專利名稱：一種黃蟬花辛的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物技術領域，特別涉及一種黃蟬花辛的制備方法。
背景技術：
黃蟬花辛(Allamandicin)又叫黃蟬花內(nèi)酷，CAS號51838-83-6，分子式C15H16O7,分子量308. 28，分子結(jié)構
H COOCHj
CH(OH)CHi黃蟬花辛為片狀結(jié)晶物，熔點117 118°C，有抗淋巴細胞白血病P388和人體鼻咽 癌(KB)細胞活性。黃蟬為夾竹桃科黃蟬屬植物，產(chǎn)于熱帶美洲，原產(chǎn)于巴西。藥材主產(chǎn)于福建、廣西。該物種為中國植物圖譜數(shù)據(jù)庫收錄的有毒植物，其毒性為植株乳汁有毒。人畜中毒，癥狀表現(xiàn)為心跳加快，循環(huán)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)障礙。妊娠動物食之會流產(chǎn)。常用于癬疥、滅孑孓?，F(xiàn)代醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)，黃蟬藥材中含有大量內(nèi)酷成分如黃蟬花辛、黃蟬花定和黃蟬花素等，具有細胞毒活性。通過文獻檢索，制備黃蟬花辛的方法，一般采用常規(guī)提取，再用硅膠柱分離。如kupchan等以軟枝黃蟬的根為原料，采用こ醇提取分離出黃蟬花辛等成分。如上所述，傳統(tǒng)提取分離方法存在技術缺陷是分離過程復雜繁瑣，使用有機試劑種類多，收率低，環(huán)境污
染嚴重等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術的不足和缺陷，提供一種黃蟬花辛的制備方法，該方法高效、環(huán)保。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案
一種黃蟬花辛的制備方法，其特征在于以黃蟬根為原料，干燥，粉碎過2(Γ80目篩投入萃取釜，在溫度為4(T50°C、壓カ為15 25MPa，通入液態(tài)CO2進行超臨界萃取，在溫度5(T60°C、壓カ6 10MPa從分離釜中解析萃取物，所得萃取物采用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，回收試劑即得。所述的高速逆流色譜法純化為取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、7JC,按4、: 2飛:5、: 2飛混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機，轉(zhuǎn)速70(Tl000rpm,同時泵入下相做固定相，建立動態(tài)平衡后,流速調(diào)節(jié)為l 4ml/min,用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分。本發(fā)明的優(yōu)勢在于方法采用超臨界CO2萃取，無溶劑污染，提取效率高，純化步驟采用高速逆流色譜法分離，制備周期短，操作簡單，而且樣品不損失，制備量大，無污染。
具體實施例方式 實施例I:
黃蟬根干燥后粉碎，過60目篩，取Ikg投入萃取釜中，通入液態(tài)CO2進行萃取，設定萃取 釜參數(shù)萃取溫度40°C，壓カ為20MPa，通入CO2流量為25L/h，動態(tài)萃取3h，設置分離釜中溫度50 0C、壓カ6MPa，解析萃取物。取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、水，按4:3:7:3混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機，轉(zhuǎn)速SOOrpm，同時泵入下相做固定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，連續(xù)制備，流分回收試劑得黃蟬花辛，經(jīng)高效液相檢測，含量98. 1%。實施例2:
滇姜花干燥后粉碎，過80目篩，取Ikg投入萃取釜中，通入液態(tài)CO2進行萃取，設定萃取釜參數(shù)萃取溫度45°C，壓カ為15MPa，通入CCV流量為20L/h，動態(tài)萃取3h，設置分離釜溫度60 0C、壓カ8MPa，解析得萃取物。取石油醚、こ酸こ酷、甲醇、水，按9:5:9:5混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機，轉(zhuǎn)速900rpm，同時泵入下相做固定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為lml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，連續(xù)制備，流分回收試劑得黃蟬花辛，經(jīng)高效液相檢測，含量99. 1%。
權利要求
1.一種黃蟬花辛的制備方法，其特征在于以黃蟬根為原料，干燥，粉碎過2(T80目篩投入萃取釜，在溫度為4(T50°C、壓力為15 25MPa，通入液態(tài)CO2進行超臨界萃取，在溫度5(T60°C、壓力6 10MPa從分離釜中解析萃取物，所得萃取物采用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，回收試劑即得。
2.根據(jù)權利要求I所述的黃蟬花辛的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜法純化為取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按4 9:2 5:5 9:2飛混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機，轉(zhuǎn)速70(Tl000rpm，同時泵入下相做固定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為f4ml/min，用流動相溶解萃取物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黃蟬花辛的制備方法。方法是以黃蟬根為原料，干燥，粉碎過20~80目篩投入萃取釜，在溫度為40~50℃、壓力為15~25MPa，通入液態(tài)CO2進行超臨界萃取，在溫度50~60℃、壓力6~10MPa從分離釜中解析萃取物，所得萃取物再用高速逆流色譜法純化，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標成分，回收試劑即得。采用本方法制備黃蟬花辛，提取效率高，純化步驟簡單，生產(chǎn)過程清潔無污染，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D493/20GK102850373SQ20121035672
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月24日 優(yōu)先權日2012年9月24日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司