專利名稱：一種從橘紅中提取柚皮苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，尤其是提取高純度柚皮苷的方法。發明所稱的高純度柚皮苷是指純度在98%以上的柚皮苷。
背景技術：
柚皮苷是一種天然產物，廣泛存在于蕓香科植物中，尤以未成熟的果皮含量最高。它具有止咳、化痰、抗炎、抗腫瘤、抗衰老、降膽固醇、改善血管循環等生物活性。
獲得柚皮苷的方法分為兩種一種是化學合成法，但此種方法合成路線復雜，成本高；第二種方法，也是用得最廣泛的方法，即從蕓香科植物中提取。目前已報道的有，將含有柚皮苷的藥材經水提、通過大孔樹脂、濃縮并收集沉淀后用水或乙醇重結晶后得到(蘇薇薇等，CN03113604. 4和CN03146997. 3);將化橘紅粗粉經水提、調節pH、通過大孔樹脂、濃縮并收集沉淀后用無水乙醇重結晶后得到(王琳等，CN200910232802. 4);將枳殼生藥用60%乙醇提取后，通過大孔樹脂，最后用高速逆流色譜純化后得到(范國榮等，CN200410053284. 7)；將粉碎好的柚子粉經高壓萃取釜萃取，萃取液濃縮后除去不溶物，調節PH后析晶，再用無水乙醇重結晶后得到(許晨等，CN200910229939. 4);賈冬英等報道了使用70%乙醇在60°C下提取后，用蒸餾水重結晶可得到純度在90%的柚皮苷(賈冬英，姚開，譚敏，張銘讓.柚皮中柚皮苷的乙醇提取工藝研究[J].中草藥，2002,33 (9) :801);韋敏等報道了用95%乙醇的提取化橘紅，提取液經大孔樹脂純化后冷凍干燥，可得純度達85%的柚皮苷(韋敏，楊中林，吳建民.大孔吸附樹脂法分離純化化橘紅中柚皮苷的研究[J].中成藥，2007，29 (3)352)。盡管方法眾多，但這些方法都不盡完善。在從藥材中提取出粗品的柚皮苷時，許多方法都有加入CaCl2或調節pH，而且幾乎都使用了大孔樹脂來進行初步純化，這些操作復雜，在洗脫時會用到一些有毒溶劑，污染環境，且加入的物質若不去除干凈，可能會傷害人體，不利于工業化大生產。且所得的柚皮苷純度不夠理想，入藥使用時容易產生毒副作用。雖然過高速逆流色譜和高壓萃取釜能夠獲得純度較高的柚皮苷，但對設備的要求較高，成本相對也較高，不利于工業化生產。

發明內容
為了克服以上問題，尋求一種簡單易行的柚皮苷的提取純化方法，發明人對柚皮苷的提取純化工藝進行了深入的研究，得到了操作簡單、產量高的柚皮苷提取純化工藝。本發明的目的在于提供一種從化橘紅中提取純化柚皮苷的方法。該方法包括以下步驟(I)水提將化橘紅用水加熱提取I 4次，每次用水的體積為化橘紅質量的8 16倍，時間為O. 5 4小時；過濾，合并水提濾液；(2)醇沉將上述水提濾液濃縮至其密度為I. 10 I. 30克/毫升；加乙醇，至醇濃度為40% 80% ;放置6 48小時，過濾，收集醇沉濾液；
(3)回收乙醇將醇沉濾液回收乙醇至無醇味，放置4 15天，過濾，干燥得柚皮昔粗品；(4)重結晶將柚皮苷粗品用20% 50%的乙醇水溶液進行兩次重結晶干燥后得柚皮苷純品；每次重結晶的乙醇水溶液的體積均為固體質量的4 10倍，析晶溫度為5 25°C;其中，第一次重結晶析晶時間為24 36小時，得第一次重結晶粗產品；第二次重結晶采用兩步析晶法，第一步析晶時間為6 8小時，第二步析晶時間為24 36小時。第(4)步驟中第二次重結晶采用兩步析晶法的目的是先濾除雜質野漆樹苷，再將母液析晶析出柚皮苷，從而保證得到高純度的柚皮苷。所述步驟(4)中，第二次重結晶采用的兩步析晶法具體為取第一次重結晶粗產品加入所述乙醇水溶液,加熱攪拌至全溶,趁熱過濾,收集濾液,濾液冷卻至15 25°C，放置6 8小時，抽濾，棄去濾渣，所得濾液繼續放置24 36小時，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的I 4倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷純品。 上述工藝過程中所涉及的工藝參數范圍，均為采用正交設計或均勻設計進行實驗研究后所確定。在上述工藝所指定工藝參數范圍進行提取分離，均可以得到純度在98.0%以上的柚皮苷，上述工藝參數在所述范圍內的改變僅對柚皮苷的得率有影響。在中試規模的多次實驗中，采用本發明所述的提取純化方法得到的柚皮苷純品，經外標法測定產品純度均在98. 0%以上，為高純度柚皮苷。實驗表明本工藝切實可行，有操作簡單、溶劑低毒、對環境無污染、產品純度高、重現性好等特點。
具體實施例方式下面通過實施例對本發明做進一步說明，但不以任何方式限制本發明。下述實施例中乙醇水溶液的濃度是指乙醇與水按體積比的百分比濃度。實施例I取化橘紅500公斤，加入其質量10倍量體積的水提取I小時，濾過，濾渣再提取2次，每次加其質量12倍量體積的水,每次提取I小時,濾過,合并濾液并于70°C濃縮至相對密度為I. 12克/毫升，加乙醇使乙醇的體積比濃度達到70%，放置12小時，濾過，棄去濾渣，將濾液回收乙醇至無醇味，放置5天，析出固體，濾過，將固體干燥，即得柚皮苷粗品73. 3公斤。實施例2取實施例I的柚皮苷粗品5公斤，加入其質量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶,趁熱過濾,收集濾液,濾液在25°C下放置24小時，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結晶粗產品。取第一次重結晶粗產品2. 7公斤，加入其質量10倍量體積的40%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液冷卻至25°C時，繼續放置8小時，抽濾，棄去濾渣，母液繼續放置36小時，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷I. 7公斤，純度為98. 82%。實施例3取實施例I的柚皮苷粗品13公斤，加入其質量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液在20°C下放置30小時，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結晶粗產品。取第一次重結晶粗產品7. 5公斤，加入其質量10倍量體積的50%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液冷卻至20°C時，繼續放置7小時，抽濾，棄去濾渣，母液繼續放置24小時，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷2. 9公斤，純度為98. 81%。實施例4取實施例I的柚皮苷粗品15公斤，加入其質量6倍量體積的30%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液在15°C下放置36小時，析出固體，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，收集固體并干燥后得第一次重結晶粗產品。
取第一次重結晶粗產品9公斤，加入其質量10倍量體積的40%乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液冷卻至5°C時，繼續放置7小時，抽濾，棄去濾渣，母液繼續放置24小時，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的2倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷5. I公斤，純度為98. 92%。
權利要求
1.一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，其特征在于包括以下步驟 (1)水提將化橘紅用水加熱提取I 4次，每次用水的體積為化橘紅質量的8 16倍，時間為0. 5 4小時；過濾，合并水提濾液； (2)醇沉將上述水提濾液濃縮至其密度為I.10 I. 30克/毫升；加乙醇，至醇濃度為40% 80% ;放置6 48小時，過濾，收集醇沉濾液； (3)回收乙醇將醇沉濾液回收乙醇至無醇味，放置4 15天，過濾，干燥得柚皮苷粗品; (4)重結晶將柚皮苷粗品用20% 50%的乙醇水溶液進行兩次重結晶干燥后得柚皮苷 純品；每次重結晶的乙醇水溶液的體積均為柚皮苷粗品質量的4 10倍，析晶溫度為5 25°C;其中，第一次重結晶析晶時間為24 36小時，得第一次重結晶粗產品；第二次重結晶采用兩步析晶法，第一步析晶時間為6 8小時，第二步析晶時間為24 36小時。
2.如權利要求I所述的方法，其特征在于步驟(4)，所述的第二次重結晶采用的兩步析晶法具體為取第一次重結晶粗產品加入所述乙醇水溶液，加熱攪拌至全溶，趁熱過濾，收集濾液，濾液冷卻至15 25°C，放置6 8小時，抽濾，棄去濾渣，所得濾液繼續放置24 36小時，抽濾，固體用水洗滌二次，每次用水量為固體質量的I 4倍，抽干，收集固體并干燥后得柚皮苷純品。
全文摘要
本發明公開了一種從化橘紅中提取柚皮苷的方法，該方法包括水提、醇提回收和重結晶步驟。其中所述的重結晶進行兩次，且第二次重結晶采用兩步析晶法，第一步析晶時間為6～8小時，第二步析晶時間為24～36小時，析晶溫度為5～25℃，溶劑為20%～50%的乙醇水溶液。相對于現有的同類提取技術本工藝具有切實可行，操作簡單、溶劑低毒、對環境無污染、產品純度高、重現性好等優點。
文檔編號C07H1/08GK102964408SQ20121055521
公開日2013年3月13日 申請日期2012年12月19日 優先權日2012年12月19日
發明者王永剛, 蘇薇薇, 吳忠, 劉孟華 申請人:廣東中大天翼生物科技發展有限公司