本發明屬于天然產物提取領域，涉及一種紅景天苷的分離純化方法，特別是涉及一種模擬移動床聯用高速逆流色譜分離純化紅景天苷的方法。
背景技術：
紅景天的化學成分主要有黃酮類、酪醇、紅景天苷(Salidroside) 、谷甾醇、有機酸、揮發油、多糖、脂肪、蛋白質等。其中，紅景天苷及其苷元酪醇是紅景天主要有效成份，其中紅景天苷的提取和分離方法主要有層析法、超濾純化法、醇沉純化法、大孔樹脂吸附法等。其中，大孔樹脂吸附法使用較為普遍，但僅依靠大孔吸附樹脂一種分離方法，得到的紅景天苷產品純度還是偏低。
專利CN201410450304.8公開了一種從紅景天中提取紅景天苷的方法，采用大孔樹脂吸附分離純化，純度可達到98.4%，但收率偏低；專利CN201310463903.9公開了一種從紅景天中提取紅景天苷的方法，采用大孔樹脂純化與模擬移動床純化聯用的方式進行分離純化，雖然提取產物的純度較高，但操作過程較復雜，收率也較低。專利CN021004897公開了一種經過兩次高速逆流色譜提取紅景天苷的方法，提取產物的純度較高，但是收率較低。
為了克服現有方法的缺陷，本申請采用模擬移動床與高速逆流色譜聯用，既保證了純度，也提高了收率。
技術實現要素：
本發明目的在于提供一種紅景天苷的分離純化方法，本方法是一種提取效率高、分離純化效果明顯、而且提取產物純度好，收率高，具有良好的應用前景。
本發明目的是通過如下技術方案實現的：
一種紅景天苷的分離純化方法，包括如下步驟：
（1）提取：將紅景天干燥粉碎后，加入連續逆流提取罐，用水作溶劑提取，過濾，獲得紅景天苷提取液，減壓濃縮得紅景天苷粗提物；
（2）模擬移動床純化：將步驟(1)中的粗提物用乙醇溶解后，通過模擬移動床色譜分離，富集含有紅景天苷的組分；其中，模擬移動床色譜填充的吸附劑為硅膠，洗脫劑為體積比1:13的甲醇:乙酸乙酯溶液；
（3）高速逆流色譜純化：將步驟（2）富集得到的含有紅景天苷的組分濃縮至干，加乙醇溶解，用高速逆流色譜法進行分離，收集含有紅景天苷的組分，減壓蒸干，得到紅景天苷純品。
進一步地，作為優選的方案，在步驟（2）的模擬移動床純化中，吸附區流速為2-4BV/h，優選2BV/h；洗脫區流速3～4BV/h，優選3BV/h；切換時間為600～800s，優選700s；溫度控制在35℃～45℃；壓力控制在0.3MPa～0.5MPa。
進一步地，作為優選的方案，步驟（3）所述的高速逆流色譜法中的固定相和流動相按照如下方法制備：將環己烷、正丁醇、甲醇和水混勻后靜置分層，分別收集上層溶劑和下層溶劑，分別超聲，以上層溶劑為固定相，下層溶劑為流動相。
在優選的實施例中，上述環己烷、正丁醇、甲醇、水的體積比為1.5-3.5：2.0-3.5：1.0-2.5：3.0-6.0，更優選為3.0-3.5：2.5-3.0：1.0-2.0：3.0-4.5，最優選3：2.5：1.5：3.5。
本發明與現有技術相比，有益效果在于：
1）采用模擬移動床與高速逆流色譜聯用，并采用特定的色譜溶劑體系既保證了提取產品的高純度（99%以上），也大大提高了提取率。
2）本發明采用連續逆流提取法提取紅景天苷，有助于提高提取率。
下面將結合具體的實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施方式
實施例1
將干燥的紅景天2kg粉碎后，加入到連續逆流提取罐中，并加入10kg水，回流提取3h，過濾，濃縮，得到紅景天苷粗提物；用無水乙醇溶解后，通過模擬移動床色譜分離，富集含有紅景天苷的組分；其中，模擬移動床色譜填充的吸附劑為硅膠，洗脫劑為體積比1:13的甲醇:乙酸乙酯溶液；吸附區流速為2BV/h；洗脫區流速3BV/h；切換時間為700s；溫度控制在40℃左右；壓力控制在0.4MPa；將富集得到的含有紅景天苷的組分濃縮至干，加乙醇溶解，用高速逆流色譜法進行純化，其中高速逆流色譜法中的固定相和流動相按照如下方法制備：按環己烷：正丁醇：甲醇：水=3：2.5：1.5：3.5的比例將環己烷、正丁醇、甲醇和水混勻后靜置分層，分別收集上層溶劑和下層溶劑，分別超聲，以上層溶劑為固定相，下層溶劑為流動相，收集含有紅景天苷的組分，減壓蒸干，得到紅景天苷純品19.63g，HPLC:99.32%；
實施例2
將干燥的紅景天1kg粉碎后，加入到連續逆流提取罐中，并加入5kg水，回流提取3h，過濾，濃縮，得到紅景天苷粗提物；用無水乙醇溶解后，通過模擬移動床色譜分離，富集含有紅景天苷的組分；其中，模擬移動床色譜填充的吸附劑為硅膠，洗脫劑為體積比1:13的甲醇:乙酸乙酯溶液；吸附區流速為2BV/h；洗脫區流速3BV/h；切換時間為700s；溫度控制在40℃左右；壓力控制在0.4MPa；將富集得到的含有紅景天苷的組分濃縮至干，加乙醇溶解后，用高速逆流色譜法進行純化，其中高速逆流色譜法中的固定相和流動相按照如下方法制備：按環己烷：正丁醇：甲醇：水=3：2.5：1.5：3.5的比例將環己烷、正丁醇、甲醇和水混勻后靜置分層，分別收集上層溶劑和下層溶劑，分別超聲，以上層溶劑為固定相，下層溶劑為流動相，收集含有紅景天苷的組分，減壓蒸干，得到紅景天苷純品10.42g，HPLC:99.27%；
盡管本發明已進行了一定程度的描述，明顯地，在不脫離本發明的精神和范圍的條件下，可進行各個條件的適當變化。可以理解，本發明不限于所述實施方案，而歸于權利要求的范圍，其包括所述每個因素的等同替換。