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一種抗菌肽、其制備方法及應用與流程

文檔序號:12242551閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽包含如SEQ ID NO.1-2所示的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽包含如SEQ ID NO.3-4所示的核苷酸序列;

優選地,所述抗菌肽包含的氨基酸序列的分子量為SEQ ID NO.1鏈:4074;SEQ ID NO.2鏈:4297。

3.根據權利要求1或2所述的抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽來自于三黃雞回腸菌群。

4.一種表達載體,其特征在于,所述表達載體含有至少一個拷貝的如權利要求2所述的核苷酸序列。

5.一種重組的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞含有權利要求4所述的表達載體;

優選地,所述宿主細胞為大腸桿菌、枯草芽孢桿菌或乳酸乳球菌中的任意一種,優選為乳酸乳球菌。

6.一種如權利要求1-3中任一項所述的抗菌肽的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

(1)提取三黃雞回腸菌群宏基因組;

(2)根據抗菌肽ABP-118設計引物,以提取的三黃雞回腸菌群宏基因組為模板進行擴增;

(3)將步驟(2)擴增出的片段的前導肽替換為宿主的分泌表達信號肽,再進行全合成整個片段,得到完整的分泌表達抗菌肽;

(4)構建分泌表達抗菌肽重組質粒,導入宿主細胞,得到表達抗菌肽的表達工程菌。

7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述引物為SEQ ID NO.5-6所示的序列。

8.根據權利要求6或7所述的制備方法,其特征在于,步驟(4)所述構建分泌表達抗菌肽重組質粒為將得到的分泌表達抗菌肽連接到pNZ8148質粒的BtgI和HindⅢ克隆位點。

9.一種如權利要求1-3中任一項所述的抗菌肽、如權利要求4所述的表達載體、如權利要求5所述的宿主細胞在制備動物飼料中的應用。

10.一種如權利要求1-3中任一項所述的抗菌肽、如權利要求4所述的表達載體、如權利要求5所述的宿主細胞在制備治療藥物中的應用。

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