技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種檢測(cè)環(huán)境樣品中大腸桿菌的方法,它包括如下操作步驟:從環(huán)境樣品中提取純化總細(xì)菌,重懸菌液備用;將重懸菌液直接上機(jī)進(jìn)行菌落PCR擴(kuò)增大腸桿菌的任一段特定的DNA序列,用于擴(kuò)增的上游引物序列如SEQ?NO.1所示,下游引物序列如SEQ?NO.2所示;檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物,與陽(yáng)性對(duì)照比較,判斷提取純化的總細(xì)菌中是否含有大腸桿菌。本發(fā)明方法簡(jiǎn)化了PCR檢測(cè)的前處理步驟,消除了PCR反應(yīng)的干擾物質(zhì),直接用本方法處理得到的稀釋菌液為模板,采用特定序列的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,靈敏高,特異性好,檢測(cè)時(shí)間短,大大降低了檢測(cè)成本。
技術(shù)研發(fā)人員:謝晶;曹冶;于吉鋒;廖黨金;林毅;魏勇;戴卓建;李興玉;張先惠;葉健強(qiáng);趙素君;李江凌;葉勇剛;王秋實(shí);潘夢(mèng)
受保護(hù)的技術(shù)使用者:四川省畜牧科學(xué)研究院
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.14
技術(shù)公布日:2017.09.15