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一種高尿酸血癥肝細胞模型及其構建方法與流程

文檔序號:11936627閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,包括如下步驟:

(1)選取處于對數生長期的肝細胞,經消化后,制成細胞懸液,血球計數板計數后,將細胞懸液稀釋,混勻,加入孔板中,置于細胞培養箱中培養;

(2)鋪板12-24 h后,取出孔板,棄去細胞上清液,清洗,加入誘導物腺苷,置于細胞培養箱中繼續孵育12 -24 h;

(3)取出孔板,加入黃嘌呤氧化酶,置于細胞培養箱中繼續孵育12-24 h,即得到高尿酸血癥肝細胞模型;采用反向高效液相測定尿酸的含量。

2.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(1)中,所述消化采用胰蛋白酶進行消化;采用吸管吹打瓶壁細胞,制成細胞懸液。

3.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(1)中,細胞懸液稀釋后,細胞的濃度為104-106個/mL。

4.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(1)中,細胞懸液稀釋后,細胞的濃度為106個/mL。

5.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(2)中,所述清洗是指采用聚丁二酸丁二醇酯清洗2-3次。

6.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(2)中,所述腺苷的用量為0.5-2 mmol/L,腺苷以腺苷溶液的形式加入,腺苷溶液是以不含胎牛血清的基礎培養基為溶劑配制而成,現配現用,使用時混勻。

7.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征在于,步驟(2)中,所述腺苷的用量為1.5 mmol/L。

8.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征,步驟(3)中,加入黃嘌呤氧化酶為每孔加入0.2-0.4 IU黃嘌呤氧化酶。

9.根據權利要求1所述的一種高尿酸血癥肝細胞模型的構建方法,其特征,步驟(3)中,加入黃嘌呤氧化酶為每孔加入0.3 IU黃嘌呤氧化酶。

10.由權利要求1~9任一項所述構建方法制得的高尿酸血癥肝細胞模型。

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