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一種路德維希腸桿菌及其在誘導鎂離子成礦中的應用的制作方法

文檔序號:12096929閱讀:399來源:國知局
一種路德維希腸桿菌及其在誘導鎂離子成礦中的應用的制作方法與工藝
本發明涉及微生物領域,具體地說,涉及一種路德維希腸桿菌及其在誘導鎂離子成礦中的應用。
背景技術
:菱鎂礦,又稱菱鎂石或堿菱鎂苦土,是鎂的碳酸鹽礦物,主要化學成分為碳酸鎂(MgCO3)。菱鎂礦經加工后主要用作工業高溫爐窖及設備耐高溫、抗侵蝕等方面的耐火材料。此外,還應用在建材、化工、農牧業、造紙、航天航空、汽車及環保等行業。而且菱鎂石是生產堿性耐火材料的基本原料,是我國耐火原料的三大支柱之一。目前,全國鎂質材料行業已開發生產了鎂質材料、鎂質定形和不定形耐火材料、溶劑、鎂質化工材料、金屬鎂及鎂合金等七大系列幾百種產品。全國現有各類鎂質原料生產企業600多家,擁有資產總額200億元以上,從業人員20多萬人,生產能力1500多萬噸,其中出口200多萬噸,出口創匯6億多美元,產品遠銷世界50多個國家和地區。我國現已探明的菱鎂礦儲量達31.18×108t,占世界探明儲量的31%左右,居世界之首。但經過幾十年的開采,商品級的菱鎂礦已越來越少。現在企業通常都利用浮選、輕燒、熱選、重選、化學等方法對不純的菱鎂礦進行純化以滿足市場需求。但是這些方法有的條件苛刻,有的操作較為復雜,成本高。所以現在急需一種操作簡便,成本低廉的方法生產高質量的菱鎂石以解決菱鎂礦短缺的問題。球碳鎂石又稱杜平石(Mg5(CO3)4(OH)2·5H2O),是一種花狀礦物,常與三水菱鎂礦伴(共)生,但目前對球碳鎂石的報道很少。很多文章中指出,球碳鎂石易在微生物誘導的條件下形成,而且一般都會和含鎂碳酸鹽礦物共生,所以球碳鎂石對微生物誘導條件下含鎂碳酸鹽礦物,尤其是菱鎂礦的的形成,有重大的研究意義。腸桿菌在自然界分布非常廣泛,生理特性豐富多樣,是土壤和植物微生態優勢種群之一。腸桿菌屬的菌株一般都有強大的沉降金屬離子的能力。路德維希腸桿菌(Enterobacterludwigii)是腸桿菌中具強大應用潛力的菌種之一,其已在環境污染治理等行業取得了較好的研究成果,例如路德維希腸桿菌對Cd2+具有很好的成礦效果。因此,有針對性的篩選路德維希腸桿菌菌株,制備菌劑,通過人工接種有效誘導Mg2+成礦是一項十分必要的工作和切實可行的途徑。技術實現要素:本發明所要解決的技術問題是如何利用腸桿菌菌株誘導鎂離子成礦,為含鎂廢水的處理及三水菱鎂礦的生成提供一種新方法。本發明的技術方案之一,是提供一種路德維希腸桿菌菌株,所述菌株的分類命名為EnterobacterludwigiiSYB1,已于2016年6月27日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏編號為CGMCCNo.12709。本發明的技術方案之二,是提供上述路德維希腸桿菌菌株在誘導鎂離子成礦中的應用。優選地,上述路德維希腸桿菌菌株在誘導鎂離子成礦中的應用包括如下步驟:向含有Mg2+的液相體系中加入上述保藏編號為CGMCCNo.12709的路德維希腸桿菌。優選地,上述含有Mg2+的液相體系中Mg2+的濃度為0.03~0.12mol/L。優選地,上述含有Mg2+的液相體系中還包括Ca2+,且Mg/Ca(摩爾濃度比)等于12。優選地,上述Ca2+的濃度為0.01mol/L。本發明的有益效果:(1)控制溶液中的Mg/Ca比,利用本發明所述路德維希腸桿菌菌株可以制備高質量的菱鎂礦,且操作簡單,價格低廉,對環境友好;(2)本發明所述路德維希腸桿菌菌株對Mg2+和Ca2+具有明顯的沉降效果,用于硬水軟化領域,前景廣闊。保藏說明:菌種名稱:路德維希腸桿菌;拉丁名:Enterobacterludwigii;菌株編號:SYB1;保藏機構:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心;保藏機構簡稱:CGMCC;地址:北京市朝陽區北辰西路1號院3號;保藏日期:2016年06月27日;保藏中心登記入冊編號:CGMCCNo.12709。附圖說明圖1為路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1在高分辨率透射電鏡下的形態圖;圖2為路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1的系統發育樹圖;圖3為含不同Mg/Ca比的培養基中路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1的生長曲線圖;圖4為含不同Mg/Ca比的培養基中路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1的pH值變化曲線圖;圖5為對照組礦物沉淀的X射線衍射分析圖;圖6為實驗組礦物沉淀的X射線衍射分析圖;圖7為對照組在含鈣鎂培養基戊中形成的表面形貌為圓球狀的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖;圖8為對照組在含鈣鎂培養基戊中形成的表面形貌為菱面體的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖;圖9為實驗組在含鈣鎂培養基甲中礦物沉淀的掃描電鏡圖;圖10為實驗組在含鈣鎂培養基甲中礦物沉淀的能譜分析;圖11為實驗組在含鈣鎂培養基乙中礦物沉淀的掃描電鏡圖;圖12為實驗組在含鈣鎂培養基乙中礦物沉淀的能譜分析;圖13為實驗組在含鈣鎂培養基丙中礦物沉淀的掃描電鏡圖;圖14為實驗組在含鈣鎂培養基丙中礦物沉淀的能譜分析;圖15為實驗組在含鈣鎂培養基丁中礦物沉淀的掃描電鏡圖;圖16為實驗組在含鈣鎂培養基丁中礦物沉淀的能譜分析;圖17為實驗組在含鈣鎂培養基戊中礦物沉淀的掃描電鏡圖;圖18為實驗組在含鈣鎂培養基戊中礦物沉淀的能譜分析;圖19為對照組含不同Mg/Ca比的培養基中,Mg2+的變化趨勢圖;圖20為實驗組含不同Mg/Ca比的培養基中,Mg2+的變化趨勢圖;圖21為對照組含不同Mg/Ca比的培養基中,Ca2+的變化趨勢圖;圖22為實驗組含不同Mg/Ca比的培養基中,Ca2+的變化趨勢圖。具體實施方式下面結合附圖和具體實施例對本發明的具體實施方式作進一步的說明。下述實施例中的實驗方法,如無特殊說明,均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等,如無特殊說明,均可從商業途徑得到。下述實施例中所用的培養基如下:富集培養基:溶質及其濃度為K2HPO40.5g/L,NH4Cl1.0g/L,CaCl20.1g/L,MgSO4·7H2O2.0g/L,酵母浸粉1.0g/L,Na2SO40.5g/L,Fe(NH4)2(SO4)20.5g/L,抗壞血酸0.5g/L,L-Cys0.5g/L,60%的乳酸鈉溶液6mL/L;溶劑為蒸餾水;pH6.0~8.0;其中Fe(NH4)2(SO4)2、抗壞血酸和L-Cys需先用蒸餾水配制成母液,再用0.22μm濾膜過濾除菌,然后用于制備富集培養基;60%的乳酸鈉溶液為國藥集團化學試劑有限公司產品,產品目錄號為30168018。固體純化培養基:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g,NaCl5g溶于1L蒸餾水,調節pH至7.5,然后加入瓊脂20g。液體純化培養基:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于1L蒸餾水,調節pH至7.5。2mol/LNa2CO3水溶液:取10.6g的Na2CO3,溶解于50mL無菌蒸餾水中,然后用孔徑為0.22微米的濾膜過濾。1.07mol/LNaHCO3水溶液:取9.0g的NaHCO3,溶解于100mL無菌蒸餾水中,然后用孔徑為0.22微米的濾膜過濾。含鈣鎂培養基甲:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于蒸餾水,然后加入1.47g的CaCl2·2H2O和0ml2mol/L的MgSO4·7H2O溶液定容至1L,121℃高溫滅菌30min。冷卻后加入2mol/LNa2CO35mL和1.07mol/LNaHCO33mL,調節pH至7.5。含鈣鎂培養基甲中,Mg/Ca比為0(摩爾濃度比),Ca2+的濃度為0.01mol/L,Mg2+的濃度為0mol/L。應當說明的是,本文中提到的Mg/Ca均指Mg2+/Ca2+的摩爾濃度比。含鈣鎂培養基乙:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于蒸餾水,然后加入1.47g的CaCl2·2H2O和15ml2mol/L的MgSO4·7H2O溶液定容至1L,121℃高溫滅菌30min。冷卻后加入2mol/LNa2CO35mL和1.07mol/LNaHCO33mL,調節pH至7.5。含鈣鎂培養基乙中,Mg/Ca比為3(摩爾濃度比),Ca2+的濃度為0.01mol/L,Mg2+的濃度為0.03mol/L。含鈣鎂培養基丙:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于蒸餾水,然后加入1.47g的CaCl2·2H2O和30ml2mol/L的MgSO4·7H2O溶液定容至1L,121℃高溫滅菌30min。冷卻后加入2mol/LNa2CO35mL和1.07mol/LNaHCO33mL,調節pH至7.5。含鈣鎂培養基丙中,Mg/Ca比為6(摩爾濃度比),Ca2+的濃度為0.01mol/L,Mg2+的濃度為0.06mol/L。含鈣鎂培養基丁:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于蒸餾水,然后加入1.47g的CaCl2·2H2O和45ml2mol/L的MgSO4·7H2O溶液定容至1L,121℃高溫滅菌30min。冷卻后加入2mol/LNa2CO35mL和1.07mol/LNaHCO33mL,調節pH至7.5。含鈣鎂培養基丁中,Mg/Ca比為9(摩爾濃度比),Ca2+的濃度為0.01mol/L,Mg2+的濃度為0.09mol/L。含鈣鎂培養基戊:將牛肉膏5g,胰蛋白胨10g和NaCl5g溶于蒸餾水,然后加入1.47g的CaCl2·2H2O和60ml2mol/L的MgSO4·7H2O溶液定容至1L,121℃高溫滅菌30min。冷卻后加入2mol/LNa2CO35mL和1.07mol/LNaHCO33mL,調節pH至7.5。含鈣鎂培養基戊中,Mg/Ca比為12(摩爾濃度比),Ca2+的濃度為0.01mol/,Mg2+的濃度為0.12mol/L。X射線衍射分析使用轉靶X射線衍射儀,日本理學電器公司產品,產品型號為D/Max-RC;掃描電鏡分析使用日本日立公司產品,產品型號為HitachiS-4800;能譜分析使用美國伊達克斯有限公司產品,產品型號為GENESIS能譜儀;高分辨率透射電鏡分析使用日本電子株式會社公司產品,產品型號為JEM-2100。實施例1路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1CGMCCNo.12709的分離、鑒定和保藏一、硫酸鹽還原菌SYB1的分離1、在100mL無菌蒸餾水中加入10g巖石粉末樣品(采自中國濟南長清饅頭山的白云巖),攪拌均勻,靜止放置10分鐘,然后取20mL上清液加入200mL富集培養基中,并用無菌液體石蠟封閉瓶內液面,置于37℃恒溫培養箱中靜置培養、觀察。培養至第7天,富集培養基顏色變黑,可見硫酸鹽還原菌富集成功(富集培養基中的Fe(NH4)2(SO4)2中的亞鐵離子能與富集培養基中的S2-反應生成黑色的硫化亞鐵)。2、完成步驟1后,取上清液接種至含0.5g/LFe(NH4)2(SO4)2的固體純化培養基上,37℃厭氧培養箱中培養、觀察。培養至第7天,產生黑色單菌落。挑取單菌落,反復純化3次以上。將篩選到的一株硫酸鹽還原菌菌株命名為硫酸鹽還原菌SYB1。二、硫酸鹽還原菌SYB1的鑒定1、形態學鑒定將硫酸鹽還原菌SYB1接種到固體純化培養基上,3天后觀察單菌落的形態。結果表明,硫酸鹽還原菌SYB1菌落圓形,直徑3.0~5.0mm,表面光滑有光澤,質地粘,不透明。硫酸鹽還原菌SYB1經染色后,鑒定為革蘭氏陽性菌。通過高分辨率透射電鏡分析硫酸鹽還原菌SYB1,實驗結果見圖1。結果表明,硫酸鹽還原菌SYB1的大小約1.0μm×0.5μm,細菌為短桿狀,有夾膜和鞭毛。2、16SrDNA序列同源性分析硫酸鹽還原菌SYB1的16SrDNA如序列表中的序列1所示。通過ClustalX軟件將序列表中的序列1與GenBank中的序列進行比對,采用鄰接法(N-J法)構建系統發育樹。系統發育樹的實驗結果見圖2。硫酸鹽還原菌SYB1與路德維希腸桿菌(Enterobacterludwigii)同源性達到99%。綜合上述各個鑒定結果,硫酸鹽還原菌SYB1為路德維希腸桿菌(Enterobacterludwigii)。三、硫酸鹽還原菌SYB1的保藏EnterobacterludwigiiSYB1已于2016年06月27日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC,地址為:北京市朝陽區北辰西路1號院3號),保藏編號為CGMCCNo.12709。硫酸鹽還原菌SYB1的全稱為路德維希腸桿菌(Enterobacterludwigii)CGMCCNo.12709,簡稱為路德維希腸桿菌SYB1或SYB1。實施例2制備路德維希腸桿菌SYB1菌劑將路德維希腸桿菌SYB1在固體純化培養基上活化,然后挑取單菌落接種于裝有100mL液體純化培養基的250mL錐形瓶中,37℃、130r/min的恒溫搖床上培養1天,得到OD600值約為1.80的路德維希腸桿菌SYB1菌劑甲。路德維希腸桿菌SYB1菌劑甲在下文簡稱為SYB1菌劑甲。實施例3路德維希腸桿菌SYB1的特性本實施例研究不同Mg/Ca比下路德維希腸桿菌SYB1的生長曲線和pH變化曲線。分別采用各個培養基(含鈣鎂培養基甲、含鈣鎂培養基乙、含鈣鎂培養基丙、含鈣鎂培養基丁和含鈣鎂培養基戊)進行如下操作:取6個250mL的錐形瓶,每個錐形瓶裝入150mL培養基,將6個錐形瓶分為實驗組和對照組,每組3個錐形瓶;向實驗組的錐形瓶中接種SYB1菌劑甲1.5mL,向對照組的錐形瓶中接種等體積無菌超純水;接種完畢后,將錐形瓶置于恒溫振蕩培養箱,37℃、130r/min培養。接種完畢時取樣4mL,然后每3小時取樣4mL,測量菌濃度和pH值。進行三次試驗,結果取平均值。實驗組中SYB1的生長曲線見圖3。SYB1在各個培養基中的生長過程均包括延滯期(圖3的0~3h)、對數期(圖3的3~50h)和穩定期(圖3的50~79h)三個階段:(1)延滯期,此時細菌正在適應培養基內的生長條件,從圖中可看出是0~3h,即為硫酸鹽還原菌SYB1生長的延滯期。(2)對數期,代表著活躍的細胞分裂狀態,從圖中可以看出是3~50h,即在這段時間內硫酸鹽還原菌SYB1在迅速生長。(3)穩定期,此時由于培養基內的營養物質被消耗以及有毒代謝產物的逐漸積累,細菌的生長速率逐漸減慢,但總生物量基本維持不變。從圖中可看出是50~79h。在此期間內,硫酸鹽還原菌SYB1生長速率與衰亡分解速率相當,細菌處于穩定期。實施例4微生物誘導礦化培養1、分別采用培養基(鈣鎂培養基甲、鈣鎂培養基乙、鈣鎂培養基丙、鈣鎂培養基丁和鈣鎂培養基戊)進行如下操作:取30個250mL的錐形瓶,每個錐形瓶裝入150mL的培養基,并按照不同鎂鈣比分成5大組,每一大組有6瓶。2、完成步驟1后,將每一個鎂鈣比下的6個錐形瓶分為實驗組和對照組,每組3個錐形瓶。向實驗組的每個錐形瓶中接種實施例2制備的SYB1菌劑甲1.5mL(接種比例1:100),向對照組的每個錐形瓶中接種1.5mL的無菌超純水。接種完畢后,將所有錐形瓶置于恒溫振蕩培養箱,37℃、130r/min培養14天。實施例5對實施例4中對照組和實驗組中獲得的礦物沉淀進行分析。一、X射線衍射(X-raydiffraction,XRD)分析取實施例4步驟2中培養14天的各培養基底部沉淀,置于1.5mL離心管,靜置5min,棄上清液,然后每個離心管中各加入1mL的蒸餾水進行洗滌,靜置5分鐘,棄上清,洗滌三次,以除去各種鹽離子,沉淀自然干燥后進行XRD分析。XRD掃描角度為10~90°,步長為0.02,掃描速度8°/min。實驗結果見圖5和圖6(圖5為對照組,圖6為實驗組,其中Mg/Ca=0、Mg/Ca=3、Mg/Ca=6、Mg/Ca=9和Mg/Ca=12分別代表含鈣鎂培養基甲、含鈣鎂培養基乙、含鈣鎂培養基丙、含鈣鎂培養基丁和含鈣鎂培養基戊中的鎂鈣摩爾比)和表1。結果表明,路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1與產生球碳鎂石和三水菱鎂礦礦物沉淀有密切聯系。培養了14天的實驗組中,Mg/Ca比為0時圖中為方解石對應的衍射峰,所以Mg/Ca比為0時,含鈣鎂培養基甲中生成的礦物是方解石;Mg/Ca比為3時圖中為單水方解石對應的衍射峰,所以Mg/Ca比為3時,含鈣鎂培養基乙中生成的礦物為單水方解石;Mg/Ca為6和9時圖中有單水方解石對應的衍射峰,也有球碳鎂石對應的衍射峰,所以當Mg/Ca比為6和9時,含鈣鎂培養基丙和丁中均生成了單水方解石和球碳鎂石,此時Mg2+濃度為0.06~0.09mol/L,Ca2+濃度為0.01mol/L;當Mg/Ca比為12時圖中為三水菱鎂礦的衍射峰,所以生成的礦物是三水菱鎂礦,此時Mg2+濃度為0.12mol/L,Ca2+濃度為0.01mol/L。在對照組中,所有Mg/Ca比下生成礦物的衍射峰均與方解石對應,所以對照組中生成的礦物均為方解石。對照組和實驗組中生成礦物的種類有很大差異,說明在微生物的作用下,培養基中所生成碳酸鹽礦物的種類發生了明顯的變化。表1.XRD分析礦物沉淀二、礦物沉淀的掃描電鏡和能譜分析取實施例4步驟2中培養14天的各培養基底部沉淀,置于1.5mL離心管,靜置5min,棄上清液,然后每個離心管中各加入1mL的蒸餾水進行洗滌,靜置5分鐘,棄上清,洗滌三次,以除去各種鹽離子,然后向沉淀中加入100μL的無水乙醇進行懸浮。取部分樣品置于載物臺上,自然干燥后噴金,置于掃描電鏡下觀察,然后進行能譜分析。實驗結果如下:圖7為對照組在含鈣鎂培養基戊中形成的表面形貌為圓球狀的礦物沉淀和能譜分析圖,圖8為對照組在含鈣鎂培養基戊中形成的表面形貌為菱面體的礦物沉淀和能譜分析圖。結果表明,對照組在含鈣鎂培養基戊中形成的礦物沉淀形貌主要是圓球狀、菱面體,且表面粗糙。能譜分析表明,圓球狀礦物主要含有C、O和Ca三種元素,菱面體礦物主要含有C、O、Ca和少量的Mg元素,另外,這兩種礦物中均含有Na元素和Al元素,其中Na可能來源于培養液中的NaCl,Al元素可能來源于載物臺。由于對照組中生成礦物均為方解石,所以在此不一一列舉。圖5為實驗組在含鈣鎂培養基甲中形成的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖。掃描電鏡結果圖9表明含鈣鎂培養基甲中形成的礦物沉淀的表面形貌為菱面體,表面比較粗糙且含有大量的孔隙,礦物由許多納米級顆粒狀礦物組成。結果表明,在含鈣鎂培養基甲中EnterobacterludwigiiSYB1可以影響所形成礦物的形貌。對圖9中的礦物進行能譜分析,結果圖10表明該礦物主要含有C、O和Ca這三種元素,說明形成的礦物為CaCO3,此外礦物還含有少量的Na元素和Al元素,推測鈉元素可能來源于培養液中的氯化鈉,Al元素可能來源于載物臺。圖6為實驗組在含鈣鎂培養基乙中形成的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖。掃描電鏡結果圖11表明,實驗組在含鈣鎂培養基乙中形成的礦物沉淀的表面形貌發生了巨大變化,呈不規則球狀,且球狀礦物表面也有少量花狀礦物。球狀礦物直徑約14μm,由許多小的菱面體礦物聚集形成,且礦物上附著大量的菌體。對圖11中的礦物進行能譜分析,結果圖12表明該礦物主要含C、O、Ca這3種元素,說明形成的礦物為CaCO3,此外礦物還含有少量的Al元素和Mg元素,Mg元素可能是溶液中高濃度的Mg2+附著在礦物上形成,Al元素可能來源于載物臺。圖7和圖8分別為實驗組在含鈣鎂培養基丙、含鈣鎂培養基丁中形成的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖。掃描電鏡結果圖13和圖15表明,兩種培養基中所形成的礦物沉淀的表面形貌均為花狀。花狀礦物直徑約為10μm。分別對圖13和圖15的礦物進行能譜分析,結果圖14和圖16表明,花狀礦物均含有C、O和Mg三種元素,說明形成的礦物為碳酸鎂鹽類,但含鈣鎂培養基丙中所形成礦物中含少量的Ca元素,說明可能形成了少量CaCO3。結合XRD圖,說明含鈣鎂培養基丙、丁中形成的礦物均為球碳鎂石。此外,兩種培養基所形成的礦物中還有Al元素和Pt元素,其中Al元素可能來自載物臺,Pt元素的存在可能是實驗時對礦物噴金所致。圖9為實驗組在含鈣鎂培養基戊中形成的礦物沉淀的掃描電鏡圖和能譜分析圖。掃描電鏡結果圖17表明,實驗組在含鈣鎂培養基戊中形成了大量桿狀礦物,礦物表面光滑且形狀規則。桿狀礦物長度在10μm-80μm。對圖17中桿狀礦物進行能譜分析,結果表明,桿狀礦物主要含C、O和Mg三種元素,結合XRD圖,說明形成的桿狀礦物為三水菱鎂礦。此外,桿狀礦物還含有少量Al元素和Pt元素,其中Al元素可能來自載物臺,Pt元素的存在可能是實驗時對礦物噴金所致。圖19為對照組在含不同Mg/Ca比的培養基中Mg2+的變化趨勢圖,圖20為實驗組在含不同Mg/Ca比的培養基中Mg2+的變化趨勢圖。對比圖19和圖20可以說明,路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1對溶液中的Mg2+有明顯的沉降作用。圖21為對照組在含不同Mg/Ca比的培養基中Ca2+的變化趨勢圖,圖22為實驗組在含不同Mg/Ca比的培養基中Ca2+的變化趨勢圖。對比圖21和圖22可以說明,路德維希腸桿菌EnterobacterludwigiiSYB1對溶液中的Ca2+有明顯的沉降作用。具體數值見表2-表5所示。表2對照組含不同Mg/Ca比培養基中Mg2+變化情況表3實驗組含不同Mg/Ca比培養基中Mg2+變化情況時間(天)Mg/Ca=3Mg/Ca=6Mg/Ca=9Mg/Ca=12186.4194.4302.4410.4380189.6295.3397.5476.3185.4284.6381.4542177.3195.63287.3649139.1156.1256.1742138.65176.3237.65834.3128.69138.38213.6931121.3120.3200.31032.7108.9118.6186.2112595109.5180.3由表2和表3可以看出,在Mg/Ca比為3、6、9和12的培養基中,對照組中Mg2+分別減少了43.2、92.67、93.4和105.2mg。實驗組中Mg2+分別減少了61.4、99.4、192.9和230.1mg。說明路德維希腸桿菌SYB1對溶液中的Mg2+有很好的沉降效果。表4對照組含不同Mg/Ca比培養基中Ca2+變化情況時間(天)Mg/Ca=0Mg/Ca=3Mg/Ca=6Mg/Ca=9Mg/Ca=120270260251190.471702233.63190.89160.91143.82124.554160.91150.37124.559288.1826133.63121.66106.367851.821295.2990.3884.5855.4236.471488.748.05672.0849.2324.711683.5377.6671.7647.0822.081880.4271.3265.8935.4117.92表5實驗組含不同Mg/Ca比培養基中Ca2+變化情況時間(天)Mg/Ca=0Mg/Ca=3Mg/Ca=6Mg/Ca=9Mg/Ca=120270260.73251.82220.65188.182160.01150.82142.73120.53115.464124.545120.75115.467851.82697.27392.8388.1827433.641233.6428.6422.0818.657.061422.0819.3213.7510.16.321618.8216.5912.947.065.421817.9215.7812.945.420.51由表4和表5可以看出,在Mg/Ca比為0、3、6、9和12的培養基中,對照組中Ca2+分別減少189.58、188.68、185.11、155.06和152.08mg。實驗組中Ca2+分別減少了252.08、244.95、215.23、和187.67mg。說明路德維希腸桿菌SYB1可加快并加大溶液中的Ca2+的沉降。應當指出的是,上述說明并非是對本發明的限制,本發明也并不僅限于上述舉例,本
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的技術人員在本發明的實質范圍內所做出的變化、改型、添加或替換,也應屬于本發明的保護范圍。當前第1頁1 2 3 
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