專利名稱：一種墨西菊寧Ⅰ的制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種制備墨西菊寧I的方法。
背景技術：
墨西菊寧I (Mexieanin I ),分子式為C15H18O4,分子量為262. 31,是一種倍半職內酯類化合物，CAS登錄號為5945-41-5。呈棱晶狀(氯仿-甲醇)，mp. 257_260°C。在天然植物中普遍存在，主要分布于菊科多種植物中，如墨西哥山蘿卜天人菊、苦味堆心菊、墨西哥堆心菊、鴉蔥葉堆心菊、柔毛粗花葶膜質菊等植物。藥理研究發現墨西菊寧I具有抗潰瘍作用，另外還具有一定的細胞毒活性。經檢索，尚未見大量制備墨西菊寧I的方法的文獻和專利報道。

發明內容
本發明的目的是提供一種墨西菊寧I的制備方法，其技術方案是
一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于所述方法由下列步驟組成
(1)取富含墨西菊寧I的植物干燥地上部分粉碎成粗粉，室溫下用丙酮溶液組織破碎提取3-4次，每次10-20分鐘，合并提取液，減壓濃縮至浸膏；
(2)將浸膏用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行10-15級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，得萃取物；
(3)將萃取物加水分散，通過大孔吸附樹脂柱，乙醇水溶液梯度洗脫，洗脫液濃縮得粗
品;
(4)將粗品用甲醇溶解，上樣至硅膠目數為200-300的中壓層析柱，用混合有機溶劑梯度洗脫，收集目標洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥即得到墨西菊寧I。步驟(I)所述組織破碎提取用丙酮的濃度為50-80%，用量為原料質量的5-10倍量。步驟(3)所述乙醇水溶液梯度洗脫是依次采用體積百分比濃度為15-20%和60-80%乙醇水溶液進行梯度洗脫。步驟(4)所述中壓柱柱壓為O. 5-2. 4MPa，柱內徑為80_180mm，層析柱徑高比為1:10-20。步驟(4)所述混合有機溶劑為石油醚-乙酸乙酯(體積比為9:1-1:9)或正己烷-丙酮(體積比為9:1-1:9)。本發明的有益效果是
1、本發明采用多級逆流萃取，實現了溶劑與原料液的逆流接觸，濃度梯度大，提取推動力大，萃取效率高，易于規模化生產；
2、本發明的層析柱上樣量大，生產周期短，分離度好，產品純度高。
具體實施例方式 本發明內容通過以下的實施例作進一步的闡述，但并不限制本發明的范圍。
實施例I :
將墨西哥山羅比天人菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用5倍量50%的丙酮溶液提取3次，每次lOmin，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行15級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為15%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為75%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集75%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑80mm，徑高比1:20的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集正己烷-丙酮體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體6. 7g，經HPLC檢測，含量為91.8%。實施例2:
將墨西哥山羅比天人菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用8倍量65%的丙酮溶液提取4次，每次20min，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲 醇混合溶液進行進行10級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為15%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為80%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集80%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑100mm，徑高比1:15的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集正己烷-丙酮體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體5. Sg,經HPLC檢測，含量為96. 2%。實施例3:
將鴉蔥葉堆心菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用5倍量70%的丙酮溶液提取3次，每次15min，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行12級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為15%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為65%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集65%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑150mm，徑高比1:20的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集正己烷-丙酮體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體3. 9g，經HPLC檢測，含量為95. 3%。實施例4:
將墨西哥山羅比天人菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用10倍量50%的丙酮溶液提取4次，每次20min，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行14級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為15%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為60%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集60%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑180mm，徑高比I 20的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集正己烷-丙酮體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體5. 9g，經HPLC檢測，含量為95. 8%。實施例5:
將墨西哥山羅比天人菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用6倍量60%的丙酮溶液提取3次，每次20min，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行15級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為20%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為60%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集60%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑120mm，徑高比1:12的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集石油醚-乙酸乙酯體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體6. 2g，經HPLC檢測，含量為92. 7%。 實施例6:
將柔毛粗花葶膜質菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用10倍量80%的丙酮溶液提取3次，每次15min，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行12級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為20%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為70%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集70%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑100mm，徑高比1:14的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集石油醚-乙酸乙酯體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體5. Sg，經HPLC檢測，含量為93. 6%。實施例7:
將柔毛粗花葶膜質菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用8倍量75%的丙酮溶液提取4次，每次lOmin，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行13級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為20%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為80%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集80%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑80mm，徑高比1:10的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集石油醚-乙酸乙酯體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體5. 4g，經HPLC檢測，含量為95. 5%。實施例8:
將墨西哥山羅比天人菊干燥地上部分IOkg室溫下在閃式提取器中用5倍量80%的丙酮溶液提取4次，每次lOmin，合并提取液，減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行進行15級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，所得萃取物加水分散，通過預處理過的大孔吸附樹脂柱吸附，先用體積百分比濃度為20%的乙醇溶液洗脫，至流出液無色，再用體積百分比濃度為75%的乙醇溶液洗脫至流出液無色，收集75%乙醇洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥得樣品。稱取200-300目經活化的硅膠加入到內徑180mm，徑高比1:10的不銹鋼層析柱中，上述粗品加入甲醇超聲使全部溶解，用泵進樣，用正己烷-丙酮混合溶液洗脫，收集石油醚-乙酸乙酯體積比9:1-1:9的洗脫流分，GC-MS跟蹤監測，合并墨西菊寧I洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥得到墨西菊寧I晶體6. 2g，經HPLC檢測，含量為94. 2%。 ·
權利要求
1.一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于所述方法由下列步驟組成 (1)取富含墨西菊寧I的植物干燥地上部分粉碎成粗粉，室溫下用丙酮溶液組織破碎提取3-4次，每次10-20分鐘，合并提取液，減壓濃縮至浸膏； (2)將浸膏用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液進行10-15級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，得萃取物； (3)將萃取物加水分散，通過大孔吸附樹脂柱，乙醇水溶液梯度洗脫，洗脫液濃縮得粗品; (4)將粗品用甲醇溶解，上樣至硅膠目數為200-300的中壓層析柱，用混合有機溶劑梯度洗脫，收集目標洗脫液，減壓濃縮，低溫干燥即得到墨西菊寧I。
2.根據權利要求I所述的一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于步驟(I)所述組織破碎提取用丙酮的濃度為50-80%，用量為原料質量的5-10倍量。
3.根據權利要求I所述的一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于步驟(3)所述乙醇水溶液梯度洗脫是依次采用體積百分比濃度為15-20%和60-80%乙醇水溶液進行梯度洗脫。
4.根據權利要求I所述的一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于步驟(4)所述中壓柱柱壓為O. 5-2. 4MPa，柱內徑為80_180mm，層析柱徑高比為1:10-20。
5.根據權利要求I所述的一種墨西菊寧I的制備方法，其特征在于步驟(4)所述混合有機溶劑為石油醚-乙酸乙酯(體積比為9:1-1:9)或正己烷-丙酮(體積比為9:1-1:9)。
全文摘要
本發明涉及一種墨西菊寧Ⅰ的制備方法。工藝步驟為取富含墨西菊寧Ⅰ的植物地上部分用丙酮組織破碎提取，提取液減壓濃縮至浸膏，用比例為8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶劑進行多級逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，通過大孔吸附樹脂柱，洗脫液濃縮得粗品，上樣至硅膠為200-300目的中壓層析柱，用混合有機溶劑梯度洗脫，收集墨西菊寧Ⅰ流分，減壓濃縮，低溫干燥即得到墨西菊寧Ⅰ。采用本發明制備墨西菊寧Ⅰ，產品純度高，易于實現產業化放大。
文檔編號C07D307/93GK102863416SQ20121036282
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月26日 優先權日2012年9月26日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司