本發(fā)明涉及一種板藍根植物蛋白的高純度制備工藝。
背景技術(shù)：
近年來，SARS、禽流感、以及甲型H1N1流感病毒在我國乃至世界范圍頻繁爆發(fā)，對人的生命安全和社會經(jīng)濟造成極大損害。
長期以來，人們通過疫苗來預防病毒，且取得了良好效果，但疫苗只有與病毒亞型相配時才會有效。病毒變異快且爆發(fā)具有不可預測性，而疫苗研究和生產(chǎn)相對滯后。
針對疫苗的這種弊端，人們開始廣泛研究抗病毒藥物，以此來對抗病毒。西藥抗病毒藥物具有見效快、療效高、作用準確等特點，但每類藥物均具有針對性，只針對某種特定的病毒起作用，因病毒抗原易變異性因素，導致一些制作抗病毒藥物的化學藥物的應用也有一定局限性。許多中藥具有抑制病毒復制、阻止病毒致細胞病變等功效，中藥通過調(diào)節(jié)免疫功能、改善肺循環(huán)、鎮(zhèn)痛抗炎等綜合作用，進而抑制或者殺滅病毒，具有良好的防治病毒的作用。
從傳統(tǒng)中藥中充分挖掘和尋找抗病毒活性物質(zhì)也是近年研究的熱點之一。板藍根具有可靠的抗病毒作用，為家庭常備藥物。板藍根為十字花科植物菘藍(Isatis indigotica)的干燥根，具有清熱解毒、涼血利咽之功效，常用于治療流感、腮腺炎、溫病發(fā)熱、流行性乙型腦炎、肝炎等病毒感染性疾病。板藍根成分復雜，其物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制的不明確，生產(chǎn)工藝仍然比較落后。因此，需要對板藍根中的具有抗病毒效用的植物蛋白的提取工藝進行進一步地研究，以擴大對板藍根中的植物蛋白的應用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明設(shè)計開發(fā)了一種提取效率更高的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：
一種板藍根植物蛋白的高純度制備工藝，包括：
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為300～350μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10～15倍，在50～60℃下浸泡5～6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40～45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2～3倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4～6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟一中，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5～6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40～45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟五中，用陽離子交換樹脂對處理初級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，再用PH值為8～9的氨水對陽離子交換樹脂進行洗脫，將水洗脫以及氨水洗脫的洗脫液都留存下來，進行冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
本發(fā)明所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝通過精確設(shè)計提取工藝，所提取的植物蛋白在提純物的質(zhì)量百分比在94％以上，提高了植物蛋白的提取效率，有助于擴大其在抗病毒方面的應用性。
具體實施方式
下面對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
本發(fā)明提供一種板藍根植物蛋白的高純度制備工藝，包括：
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為300～350μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10～15倍，浸泡5～6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40～45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2～3倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4～6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
本發(fā)明所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝通過精確設(shè)計提取工藝，所提取的植物蛋白在提純物的質(zhì)量百分比在94％以上，提高了植物蛋白的提取效率，有助于擴大其在抗病毒方面的應用性。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟一中，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5～6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40～45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟二中，向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘。
優(yōu)選的是，所述的板藍根植物蛋白的高純度制備工藝中，所述步驟五中，用陽離子交換樹脂對處理初級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，再用PH值為8～9的氨水對陽離子交換樹脂進行洗脫，將水洗脫以及氨水洗脫的洗脫液都留存下來，進行冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
實施例一
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為300～310μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.3％。
實施例二
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為300～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的15倍，浸泡6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在4000rpm下離心處理5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的3倍，之后再置于5500rpm下離心處理25分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.3％。
實施例三
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為340～350μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的15倍，浸泡6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在42℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在4000rpm下離心處理5分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的3倍，之后再置于5500rpm下離心處理25分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.8％。
實施例四
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.8％。
實施例五
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～325μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5.5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在40℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.8％。
實施例六
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3500rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理22分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.6％。
實施例七
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在45℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的3倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.8％。
實施例八
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在44℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4550rpm下離心處理24分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.7％。
實施例九
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡6小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在42℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的3倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.6％。
實施例十
步驟一、將板藍根藥材先用水浸泡24小時，之后將板藍根藥材晾干，將板藍根藥材粉碎成粒徑為320～330μm的板藍根顆粒；
步驟二、向板藍根顆粒中加入水，水的加入量為板藍根顆粒的10倍，浸泡5小時，在浸泡過程中，在前面的4小時之內(nèi)，控制水溫保持在43℃，在剩余時間內(nèi)，控制水溫保持在50℃，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補充水，補充的水量為板藍根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；
步驟三、取上清液，將上清液與所述步驟一得到浸泡板藍根藥材得到的浸漬水混合，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；
步驟四、將粗蛋白用溫度為55℃的水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4，得到初級粗蛋白溶液，將初級粗蛋白溶液冷凍干燥，再用溫度為60℃的水溶解，得到二級粗蛋白溶液；
步驟五、用陽離子交換樹脂對處理二級粗蛋白溶液，用水反復洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍根植物蛋白。
最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為95.9％。
對比例
采用現(xiàn)有工藝對板藍根植物蛋白進行提取，植物蛋白在提純物中的質(zhì)量百分比僅占到87％。
盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)。