專利名稱：與GLP-1和腸促胰島素類似物(exendin)有關的發(fā)明的制作方法
與GLP-1和腸促胰島素類似物(exendin)有關的發(fā)明本申請是2005年8月沈日提交的申請?zhí)枮?00580(^9760. 4，發(fā)明名稱為“與 GLP-I和腸促胰島素類似物(exendin)有關的發(fā)明”申請的分案申請。發(fā)明領域描述及簡介在定位胃腸胰腺神經(jīng)內分泌腫瘤時，生長激素釋放抑制因子受體閃爍照相法 (SRS)是除了超聲之外最重要的診斷方法。其原理是在被腫瘤細胞吸收的放射性標記的肽的幫助下，對腫瘤進行特異性描繪。然后在伽馬射線照相機的幫助下，腫瘤組織中放射性的積累可以被目視證實。當一種類型的腫瘤具有一種用于SRS、例如用于生長激素釋放抑制因子類似物octreotide 的必需受體時，這些腫瘤的證實是沒有問題的。但是，如果相應的受體不表達，它們就避開了閃爍照相法的證實。除了定位診斷之外，放射性標記的肽也可以用于治療腫瘤的方法，其中人們可以通過用適當?shù)姆派湫院怂?α-0Γβ-粒子發(fā)射體)標記生長激素釋放抑制因子類似物例如octreotide ，來執(zhí)行特異性的受體指導的放射性肽療法。由于相應的放射性核素被肽結合的方式(例如通過與以前結合到該肽上的金屬螯合劑形成復合物)使得它們事實上被腫瘤細胞吸收而且不再能夠被釋放，因此在腫瘤組織中導致了高特異性的積累。但是，一系列的神經(jīng)內分泌腫瘤(NET)、其中包括胰島瘤和小細胞支氣管癌，不能表達使用生長激素釋放抑制因子類似物octreotide 進行SRS或放射性肽療法所必需的生長激素釋放抑制因子受體亞型。具體來說，有顯著比例的胰島瘤不能通過閃爍照相法診斷來檢測。在小細胞支氣管癌中SRS也不算適合的方法，因為盡管原發(fā)的腫瘤通常可以被看到，但腫瘤的轉移由于失去了受體的表達而不能被顯示。因此，對于放射性肽療法這種代表了一種有趣的附加或替代療法的方法來說，治療這些腫瘤是難以達成的。因此就需要適合的肽，它們能夠被上述的腫瘤吸收。腸促胰島素激素類胰高血糖素肽-1 (GLP-I)以及其類似物exendin-3和 exendin-4 (來自美洲大毒蜥蜴 Heloderma horridum 禾口 Heloderma suspectum 的唾液),是胰島瘤和小細胞支氣管癌以及許多其它種類的腫瘤為其表達受體的肽。胰島瘤起源于胰腺的Langerhans島中產生胰島素的β-細胞，其中GLP-1以及exendin-3和exendin-4引發(fā)飯后的胰島素分泌。現(xiàn)有技術狀態(tài)為了在閃爍照相法中使用類胰高血糖素肽-1 (GLP-I)，需要對肽進行標記。其方法以及用放射性核素標記蛋白的方法對于本技術領域的專業(yè)人員來說是熟知的，在大量的專利申請(例如DE 690 18 226 T2)和科學出版物中有記錄。那里描述的用于診斷成像和在病理組織中交換治療有效分子的肽通常通過肽中的氨基插入到N末端。同時，考慮到穩(wěn)定性必須對肽進行進一步修飾。例如，用在US 2003/023276IAl中的GLP-1及其衍生物GLP-I (7-37)在N末端用一個氨基修飾。因此，GLP-I的N末端不再能夠與GLP-I受體鍵合，所以這些肽中的受體結合和內化都不夠充分。因此后者不適合用于胰島瘤和小細胞支氣管癌的放射性肽療法。正如經(jīng)驗所示，突變、例如GLP-I以及exendin-3或exendin-4的肽序列中氨基酸的取代、以及它們通過治療分子或信號分子進行的可能修飾，經(jīng)常引起肽結構的損壞，阻礙了與受體的任何進一步鍵合。目前尚不知道其它修飾GLP-I而不影響N末端的方法。此外，尚不知道適合用于胰島瘤和小細胞支氣管癌的放射性療法的GLP-I衍生物，無論是標記的還是未標記的。任務因此，目前本發(fā)明的任務是消除現(xiàn)有技術狀態(tài)中的缺陷，制造可以被標記并在帶有該標記時仍能夠與GLP-I受體鍵合的肽，該肽可以用于生產診斷和治療疾病的藥劑，在所述疾病中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用的。任務的解決方案該任務基于本發(fā)明的權利要求、通過GLP-1、exendin-3和exendin-4的肽衍生物得到了解決，這些衍生物在C末端被氨基修飾，并通過GLP-I受體的N末端成鍵，以及GLP-I 與exendin-3和exendin-4的嵌合肽。這些肽衍生物以及嵌合肽將是未標記的或標記的，以便用于生產良性或惡性疾病的診斷和治療的藥劑，用于其中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用。通過這些GLP-I、exendin-3 和 exendin-4 的衍生物以及 GLP-1、exendin-3 或 exendin-4的嵌合肽，產生了用于閃爍照相法應用的手段，它將被用于表達GLP-I受體的腫瘤的診斷和治療，包括NET (特別是胰島瘤)和小細胞支氣管癌。由于基于本發(fā)明的肽衍生物是在C末端被氨基修飾，因此這可能是第一次使得其 N末端可以與GLP-I受體鍵合。通過將基于本發(fā)明的肽衍生物、例如放射性標記的GLP-I、exendin-3和 exendin-4的嵌合肽與GLP-I受體鍵合，使得表達GLP-I受體的腫瘤的描繪成為可能，因此為病人的醫(yī)療護理提供了相當大的改善。NET、尤其是胃腸胰腺NET，例如胰島瘤，目前對于它尚沒有足夠靈敏的非侵入性方法可用，另外如位于肺部區(qū)域的小細胞支氣管癌，也不可能通過非侵入性的方法對發(fā)炎過程和腫瘤或轉移之間進行特異性區(qū)分。此外，利用基于本發(fā)明的肽衍生物和嵌合肽，胰腺中產生的產胰島素細胞的密度以及體內和體外GLP-I受體的表達被可視化。例如在糖尿病的情況下，表達GLP-I受體的細胞的描繪是體內描繪，因為這些細胞也分泌胰島素。在患有糖尿病的病人用藥物治療期間或之后的情況下，胰腺中GLP-I受體密度的描繪是特別重要的。此外，GLP-I受體在惡性和良性組織中的分布被描繪。因此這個明確表示的問題既具有臨床意義也具有科學意義，因為迄今為止關于GLP-I受體在人類中的分布情況尚沒有完整的數(shù)據(jù)可用。因此，本發(fā)明的優(yōu)點是GLP-I (類胰高血糖素肽-1)、exendin-3和exendin-4的肽衍生物以及GLP-1、exendin-3和exendin-4的嵌合肽可用于生產藥劑，特別是用于受體定向的特異性描繪和治療，特別是NET、尤其特別的是胰島瘤和小細胞支氣管癌的描繪和治療。GLP-I受體閃爍照相法特別適用于小細胞支氣管癌的診斷，這第一次允許了對淋巴結中的轉移進行特異性檢測(區(qū)分淋巴結由于炎癥發(fā)生變化與淋巴結受到腫瘤轉移的襲擊發(fā)生的變化)。使用本發(fā)明的來自GLP-I (類胰高血糖素肽-1)、exendin-3和exendin-4的肽衍生物以及來自GLP-I、exendin-3和exendin-4的嵌合肽，最終為所有GLP-I受體的表達在其中發(fā)揮作用的惡性和良性疾病留下了診斷和治療藥劑，具體如下在磁共振成像(MRI) 中作為造影劑；在閃爍照相術(SPECT，單光子發(fā)射計算機斷層照相)以及放射性肽療法、 PET(正電子發(fā)射斷層照相)、受體介導的化學療法以及光學診斷中用作放射活性試劑。這里的光學診斷是指通過特定的波長激發(fā)熒光分子，誘導出不同波長的連續(xù)的光發(fā)射。被檢測的是發(fā)射出的波長。專業(yè)人員可以根據(jù)所需的應用容易地選擇來自GLP-I (類胰高血糖素肽-1)、 exendin-3和exendin-4的肽衍生物以及來自GLP-l、exendin_3和exendin-4的嵌合肽的 C末端的標記種類例如對于閃爍照相術或放療選擇放射性核素；對于磁共振成像(MRI)中的造影劑選擇釓；對于內窺鏡檢查或科學檢查選擇熒光色素。根據(jù)本發(fā)明，惡性疾病是指那些與健康組織相比，被影響的組織顯示出分化水平上的變化、侵入性的生長或將其組織擴散到血流或淋巴系統(tǒng)中的疾病。所有的神經(jīng)內分泌腫瘤都歸于這個范疇，特別是那些胃腸道的腫瘤，特別是胰島瘤、支氣管癌、胰腺癌以及所有其它與GLP-I受體的過量表達相關的惡性疾病。根據(jù)本發(fā)明，良性疾病是指那些其特征為被影響的組織沒有明顯地失去其分化水平、不顯示出侵入性生長、沒有任何組織轉移到血流或淋巴系統(tǒng)中的疾病。這包括例如糖尿病以及飲食紊亂或精神紊亂。肽衍生物和嵌合肽的特征來自GLP-I、exendin-3 禾Π exendin-4 的肽衍生物以及來自 GLP-1、exendin-3 或exendin-4的嵌合肽的發(fā)現(xiàn)是令人吃驚的，它們在C末端通過氨基被修飾，在N末端與 GLP-I受體鍵合。它們甚至顯示出與GLP-I受體的高度親和性，如同天然的肽一樣。使用荷瘤的無毛小鼠進行的實驗顯示出在陽性腫瘤組織的GLP-I受體中有特異性吸收。本發(fā)明的肽衍生物以及嵌合肽可以是未標記的，也可以在C末端的氨基通過螯合劑被標記為用于良性和惡性疾病的診斷和治療的藥劑，GLP-I受體的表達在其上述疾病中發(fā)揮作用。這里標記的類型主要包括放射性金屬、MRI造影劑、熒光發(fā)色團或化療劑。標記的過程和方法對于專業(yè)人員來說是熟知的(例如DE 690 18226 T2)，它可以通過例如結合放射性核素、無磁性的金屬和其它MRI造影劑或熒光染料來進行；這意味著本發(fā)明的肽衍生物以及嵌合肽與受體的鍵合或內化沒有受到損壞，與GLP-I受體鍵合的N 末端保持游離(未連接)。原始的肽的氨基酸序列GLP-I H-His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-OH19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37Exendin-3 H-His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37
Pro-Ser-NH238 39Exendin-4 H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37Pro-Ser-NH238 39根據(jù)本發(fā)明，產生了下列的GLP-I (1-37)、exendin-3和exendin-4肽衍生物GLP-I (x-y) A卜37Exendin-3 (z-k) A卜40Exendin-4 (z-k) A1"40其中χ表示GLP-I氨基酸序列的1-36位氨基酸y表示GLP-I氨基酸序列的2-37位氨基酸ζ表示exendin-3或exendin-4氨基酸序列的1_38位氨基酸k表示exendin-3或exendin-4氨基酸序列的2_39位氨基酸A表示由一個或多個氨基酸或其衍生物組成的連接基團，作為信號分子或與信號分子鍵合或穩(wěn)定它們。對于A來說，優(yōu)選位于C末端，氨基酸優(yōu)選為賴氨酸或另一個具有游離氨基的氨基酸例如鳥氨酸、或者是具有游離氨基的有機基團，其上結合有螯合劑，用于用放射性核素或MRI造影劑、熒光色素或化療劑進行標記。可以使用的螯合劑包括DTPA( 二亞乙基三胺五乙酸)、或N，N-雙[雙(羧甲基)氨基]-乙基)甘氨酸)、或D0TA(1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷_1，4，7，10-四乙酸)、 HYNIC (6-吡啶胼-3-碳酸)、MAG3(巰基乙酰基-甘氨酰甘氨酰甘氨酸)、N4 (1，4，8，11-四氮雜十一烷)以及上述螯合劑的所有已知的衍生物。指數(shù)表示在氨基酸序列中連接基團可以被發(fā)現(xiàn)的可選位置。GLP-I (x-y) A卜37這里包含了不同長度的GLP-I衍生物，其中χ可以取1到36的數(shù)目，y可以取2 到37的數(shù)目，χ總是小于y。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比 y前1位。優(yōu)選情況下，連接基團是氨基賴氨酸。Exendin-3 (z_k) A1-40這里包含了不同長度的exendin-3衍生物，其中ζ可以取1到38的數(shù)目，k可以取2到39的數(shù)目，ζ總是小于k。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比k前1位。優(yōu)選情況下，連接基團是氨基賴氨酸。Exendin-4 (z-k) A 卜40這里包含了不同長度的exendin-4衍生物，其中ζ可以取1到38的數(shù)目，k可以取2到39的數(shù)目，ζ總是小于k。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比k前1位。優(yōu)選情況下，連接基團是氨基賴氨酸。
下列的肽衍生物是特別優(yōu)選的1.MC 10 (DTPA-Lys37)GLPl (7-36)酰胺2. MC 13 (DTPA-Lys40) exendin-3 酰胺3. MC 11: (DTPA-Lys40) exendin-4 酰胺合成是在例如 P印tide Specialty Laboratories GmbH 公司按照 Merrifield 的方法進行的，并通過HPLC純化。MC 10 (DTPA-Lys37) GLPl (7-36)酰胺由 GLP-1 的 7-36 位氨基酸，在 C 末端帶有具有游離氨基的氨基酸、優(yōu)選為37位的賴氨酸以及螯合劑DTPA組成。MC 13 (DTPA-Lys40) exendin-3酰胺由exendin-3完整的氨基酸，在C末端帶有具有游離氨基的氨基酸、優(yōu)選為40位的賴氨酸以及螯合劑DTPA組成。MC IKDTPA-Lys40) exendin-4酰胺由exendin-4完整的氨基酸，在C末端帶有具有游離氨基的氨基酸、優(yōu)選為40位的賴氨酸以及螯合劑DTPA組成。按照本發(fā)明產生了下列來自GLP-I (1-37)和exendin-3或exendin-4的嵌合肽GLP-I (x-y) exendin-3 (z_k) A1-75GLP-I (x-y) exendin-4 (z_k) A1-75Exendin-3 (z_k) GLP-I (χ-y) A1-75Exendin-4 (z_k) GLP-I (χ-y) A1-75說明如下 χ表示GLP-I氨基酸序列的1-36位氨基酸y表示GLP-I氨基酸序列的2-37位氨基酸ζ表示exendin-3或exendin-4氨基酸序列的1_38位氨基酸k表示exendin-3或exendin-4氨基酸序列的2_39位氨基酸A表示由一個或多個氨基酸或其衍生物組成的連接基團，作為信號分子或與信號分子鍵合或穩(wěn)定它們。對于A來說，優(yōu)選位于C末端，氨基酸優(yōu)選為賴氨酸或另一個具有游離氨基的氨基酸例如鳥氨酸、或者是具有游離氨基的有機基團，其上結合有螯合劑，用于用放射性核素或MRI造影劑、熒光染料或化療劑進行標記。可以使用的螯合劑包括DTPA( 二亞乙基三胺五乙酸)、或N，N-雙[雙(羧甲基)氨基]-乙基)甘氨酸)、或D0TA(1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷_1，4，7，10-四乙酸)、 HYNIC (6-吡啶胼-3-碳酸)、MAG3(巰基乙酰基-甘氨酰甘氨酰甘氨酸)、N4 (1，4，8，11-四氮雜十一烷)以及上述螯合劑的所有已知的衍生物。指數(shù)表示在氨基酸序列中連接基團可以被發(fā)現(xiàn)的可選位置。GLP-I (x-y) exendin-3 (z_k) A1-75這里包含了來自GLP-I和exendin-3的嵌合肽，其中1_36位氨基酸來自GLP-1，其后的氨基酸來自exendin-3的1_39位氨基酸。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比來自GLP-I和exendin-3的氨基酸數(shù)目靠前1位，優(yōu)選情況下，連接基團
是氨基賴氨酸。GLP-I (x-y) exendin-4 (z_k) A1-75這里包含了來自GLP-I和exendin-4的嵌合肽，其中1_36位氨基酸來自GLP-1，其后的氨基酸來自exendin-4的1_39位氨基酸。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比來自GLP-I和exendin-4的氨基酸數(shù)目前1位，優(yōu)選情況下，連接基團是
氨基賴氨酸。Exendin-3 (z_k) GLP-I (χ-y) A1-75這里包含了來自exendin-3和GLP-I的嵌合肽，其中ζ可以取1-38的數(shù)目，k可以取2-39的數(shù)目，而ζ總是小于k。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比y前1位。優(yōu)選情況下，連接基團是氨基賴氨酸。Exendin-4 (z_k) GLP-I (χ-y) A1-75這里包含了來自exendin-4和GLP-I的嵌合肽，其中ζ可以取1-38的數(shù)目，k可以取2-39的數(shù)目，而ζ總是小于k。A是可以放在任何位置的連接基團，但是優(yōu)選位于C末端并比y前1位。優(yōu)選情況下，連接基團是氨基賴氨酸。嵌合的GLP-I (χ-y) exendin-3 (z-k) A卜75 或 GLP-1 (χ-y) exendin-4 (z_k) A卜75 肽的例子是 MC12,由 GLP-I (7-36) exendin (33-39) Lys 酰胺(由 P印tide Specialty Laboratories GmbH公司按照Merrifield的方法進行合成，并通過HPLC純化。)組成。MC 12 (Ser37, Gly38, Ala39, Pro40, Pro41，Pro42，Ser43, DTPA-Lys44 酰胺)GLPl (7-36)MC12由GLP-I (7-36)完整的氨基酸序列，在C末端帶有一個氨基，優(yōu)選在44位帶有賴氨酸以及螯合劑DTPA，以及來自exendin (33-39) Lys酰胺的7個氨基酸的鏈組成。因此產生了嵌合肽 GLP-I (7-36) exendin (33-39) Lys 酰胺。對于專業(yè)技術人員來說，顯然存在不同長度的來自GLP-1、exendin-3和 exendin-4的肽衍生物，以及不同長度的來自GLP-l、exendin_3和exendin-4的嵌合肽，它們含有它們所基于的GLP-I、exendin-3和exendin-4的氨基酸序列的各種不同組合。基于本發(fā)明的、在C末端被氨基所修飾并通過N末端鍵合在GLP-I受體上的、來自 GLP-I、exendin-3 和 exendin-4 的肽衍生物以及來自 GLP-l、exendin_3 和 exendin-4 的嵌合肽，也包括在一個或多個位置上可以與上述的肽GLP-I、exendin-3和exendin-4區(qū)分開的、并與這些序列具有高度同源性的分子。此處的同源性是指至少40%的序列一致性、特別是60%的序列一致性、優(yōu)選超過80%、特別優(yōu)選超過90%的序列一致性。與上述氨基酸序列的偏差可能通過刪除、取代和/或插入產生。 此外，本發(fā)明的來自GLP-I、exendin-3或exendin-4的嵌合肽也可以被生產成在 C末端沒有任何修飾。它們被特別用于生產治療糖尿病的藥劑。GLP-I (χ-y) exendin-3 (z_k)GLP-I (χ-y) exendin-4 (z_k)Exendin-3 (z_k) GLP-I (χ-y)Exendin-4 (z_k) GLP-I (x-y)MC 20 (Ser33, Gly34, Ala35, Pro36, Pro37, Pro38, Ser39) exendin GLPl (7-36)MC20由GLP-I (7-36)完整的氨基酸序列，在C末端帶有來自exendin (33_39)的7 個氨基酸的鏈組成。因此產生了未修飾的嵌合肽GLP-I (7-36) exendin (33-39)。肽衍生物和嵌合肽的標記將本發(fā)明的肽衍生物以及嵌合肽溶解在適當?shù)姆€(wěn)定緩沖液中以穩(wěn)定金屬，例如優(yōu)選以大約IO3M的濃度溶解在pH 5.4的0. 5M乙酸鈉中。此外，為了穩(wěn)定熒光色素優(yōu)選使用乙酸銨緩沖液；為了穩(wěn)定化療劑和造影劑優(yōu)選使用生理緩沖液。
標記發(fā)生在連接基團A上，通過結合放射性核素、MRI造影劑、熒光色素或化療劑來進行。根據(jù)應用是體內的還是體外的來使用不同的方法。下面是用于共價或復合結合的放射性核素
權利要求
1.GLP-I的肽衍生物，其中在C末端有氨基修飾，并且其中在N端與GLP-I受體鍵合。
2.權利要求1中的GLP-I的肽衍生物，與以下的肽GLP-I(1-37)的氨基酸序列有80% 以上的序列同一性H-His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Leu-Va1-Lys-G1y-Arg-G1y-OH 32 33 34 35 36 37。
3.權利要求2的GLP-I的肽衍生物，其中的肽衍生物含有連接基團A或其衍生物，所述連接基團A位于C末端并且包含具有游離氨基的氨基酸。
4.權利要求1中的GLP-I的肽衍生物，其中它們基于GLP-I (Xi)A^ 其中χ表示GLP-I氨基酸序列的1-36位氨基酸， y表示GLP-I氨基酸序列的2-37位氨基酸，A表示包含一個或多個氨基酸或其衍生物的連接基團，作為信號分子或與信號分子鍵合或穩(wěn)定它們，其中冪表示在氨基酸序列中連接基團可以被發(fā)現(xiàn)的位置。
5.權利要求4中的GLP-I的肽衍生物，其中連接基團A優(yōu)選位于C末端并代表氨基。
6.權利要求3到5中的GLP-I的肽衍生物，其中連接基團A優(yōu)選為賴氨酸。
7.權利要求3到6中的GLP-I的肽衍生物，其中連接基團A是氨基酸例如鳥氨酸，或具有游離胺的有機基團。
8.權利要求3到7中的GLP-I的肽衍生物，其中螯合劑與連接基團A結合，以便用放射性核素或MRI造影劑、熒光色素或化療劑標記。
9.上面提到的權利要求中的GLP-I的肽衍生物，其中螯合劑是N，N-雙(2-[雙(羧甲基)氨基]-乙基)甘氨酸)、D0TA(1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7，10-四乙酸)、 HYNIC (6-吡啶胼-3-碳酸)、MAG3(巰基乙酰基-甘氨酰甘氨酰甘氨酸)、N4 (1，4，8，11-四氮雜十一烷)以及所有已知的衍生物，優(yōu)選為DTPA( 二亞乙基三胺五乙酸)。
10.上面提到的權利要求中的GLP-I的肽衍生物，其中標記是結合核素、MRI造影劑、熒光色素和/或化療劑。
11.上面提到的權利要求中的GLP-I的肽衍生物，其中所選的熒光色素具體來說來自熒光素、羅丹明、香豆素、B0DIPY、嵌二萘(級聯(lián)藍)、熒光黃、藻膽蛋白、花青苷、 AlexaFluoro、俄勒R綠、德克薩斯紅及其衍生物。
12.上面提到的權利要求中的GLP-I的肽衍生物，其中所選的核素具體來說來自F-18、 Cu-64、Cu-67、Ga-67、Ga_68、Y—86、Y—90、Tc-99m, In—Ill、1—123、1—124、1—131、Lu—177、 Re-186、Re-188、Pt_193m、Pt_195m、Ac-225、At-211、Bi-213、Sm-153 或 Er-169。
13.上面提到的權利要求中的來自GLP-I的肽衍生物，其中所選的MRI造影劑具體來說來自釓、錳、鐵、銪、銅、鎳、鉻、鐠、鏑或鈥或其化合物或全氟化碳、或F-19、H-l、P-31、Na-19。
14.上面提到的權利要求中的來自GLP-I的肽衍生物，其中所選的化療劑具體來說來自烷基化試劑、乙基亞胺、亞硝化單胞菌素(N. ureae)、氮芥子氣衍生物、葉酸類似物、嘌呤類似物、嘧啶類似物、鬼臼素衍生物、紫杉烷(taxane) .vincaalcaloide、蒽環(huán)霉素 (anthracycline)、其它抑制細胞的抗生素、鉬化合物、喜樹堿(campthotccin)衍生物、激素、生長因子、干擾素或白介素或細胞抑制物質或細胞毒性物質。
15.上面提到的權利要求中的GLP-I的肽衍生物，其中經(jīng)由結合核素為體外應用而標記是通過用nInCL3飽和鍵合位點來進行的。
16.上面的權利要求中提到的GLP-I的肽衍生物在生產診斷和治療良性和惡性疾病的藥劑中的應用，所述疾病中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用。
17.權利要求1到15中的GLP-I的肽衍生物在確定組織中產胰島素細胞的密度中的應用。
18.權利要求1到15中的來自GLP-I的肽衍生物在確定GLP-I受體的表達或它們的密度中的應用。
19.用于良性和惡性疾病的診斷和治療的藥劑，所述疾病中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用，其中所述藥劑含有標記的權利要求1的GLP-I的肽衍生物。
20.用于良性和惡性疾病的診斷和治療的藥劑，所述疾病中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用，其中所述藥劑含有未標記的權利要求1的GLP-I的肽衍生物。
21.權利要求19的藥劑，其中標記包括結合核素、MRI造影劑、熒光色素和/或化療劑。
22.權利要求19和20中的藥劑用于體外良性和惡性疾病的診斷和治療的應用，所述疾病中GLP-I受體的表達發(fā)揮作用。
23.權利要求19和20中的藥劑用于體外神經(jīng)內分泌腫瘤(NET)、特別是胰島瘤和小細胞支氣管癌的診斷和治療的應用。
24.權利要求19中的藥劑用于體外閃爍照相術、PET、SPECT、MRI、光學診斷、受體介導的化學療法、受體介導的細胞抑制或細胞毒性療法和放射性肽療法的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及與GLP-1和腸促胰島素類似物(exendin)有關的發(fā)明。具體而言，本發(fā)明涉及衍生自GLP-1(類胰高血糖素肽1)和exendin-3和/或exendin-4的肽，其結合GLP-1受體并可以在標記或未標記的情況下用于生產惡性和致命疾病的診斷和治療裝置，在上述疾病中GLP-1受體的表達起著作用。
文檔編號C07K14/605GK102304179SQ20111014712
公開日2012年1月4日 申請日期2005年8月26日 優(yōu)先權日2004年9月3日
發(fā)明者布克哈德·J·戈克, 托馬斯·貝爾, 馬丁·戈特哈特, 馬丁·貝埃 申請人:菲利普斯大學馬爾堡