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CIK細胞培養試劑盒的制作方法

文檔序號:12182851閱讀:1550來源:國知局
CIK細胞培養試劑盒的制作方法與工藝

本實用新型屬于試劑盒或試劑箱技術領域,具體涉及一種CIK細胞培養試劑盒。



背景技術:

隨著我國工業的快速發展,環境污染日益加劇,腫瘤的發病率逐年上升,人們對腫瘤治療方法的探究也在不斷創新。自1991年Schmidt Wolf等報道了體外培養的殺傷細胞(CIK細胞)具有較強的抗腫瘤作用以來,細胞因子誘導的殺傷細胞CIK作為新型過繼免疫治療腫瘤的免疫細胞之一,開始得到廣泛關注。

近幾年來,我國對CIK細胞的研究也在不斷深入。CIK細胞是將人體外周血單個核細胞在體外經多種細胞因子(抗人CD3單克隆抗體、IL-2、IL-1a和IFN-γ)共同刺激激活培養后獲得的一群既表達T細胞所特有的膜表面分子CD3,又表達NK細胞膜表面分子CD56,被稱為NK樣T淋巴細胞的特異質細胞群。與LAK、TIL等相比,CIK細胞在殺瘤活力等方面具有新型、高效和廣譜性。

目前國內現有技術培養的CIK細胞存在生長狀態緩慢、擴增次數一般等問題,難以達到腫瘤治療所需數量級,腫瘤治療效果欠佳。抗人CD3單克隆抗體作為CIK細胞刺激因子之一,具有誘導活化T細胞并能進行長期培養的作用,且在培養過程中用量很小。IL-1a、IFN-γ對CIK細胞的增長無明顯影響,IL-2雖能刺激活化T細胞大量增殖但所需要的量非常大。



技術實現要素:

本實用新型提出一種CIK細胞培養試劑盒,該試劑盒包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶有效提高CIK細胞的增殖速度和數量,為腫瘤患者在較短的時間內獲得更好的過繼免疫治療效果提供方法。

本實用新型的技術方案是這樣實現的:

一種CIK細胞培養試劑盒,包括盒體、可開啟的盒蓋與包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶,所述盒體內從左到右依次設置有無血清培養基放置槽、淋巴分離液放置槽、培養瓶放置槽與細胞因子存儲單元,所述包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶放置在所述培養瓶放置槽中,所述細胞因子存儲單元為細胞因子重組人IL-2放置槽,所述細胞因子重組人IL-2放置槽的數量為兩個。

進一步,所述盒體內還設置有海綿固定板,所述無血清培養基放置槽、淋巴分離液放置槽、培養瓶放置槽與細胞因子存儲單元均設置在所述海綿固定板上面。

本實用新型的有益效果:

本實用新型的試劑盒包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶有效提高CIK細胞的增殖速度和數量,為腫瘤患者在較短的時間內獲得更好的過繼免疫治療效果提供方法。

附圖說明

為了更清楚地說明本實用新型實施例或現有技術中的技術方案,下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹,顯而易見地,下面描述中的附圖僅僅是本實用新型的一些實施例,對于本領域普通技術人員來講,在不付出創造性勞動的前提下,還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本實用新型CIK細胞培養試劑盒中未放置培養瓶的結構示意圖;

圖2為包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶的立體圖。

附圖標示:1、盒體,2、可開啟的盒蓋,3、包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶,4、海綿固定板,5、無血清培養基放置槽,6、淋巴分離液放置槽,7、培養瓶放置槽,8、細胞因子重組人IL-2放置槽。

具體實施方式

下面將結合本實用新型實施例中的附圖,對本實用新型實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。基于本實用新型中的實施例,本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護的范圍。

參照圖1與圖2,一種CIK細胞培養試劑盒,包括盒體1、可開啟的盒蓋2與包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶3。盒體1內設置有海綿固定板4。海綿固定板4上從左到右依次設置有無血清培養基放置槽5、淋巴分離液放置槽6、培養瓶放置槽7與細胞因子存儲單元。包被抗人CD3單克隆抗體培養瓶3放置在培養瓶放置槽7中。細胞因子存儲單元為細胞因子重組人IL-2放置槽8,細胞因子重組人IL-2放置槽8的數量為兩個。

CIK細胞的培養步驟

1、包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶的預處理

從試劑盒中取出包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶,用生理鹽水洗滌一次,再用無血清培養基洗滌一次備用

2、外周血單個核細胞的分離提取與初培養

采取肝素抗凝的外周血50ml,緩慢均勻加入已加入淋巴分離液的離心管中,低速水平離心機轉速1500r/min,離心20min。分離后提取單個核細胞層,用生理鹽水洗滌2次。收集外周血單個核細胞于離心管中,加入無血清培養基吹打至充分懸浮,加入已包被抗人CD3單克隆抗體的培養瓶中。置37℃,5%CO2培養箱中培養。

3、CIK細胞的擴增培養

每天觀察細胞生長狀態并根據情況進行換液及加重組人IL-2進行擴增;

4、在培養的第14天,收獲CIK細胞。

以上所述僅為本實用新型的較佳實施例而已,并不用以限制本實用新型,凡在本實用新型的精神和原則之內,所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本實用新型的保護范圍之內。

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