本發明涉及化合物精制領域中的一種長春胺的精制方法。
背景技術：
長春胺(Vincamine)為小蔓長春花中的一種主要生物堿，為單萜吲哚生物堿中的白堅木堿類，其化學名稱為(3α,14β,16α)-14,15-二氫-14-羥基象牙烯寧-14-羧酸甲酯，英文化學名稱(3a,14b,16a)-14,15-Dihydro-14-hydroxyeburnamenine-14–carboxylic acid methylester，分子式：C21H26N2O3，分子量354.4，結構式如下(式Ⅰ)：
長春胺能透過血腦屏障，使病變區腦組織維持和恢復葡萄糖的氧化分解代謝，使乳酸的產生和二氧化碳的釋放恢復正常，從而擴張腦小血管，改善腦循環，對正常腦組織以及病人腦組織的正常腦區的血流無明顯影響，同時也是合成抗癌藥物長春西汀的重要原料。目前長春胺的合成方法有兩種：一種是全合成法，另一種是半合成法。其中全合成法路線長成本較高。目前國內主要采用半合成法制備長春胺，以馬鈴果提取物它波寧作為原料，經氫化、氧化、還原、重排制得長春胺。
它波寧結構(式Ⅱ)：
這個化合物結構中存在1和2兩個氮原子，在半合成法氧化步驟中，兩個氮原子都會被氧化，氧化產物有以下三種
其中1位氮原子氧化產物A是所需目標產物，在常規還原劑存在下即可被還原，然后發生重排反應得到長春胺，但不可避免的都會生成2位氮原子氧化的雜質B和C，此氧化產物由于2位氮原子處于吲哚環上，故難以被還原，經重排得到雜質N-氧化物，結構如下(式Ⅲ)：
此化合物與長春胺結構類似，極性相近，難以分離除去，嚴重影響長春胺的質量。
半合成所采用原料它波寧來源為植物種子馬鈴果中提取，導致它波寧中含有部分非它波寧植物成分，使得它波寧含量低，影響半合成方法所得長春胺的含量，需精制除去。
因此，研發一種長春胺的精制方法是目前亟待解決的新課題。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種長春胺的精制方法，除去半合成長春胺引入的N-氧化物雜質及無機鹽與它波寧原料引入的非它波寧植物成分，該方法操作簡便、安全性高、收率高、成本低，所得長春胺純度高。
本發明的目的是這樣實現的：一種長春胺的精制方法，所述方法包括以下步驟：
(1)在有機溶劑存在下，對長春胺粗品進行打漿，一段時間后，降溫析晶，抽濾，濾餅以一定有機溶劑洗滌，干燥得到長春胺打漿物；
(2)將步驟(1)得到的長春胺打漿物加有機溶劑溶解，過濾，濾液減壓濃縮，得濃縮物；
(3)將步驟(2)得到的濃縮物加入一定量有機溶劑，在一定溫度下打漿，降溫析晶，抽濾，濾餅以一定量有機溶劑洗滌，干燥，得長春胺精成品。
在步驟(1)中所述的有機溶劑為無水有機溶劑，所述無水有機溶劑選自乙醇、N,N-二甲基甲酰胺、甲醇、丙酮、乙酸乙酯中的一種或幾種；所述的洗滌用有機溶劑為極性有機溶劑，所述的極性有機溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇中的一種；在步驟(1)中所述打漿的溫度為40℃-90℃，所述打漿的時間為4小時-8小時；優選的在步驟(1)中所述打漿的溫度為60℃，所述打漿的時間為7小時；所述的降溫析晶分為第一階段和第二階段，所述的第一階段析晶溫度為20℃-30℃，析晶時間為4小時-8小時，所述的第二階段析晶溫度為-5℃-5℃，析晶時間為2小時-4小時；優選的所述的第一階段析晶溫度為25℃，析晶時間為8小時，所述的第二階段析晶溫度為0℃，析晶時間為4小時；在步驟(1)中所述有機溶劑的體積與長春胺粗品的質量比為3-10:1，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；優選的在步驟(1)中所述有機溶劑的體積與長春胺粗品的質量比為5:1，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；在步驟(2)中所述的有機溶劑為二氯甲烷或氯仿；所述有機溶劑的體積與長春胺的質量比為20-40:1，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；優選的所述有機溶劑的體積與長春胺的質量比為100:3，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；在步驟(3)中所述有機溶劑為甲醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮中的一種或幾種，優選的有機溶劑為二氯甲烷和甲醇混合溶劑；所述有機溶劑的體積與所述步驟(2)中長春胺打漿物質量比為3-10:1，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；優選的所述有機溶劑的體積與所述步驟(2)中長春胺打漿物質量比為5:1，所述的體積單位為毫升，所述的質量單位為克；所述二氯甲烷和甲醇混合溶劑中，二氯甲烷與甲醇的體積比為1:0.5-6，優選的二氯甲烷與甲醇的體積比為1:2；在步驟(3)中所述打漿的溫度為40℃-60℃，打漿的時間為2小時-4小時；所述析晶的溫度為20℃-30℃，析晶的時間為6小時-9小時；優選的在步驟(3)中所述打漿的溫度為60℃，打漿的時間為3小時；所述析晶的溫度為21℃，析晶的時間為7小時；
在步驟(1)中，所述的長春胺粗品由如下方法制備：
A.它波寧的制備：
向1000mL四口瓶中加入30.0g它波寧鹽酸鹽和325.0g石油醚，攪拌下滴加12.3g氨水，滴畢后在25℃下攪拌0.5小時，再加入330g飽和碳酸氫鈉溶液攪拌0.5小時；反應完畢后，分液，水層用2×65g石油醚萃取2次；合并有機相，加入5g無水硫酸鎂干燥2小時，抽濾，50℃下減壓蒸除石油醚，得到它波寧；
B.長春蔓佛明的制備
向配有三通的1000ml四口瓶中加入26.0g它波寧，208.0g甲醇溶解，攪拌下加入2.6gPd/C，99.9％氮氣置換空氣3次，再用99.5％氫氣置換三次后，持續通入氫氣，25℃下反應直至TLC監測不到原料點；反應完畢后，過濾，濾餅用2×9.0g有機溶劑洗滌；濾液40℃下減壓蒸餾，蒸除甲醇，得到長春蔓佛明；
C.單過氧馬來酸的制備
向1000mL四口瓶中加入53.6g順丁烯二酸酐，96.4gN,N-二甲基甲酰胺，攪拌溶解后降溫至-5～0℃，滴加30％過氧化氫29.2g，滴畢，繼續攪拌15min。再將溫度緩慢升至30℃攪拌5小時，反應完畢后，降溫至0℃，加入323.8g冷甲醇稀釋備用；
D.長春胺的制備
向1000mL四口瓶中加入24.0g長春蔓佛明，133.0g甲醇使其溶解，降溫至-5-0℃，攪拌下2.5小時內滴加119.0g單過氧馬來酸，滴畢后攪拌40min，繼續滴加119.1g單過氧馬來酸，2.5小時內滴完，繼續攪拌3小時。反應完畢后，滴加40％偏重亞硫酸鈉溶液至淀粉KI試紙不再變色，繼續攪拌10min，升溫至40℃攪拌3小時；反應完畢后，加入433.9g水，降溫至25℃，滴加氨水調節溶液pH為8.5-9，繼續攪拌降溫至0-5℃，析晶2小時后抽濾，濾餅用57.0g冷甲醇洗滌，150g水洗滌，抽干后，濾餅加入500mL單口瓶中，加入300g水，攪拌下加熱至60℃打漿2小時，抽濾，40℃真空干燥后，得到長春胺。
本發明的要點在于一種長春胺的精制方法，其藥學原理是：(1)通過對步驟(1)中有機溶劑種類及反應溫度的優化，對于N-氧化物雜質的去除可獲得良好的效果，且溶劑用量少、條件溫和，適于工業化生產；(2)通過有機溶劑溶解過濾的方式除去影響產品含量的無機物及植物成分，條件溫和，對含量的提高可獲得良好的效果；(3)通過步驟(3)中混合有機溶劑比例的優化，對于雜質去除及收率有良好效果；(4)反應原料均為一次性加入，簡化操作；(5)本發明得到長春胺純度高。
一種長春胺的精制方法與現有技術相比，對N-氧化物雜質除去效果好，反應過程操作簡便、安全性高、成本低、所得產品收率高、質量好，適合于工業化生產等優點，將廣泛地應用于長春胺的精制領域中。
具體實施方式
以下實施例將有助于對本發明的了解，但這些實施例僅為了對本發明加以說明，本發明并不限于這些內容。
實施例一
步驟一：向100ml單口瓶中加入12.0g長春胺粗品，60ml無水有機溶劑，所述有機溶劑的選擇情況見表1，攪拌下升溫至60℃打漿7小時，降至25℃攪拌8小時，再降至0℃析晶4小時，抽濾，濾餅用12ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時。得到白色長春胺打漿物，N-氧化物雜質、純度及收率情況見表1。
步驟二：向500ml單口瓶中加入6.0g長春胺打漿物，200ml二氯甲烷，攪拌下溶解，過濾，濾液減壓濃縮，得濃縮物。
步驟三：向250ml三頸瓶中加入濃縮物，加入10ml二氯甲烷，20ml甲醇，加熱至60℃打漿3小時，降至21℃攪拌7小時，析出大量白色晶體，抽濾，濾餅用9ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時，得到白色長春胺成品5.4g，摩爾收率89.5％。
表1：有機溶劑的選擇與N-氧化物雜質、純度及收率變化
實施例二
步驟一：向100ml單口瓶中加入12.0g長春胺粗品，60ml N,N-二甲基甲酰胺，攪拌下升溫至一定溫度打漿7小時，所述溫度的選擇情況見表2，降至25℃攪拌8小時，再降至0℃析晶4小時，抽濾，濾餅用12ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時。得到白色長春胺打漿物，N-氧化物雜質、純度及收率情況見表2。
步驟二：向500ml單口瓶中加入6.0g長春胺打漿物，200ml二氯甲烷，攪拌下溶解，過濾，濾液減壓濃縮，得濃縮物。
步驟三：向250ml三頸瓶中加入濃縮物，加入10ml二氯甲烷，20ml甲醇，加熱至60℃打漿3小時，降至21℃攪拌7小時，析出大量白色晶體，抽濾，濾餅用9ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時，得到白色長春胺成品5.4g，摩爾收率89.5％
表2：溫度的選擇與N-氧化物雜質、純度及收率變化
實施例三
步驟一：向100ml單口瓶中加入12.0g長春胺粗品，60ml N,N-二甲基甲酰胺，攪拌下升溫至60℃打漿7小時，降至25℃攪拌8小時，再降至0℃析晶4小時，抽濾，濾餅用12ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時。得到白色長春胺打漿物10.4g，摩爾收率87.0％。
步驟二：向500ml單口瓶中加入6.0g長春胺打漿物，200ml有機溶劑，所述有機溶劑的選擇情況見表3，攪拌下溶解，過濾，濾液減壓濃縮，得濃縮物。
步驟三：向250ml三頸瓶中加入濃縮物，加入10ml二氯甲烷和20ml甲醇混合溶劑，加熱至60℃打漿3小時，降至21℃攪拌7小時，抽濾，析出大量白色晶體，濾餅用9ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時，得到白色長春胺成品，成品含量及收率情況見表3
表3：有機溶劑的選擇與成品含量及收率情況
實施例四
步驟一：向100ml單口瓶中加入12.0g長春胺粗品，60ml N,N-二甲基甲酰胺，攪拌下升溫至60℃打漿7小時，降至25℃攪拌8小時，再降至0℃析晶4小時，抽濾，濾餅用12ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時。得到白色長春胺打漿物10.4g，摩爾收率87.0％。
步驟二：向500ml單口瓶中加入6.0g長春胺打漿物，200ml二氯甲烷，攪拌下溶解，過濾，濾液減壓濃縮，得濃縮物。
步驟三：向250ml三頸瓶中加入濃縮物，加入二氯甲烷和甲醇混合溶劑30ml，所述二氯甲烷和甲醇混合比例的選擇情況見表4，加熱至60℃打漿3小時，降至21℃攪拌7小時，析出大量白色晶體，抽濾，濾餅用9ml冷甲醇洗，40℃干燥6-9小時，得到白色長春胺成品，N-氧化物雜質、純度及收率情況見表4。
表4：混合溶劑比例選擇與N-氧化物雜質、純度及收率變化
實施例五
本發明實施例一至四中的長春胺粗品由如下方法制備：
A.它波寧的制備：
向1000mL四口瓶中加入30.0g(80.4mmol)它波寧鹽酸鹽和325.0g石油醚，攪拌下滴加12.3g(87.7mmol)氨水，滴畢后在25℃下攪拌0.5小時，再加入330g飽和碳酸氫鈉溶液攪拌0.5小時。反應完畢后，分液，水層用2×65g石油醚萃取2次。合并有機相，加入5g無水硫酸鎂干燥2小時，抽濾，50℃下減壓蒸除石油醚，得到27.0g它波寧，質量收率為90％。
B.長春蔓佛明的制備
向配有三通的1000ml四口瓶中加入26.0g(77.3mmol)它波寧，208.0g甲醇溶解，攪拌下加入2.6gPd/C，99.9％氮氣置換空氣3次，再用99.5％氫氣置換三次后，持續通入氫氣，25℃下反應直至TLC監測(展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝5:1)不到原料點。反應完畢后，過濾，濾餅用2×9.0g有機溶劑洗滌。濾液40℃下減壓蒸餾，蒸除甲醇，得到長春蔓佛明24.7g，質量收率為95.0％。
C.單過氧馬來酸的制備
向1000mL四口瓶中加入53.6g(546.6mmol)順丁烯二酸酐，96.4gN,N-二甲基甲酰胺，攪拌溶解后降溫至-5～0℃，滴加30％過氧化氫29.2g(257.6mmol)，滴畢，繼續攪拌15min。再將溫度緩慢升至30℃攪拌5小時，反應完畢后，降溫至0℃，加入323.8g冷甲醇稀釋備用。
D.長春胺的制備
向1000mL四口瓶中加入24.0g(70.9mmol)長春蔓佛明，133.0g甲醇使其溶解，降溫至-5-0℃，攪拌下2.5小時內滴加119.0g(60.9mmol)單過氧馬來酸，滴畢后攪拌40min，繼續滴加119.1g(60.9mmol)單過氧馬來酸，2.5小時內滴完，繼續攪拌3小時。反應完畢后，滴加40％偏重亞硫酸鈉溶液至淀粉KI試紙不再變色，繼續攪拌10min，升溫至40℃攪拌3小時。反應完畢后，加入433.9g水，降溫至25℃，滴加氨水調節溶液pH為8.5-9，繼續攪拌降溫至0-5℃，析晶2小時后抽濾，濾餅用57.0g冷甲醇洗滌，150g水洗滌，抽干后，濾餅加入500mL單口瓶中，加入300g水，攪拌下加熱至60℃打漿2小時，抽濾，40℃真空干燥后，得到長春胺18.8g，質量收率78.3％。