)而獲得。口服特征譜通過在給藥后0.25、0.5、1、2、4、7和12小時抽取系列或最終血樣(某些研究可采取24和30小時樣本)而獲得。血樣直接采集到肝素化管中。血樣通過蛋白質(zhì)沉淀進行準備并通過采用化合物特異性質(zhì)量轉(zhuǎn)變的LC-MS/MS進行定量分析。制出藥物濃度-時間曲線，且利用非室性PK分析產(chǎn)生半衰期、清除率、分布容積和口服生物利用度的估算值。
狗藥代動力學 化合物分別以1mg/kg和2mg/kg的標稱劑量水平通過單次靜脈給藥或口服給予雄性Beagle狗。該研究按照交叉設(shè)計進行，從而同一只狗用于兩個給藥事件，且給藥事件間隔一周發(fā)生。化合物在5％DMSO/45％PEG200/50％水中配制。靜脈內(nèi)特征譜通過在給藥后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6和12小時抽取系列血樣(某些研究可采取24小時樣本)而獲得。口服特征譜通過在給藥后0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、12和24小時抽取系列血樣而獲得。血樣直接采集到肝素化管中。血樣通過蛋白質(zhì)沉淀進行準備并通過采用化合物特異性質(zhì)量轉(zhuǎn)變的LC-MS/MS進行定量分析。制出藥物濃度-時間曲線，且利用非室性PK分析產(chǎn)生半衰期、清除率、分布容積和口服生物利用度的估算值。
結(jié)果 在這些或類似的分析中，實施例1-3的化合物具有 (i)H3的平均pKi(pKb)值實施例1大約為7.4，而實施例3大約為7.3 (ii)H1的平均pKi(pKb)值實施例1大約為7.8，而實施例3大約為7.9，且實施例3的pA2值大約為8.1 (iii)體內(nèi)抗炎活性(在風團和潮紅模型中)，ID50為約0.6mg/kg靜脈內(nèi)和約2.8mg/kg口服(實施例3) (iv)大鼠和狗的口服生物利用度(實施例1化合物在大鼠中大約為59％，狗中實施例1和3的綜合數(shù)據(jù)為約60％) (v)在大鼠和狗中具有低血漿清除率(大鼠中實施例1化合物的半衰期約為4-5小時(靜脈內(nèi)途徑)，而狗中實施例1和3的綜合數(shù)據(jù)為約3小時的半衰期) (vi)低中樞神經(jīng)系統(tǒng)穿透性，低于50ng/gm(實施例1和3)。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物或其鹽，
其中，萘環(huán)可以在2、3、4、5、6、7或8位被R1取代，且R1表示-CH2CH2COOH或-CH＝C(CH3)COOH。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，其中萘環(huán)可以在2、3、4、5、6、7或8位被R1取代，且R1表示-CH2CH2COOH。
3.3-(4-{[4-(4-{[3-(3，3-二甲基-1-哌啶基)丙基]氧基}苯基)-1-哌啶基]羰基}-1-萘基)丙酸或其鹽。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的化合物，其中所述化合物為藥物上可接受的鹽的形式。
5.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中所述化合物為鹽酸鹽的形式。
6.用于治療的如權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物或其藥物上可接受的鹽。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物或其藥物上可接受的鹽，其用于治療炎性和/或過敏性疾病。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物或其藥物上可接受的鹽，其用于治療過敏性鼻炎。
9.一種組合物，其包含權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物或其藥物上可接受的鹽，任選具有一種或多種藥物上可接受的載體和/或賦形劑。
10.包含權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物或其藥物上可接受的鹽和一種或多種其它治療化合物的組合。
11.權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物或其藥物上可接受的鹽在制造用于治療或預(yù)防炎性和/或過敏性疾病的藥物中的用途。
12.如權(quán)利要求11所述的用途，其中所述疾病為過敏性鼻炎。
13.一種治療或預(yù)防炎性和/或過敏性疾病的方法，包括給予需要的患者有效量的權(quán)利要求1-5中任一項所述化合物或其藥物上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物或其鹽，其中萘環(huán)可以在2、3、4、5、6、7或8位被R1取代，R1表示-CH2CH2COOH或-CH＝C(CH3)COOH，本發(fā)明還涉及它們的制備方法、包含它們的組合物及它們在治療各種疾病如過敏性鼻炎中的用途。
文檔編號C07D401/00GK101341146SQ200680048106
公開日2009年1月7日 申請日期2006年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月20日
發(fā)明者S·T·霍奇森, P·A·普羅科皮奧寧, M·V·維納德·布魯加羅拉斯 申請人:葛蘭素集團有限公司