專利名稱：一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法
一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法所屬領域本發明屬于生物化工技術領域，具體涉及一種新奧苷肽的提取方法，特別是一種從發酵液中分離提取新奧苷肽的方法。
背景技術：
近年來，我國研究開發了一系列的核苷類農用抗生素。如，具有胞苷骨架的核苷類抗生素武夷霉素，嘧肽霉素，多抗菌素(polyoxin)，含有胞嘧啶核苷肽類結構的寧南霉素、 云南霉素及慶豐霉素等。以上核苷類農用抗生素均為通過微生物發酵產生，而微生物菌株發酵產生的核苷類活性物質的量往往很低，加之在發酵液中還有與核苷類活性物質共存的其它大量雜質和副產物，如有微生物細胞、蛋白質、色素、其它細胞代謝產物及末用完的培養基等，從發酵液中提取分離核苷類活性物質也是一個比較復雜的過程。目前，源自微生物發酵產生的核苷類農用抗生素的提取主要有兩種提取方法，一種是離子交換方法，包括發酵液的酸化，固液分離，離子交換層析，濃縮等；另一種方法是膜提取方法，通過采用微濾膜微濾，再超濾，納濾和噴霧干燥等。本實驗室在進行抗生素的研究過程中，發現一株放線菌經發酵能產生具有廣譜抗菌生物活性的嘧啶核苷肽類物質，尤其對革蘭氏陽性菌、植物病毒的抑制活性很強，如有很強的抗植物病毒病如煙草、辣椒、番茄花葉病毒病等的活性。發明者命名該放線菌產生的嘧啶核苷肽類抗菌物質為新奧甘肽(或新奧霉素)，主要成分是一種新的尿嘧啶核苷肽 (1-尿嘧啶-4肌氨酰-絲氨酰氨基-1，4- 二脫氧-β -D-吡喃葡萄糖醛酸)(專利申請號 200910060121. 4)，化學結構為
權利要求
1.一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，其特征是包括以下步驟(1)粗膏制備發酵液先加熱升溫至60°c，保持10-60分鐘，然后將發酵液溫度降至 30°C以下；加入助濾劑，充分攪拌，放置10-30分鐘，再加入絮凝劑，充分攪拌，用型號為 600-2000目的濾布進行過濾，濾液在真空度-0. 08MPa至-0. 09Mpa,水浴溫度60 70°C或 50 55 °C條件下濃縮得粗膏；(2)純化精制所得粗膏與100 200目的柱層析硅膠混合，其比例為粗膏硅膠= 1 1 2. 5，攪拌均勻，在40°C條件下真空干燥，磨碎，過100目篩，用GlOO 200的硅膠填柱，其質量是上柱攪拌物料的5 10倍，進行硅膠柱層析，采用氯仿甲醇=80 20 20 80 二元洗脫劑進行梯度洗脫，下柱液以薄層層析分析結果分段采集，減壓下蒸餾回收洗脫溶劑，濃縮物經干燥得到新奧苷肽粉狀產品。
2.根據權利要求1所述的一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，其特征在于所述的發酵液由產生新奧苷肽的放線菌或其遺傳改良菌株發酵產生。
3.根據權利要求1所述的一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，其特征在于所述的助濾劑為活性碳或珍珠巖或高嶺土或硅藻土。
4.根據權利要求1所述的一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，其特征在于所述的絮凝劑為明礬或聚氯化鋁或三價鐵鹽。
5.根據權利要求1所述的一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，其特征在于加入的助濾劑的質量克占發酵液的體積毫升的百分比為0. 1% -3. 0% ；加入的絮凝劑的質量克占發酵液的體積毫升的百分比為0.01% -0. 1%。
全文摘要
本發明屬于生物化工技術領域，具體涉及一種新奧苷肽的提取方法，特別是一種從發酵液中分離提取新奧苷肽的方法。一種新奧苷肽粉狀固體的制備方法，包括以下步驟(1)粗膏制備發酵液先加熱升溫滅菌，再加入助濾劑和絮凝劑，過濾，濃縮得粗膏；(2)純化精制所得粗膏與柱層析硅膠混合，真空干燥，磨碎，過篩，硅膠柱層析，減壓蒸餾回收洗脫溶劑，濃縮干燥得到新奧苷肽粉狀產品。本發明具有使用有機溶劑耗用少，獲得的新奧苷肽產品純度高，易于工業化等優點。
文檔編號C07K5/083GK102321153SQ20111026182
公開日2012年1月18日 申請日期2011年9月6日 優先權日2011年9月6日
發明者周金燕, 楊杰, 肖亮, 譚紅, 鐘娟 申請人:中國科學院成都生物研究所