技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)合成和藥物研發(fā)領(lǐng)域，具體涉及一種3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的合成方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：
新有機(jī)合成方法的獲得和新藥先導(dǎo)物的發(fā)現(xiàn)是我們多年研究的主要目標(biāo)。目前，2,4,4-三甲基-2-取代苯基氨基-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的合成方法，以及對(duì)2,4,4-三甲基-2-取代苯基氨基-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物進(jìn)行活性測(cè)試，在現(xiàn)有技術(shù)中均未見報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的合成方法及其應(yīng)用。本發(fā)明所提供的合成方法反應(yīng)條件溫和、過程經(jīng)濟(jì)、環(huán)保，合成操作簡(jiǎn)單產(chǎn)物易于分離提純、產(chǎn)率高、過程經(jīng)濟(jì)環(huán)保、不需使用任何催化劑。
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的合成方法，包括如下步驟：在反應(yīng)容器中分別加入4-羥基香豆素、苯胺、丙酮和有機(jī)溶劑混合均勻，4-羥基香豆素、苯胺和丙酮的摩爾比為1:0.5～4:1.2～10，將混合均勻后的反應(yīng)混合物在40℃-140℃條件下攪拌反應(yīng)10～14小時(shí)至反應(yīng)完成，將得到的反應(yīng)產(chǎn)物減壓蒸餾除去低沸點(diǎn)物質(zhì)，獲得固體產(chǎn)物，用乙醇對(duì)固體產(chǎn)物進(jìn)行重結(jié)晶，獲得3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物。在本發(fā)明中，反應(yīng)混合物的加熱方式選擇常見方式加熱或微波加熱均可實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明提出的合成方法簡(jiǎn)單快速，合成反應(yīng)步驟少、操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)物易于分離提純、產(chǎn)率高、過程經(jīng)濟(jì)和環(huán)保、不需使用任何催化劑。
優(yōu)選，所述的苯胺為取代苯胺，所述的取代苯胺中的取代基選自氫、烷基、芳基、取代芳基、鹵素、三氟甲基、氨基、取代氨基、烷氧基、羧基、酯基和酰基中的一種。
優(yōu)選，所述的有機(jī)溶劑選自丙酮、氯代烷、烷基苯、醚類和酯類溶劑中的一種。在本發(fā)明中，4-羥基香豆素為固體，取代苯胺為固體或液體，丙酮為液體。當(dāng)有機(jī)溶劑為丙酮時(shí)，丙酮既為反應(yīng)物，同時(shí)也是溶劑，不需要使用任何催化劑，正是如此，該反應(yīng)比較經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。本發(fā)明也可以選用其他溶劑，如氯代烷、烷基苯、醚類和酯類溶劑，該反應(yīng)也可進(jìn)行。
進(jìn)一步的，所述的有機(jī)溶劑為丙酮，反應(yīng)溫度為60℃-80℃。
進(jìn)一步的，所述的有機(jī)溶劑選自氯代烷、烷基苯、醚類和酯類溶劑中的一種，反應(yīng)溫度為60℃-80℃。
優(yōu)選，4-羥基香豆素、苯胺和丙酮的摩爾比為1:1:2.5。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供根據(jù)上述的合成方法制備得到的3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物，結(jié)構(gòu)式如式1所示：
其中：r選自氫、烷基、芳基、鹵素、三氟甲基、氨基、取代氨基、烷氧基、羧基、酯基和酰基中的一種。
本發(fā)明提出的3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物，以4-羥基香豆素、丙酮和取代苯胺為原料，合成路線特征用以下反應(yīng)式來表示：
其中：r選自氫、烷基、芳基、取代芳基、鹵素、三氟甲基、氨基、取代氨基、烷氧基、羧基、酯基、酰基等。
優(yōu)選，式1所示的3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物如表1所示：
表1
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物在乙酰膽堿酯酶抑制劑的應(yīng)用。通過活性測(cè)試發(fā)現(xiàn)3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物具有乙酰膽堿酯酶的抑制活性，在抗老年癡呆方面具有明確的潛在應(yīng)用價(jià)值。
本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供一種防治抗老年癡呆的藥物，3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物作為活性成分。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)：
1.本發(fā)明提供的合成方法反應(yīng)條件溫和、過程經(jīng)濟(jì)、環(huán)保，合成操作簡(jiǎn)單產(chǎn)物易于分離提純、產(chǎn)率高、過程經(jīng)濟(jì)環(huán)保、不需使用任何催化劑。
2.本發(fā)明所制備的3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物具有乙酰膽堿酯酶的抑制活性，在抗老年癡呆方面具有明確的潛在應(yīng)用價(jià)值。
具體實(shí)施方式：
以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。
除特別說明，本發(fā)明中的實(shí)驗(yàn)材料和試劑均為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)市購(gòu)產(chǎn)品。
實(shí)施例1：
2,4,4-三甲基-2-苯基氨基-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物1)
合成方法1：在50ml圓底燒瓶中分別加入10.0毫摩爾(1.62克)4-羥基香豆素、10.0毫摩爾(0.93克)苯胺和25.0毫摩爾(1.74克)丙酮和5毫升丙酮混合均勻，將混合均勻后的反應(yīng)混合物在70℃條件下攪拌12小時(shí)，該反應(yīng)利用tlc跟蹤反應(yīng)，直至反應(yīng)完成。反應(yīng)完成后獲得固體產(chǎn)物，把適量乙醇加入到固體產(chǎn)物中，進(jìn)行重結(jié)晶獲得純產(chǎn)物。經(jīng)計(jì)算該化合物1的產(chǎn)率65％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.89(dd,j1＝8.2hz,j2＝1.6hz,1h),7.50(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.36–7.18(m,4h),7.00(d,j＝7.6hz,2h),6.92(t,j＝7.3hz,1h),4.44(br,1h),2.33–2.11(m,2h),1.82(s,3h),1.66(s,3h),1.56(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.2,157.1,152.6,142.8,131.4,129.1,123.7,123.2,121.1,119.4,116.3,116.2,108.5,89.2,49.6,30.8,28.8,28.6,25.4.esrmsm/z＝336.2[m+h]+。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度依次為40℃，60℃，80℃和90℃，經(jīng)計(jì)算化合物1的產(chǎn)率依次為15％、63％、65％、61％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同反應(yīng)溫度為70℃獲得同樣的產(chǎn)物。由此看出，在反應(yīng)溫度為60℃～80℃時(shí)，化合物1的產(chǎn)率最高。
依據(jù)合成方法1，依次改變4-羥基香豆素、苯胺和丙酮的摩爾比例，由1:0.5:1.2至1:4:10，在70℃條件下攪拌反應(yīng)12小時(shí)，得到產(chǎn)物的收率范圍為25％至65％。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4-羥基香豆素、苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5時(shí)的化合物1的產(chǎn)率最高，最為經(jīng)濟(jì)。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度控制在70℃，反應(yīng)時(shí)間分別為4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、14小時(shí)和18小時(shí)，后處理得到的化合物1的產(chǎn)率依次為18％、44％、60％、65％、63％和59％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物為化合物1。由此看出，在反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)，化合物1的產(chǎn)率最高。
合成方法2：在50ml圓底燒瓶中分別加入10.0毫摩爾(1.62克)4-羥基香豆素、10.0毫摩爾(0.93克)苯胺和25.0毫摩爾(1.74克)丙酮以及5毫升四氫呋喃，把反應(yīng)混合物在60-870℃條件下攪拌12小時(shí)，該反應(yīng)利用tlc跟蹤反應(yīng)，直至反應(yīng)完成。反應(yīng)完成后，減壓蒸餾除去低沸點(diǎn)物質(zhì)，獲得固體產(chǎn)物。把適量乙醇加入到固體產(chǎn)物中，進(jìn)行重結(jié)晶獲得純產(chǎn)物。經(jīng)計(jì)算該化合物1的產(chǎn)率67％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同合成方法1獲得同樣的產(chǎn)物。
使用丁醚、三氯甲烷、丁酮有機(jī)試劑來代替合成方法2中的四氫呋喃，其他反應(yīng)條件不變，最后得到產(chǎn)物，經(jīng)計(jì)算該化合物1的產(chǎn)率50％～65％，與合成方法1相近，核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同合成方法1獲得同樣的產(chǎn)物。
實(shí)施例2：
2,4,4-三甲基-2-(4-甲苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物2)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為對(duì)甲苯胺，獲得化合物2，經(jīng)計(jì)算化合物2的產(chǎn)率60％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.87(dd,j1＝7.9hz,j2＝1.6hz,1h),7.50(dd,j1＝7.3hz,j2＝1.6hz,1h),7.32–7.25(m,2h),7.06(d,j＝8.0hz,2h),6.94(d,j＝8.1hz,2h),4.49(br,1h),2.29(s,3h),2.26–2.10(m,2h),1.77(s,3h),1.63(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.3,157.3,152.6,140.1,131.3,131.0,130.5,129.6,128.4,123.6,123.2,120.6,116.2,108.4,89.7,49.6,30.8,28.7,26.9,26.5,25.3,20.6.esrmsm/z＝350.2[m+h]+.
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度依次為40℃，60℃，80℃和90℃，經(jīng)計(jì)算化合物2的產(chǎn)率依次為15％、58％、60％、52％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同反應(yīng)溫度為70℃獲得同樣的產(chǎn)物。由此看出，在反應(yīng)溫度為60℃～80℃時(shí)，化合物2的產(chǎn)率最高。
依據(jù)合成方法1，依次改變4-羥基香豆素、對(duì)甲苯胺和丙酮的摩爾比例，由1:0.5:1.2至1:4:10，在70℃條件下攪拌反應(yīng)12小時(shí)，得到產(chǎn)物的收率范圍為20％至60％。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4-羥基香豆素、對(duì)甲苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5時(shí)的化合物2的產(chǎn)率最高，最為經(jīng)濟(jì)。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度控制在70℃，反應(yīng)時(shí)間分別為4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、14小時(shí)和18小時(shí)，后處理得到的化合物2的產(chǎn)率依次為15％、40％、55％、60％、57％和54％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物為化合物2。由此看出，在反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)，化合物2的產(chǎn)率最高。
實(shí)施例3：
2,4,4-三甲基-2-(3-甲苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物3)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為間甲苯胺，獲得化合物3，經(jīng)計(jì)算化合物3的產(chǎn)率55％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.90(dd,j1＝8.1hz,j2＝1.6hz,1h),7.50(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.35–7.24(m,2h),7.12(t,j＝7.7hz,1h),6.89–6.78(m,2h),6.74(d,j＝7.5hz,1h),4.41(br,1h),2.30(s,3h),2.28–2.11(m,2h),1.82(s,3h),1.67(s,3h),1.56(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.3,157.1,152.7,142.7,138.9,131.4,128.9,123.6,123.1,121.9,120.2,116.4,116.3,116.2,108.6,89.2,49.7,30.7,28.8,28.5,25.4,21.5.esrmsm/z＝350.2[m+h]+.
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度依次為40℃，60℃，80℃和90℃，經(jīng)計(jì)算化合物3的產(chǎn)率依次為18％、53％、55％、50％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同反應(yīng)溫度為70℃獲得同樣的產(chǎn)物。由此看出，在反應(yīng)溫度為60℃～80℃時(shí)，化合物3的產(chǎn)率最高。
依據(jù)合成方法1，依次改變4-羥基香豆素、間甲苯胺和丙酮的摩爾比例，由1:0.5:1.2至1:4:10，在70℃條件下攪拌反應(yīng)12小時(shí)，得到產(chǎn)物的收率范圍為20％至55％。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4-羥基香豆素、間甲苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5時(shí)的化合物3的產(chǎn)率最高，最為經(jīng)濟(jì)。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度控制在70℃，反應(yīng)時(shí)間分別為4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、14小時(shí)和18小時(shí)，后處理得到的化合物3的產(chǎn)率依次為15％、35％、52％、55％、53％和50％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物為化合物3。由此看出，在反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)，化合物3的產(chǎn)率最高。
實(shí)施例4：
2,4,4-三甲基-2-(2-甲苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物4)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為鄰甲苯胺，獲得化合物4，經(jīng)計(jì)算化合物4的產(chǎn)率58％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.95–7.88(m,1h),7.53–7.46(m,1h),7.35(d,j＝8.1hz,1h),7.28(d,j＝14.2hz,2h),7.14(dd,j1＝13.4hz,j1＝7.2hz,2h),6.84(t,j＝7.4hz,1h),4.36(br,1h),2.40-2.15(m,5h),1.86(s,3h),1.70(s,3h),1.57(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.3,157.2,152.6,141.1,131.3,130.6,126.6,126.1,123.7,123.2,120.5,118.2,116.3,108.5,89.2,50.1,30.6,28.9,28.8,25.3,18.0.esrmsm/z＝350.2[m+h]+.
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度依次為40℃，60℃，80℃和90℃，經(jīng)計(jì)算化合物4的產(chǎn)率依次為15％、55％、58％、50％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同反應(yīng)溫度為70℃獲得同樣的產(chǎn)物。由此看出，在反應(yīng)溫度為60℃～80℃時(shí)，化合物4的產(chǎn)率最高。
依據(jù)合成方法1，依次改變4-羥基香豆素、鄰甲苯胺和丙酮的摩爾比例，由1:0.5:1.2至1:4:10，在70℃條件下攪拌反應(yīng)12小時(shí)，得到產(chǎn)物的收率范圍為20％至58％。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4-羥基香豆素、鄰甲苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5時(shí)的化合物4的產(chǎn)率最高，最為經(jīng)濟(jì)。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度控制在70℃，反應(yīng)時(shí)間分別為4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、14小時(shí)和18小時(shí)，后處理得到的化合物3的產(chǎn)率依次為15％、38％、50％、58％、55％和50％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物為化合物4。由此看出，在反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)，化合物4的產(chǎn)率最高。
實(shí)施例5：
2,4,4-三甲基-2-(4-甲氧基苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物5)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為對(duì)甲氧基苯胺，獲得化合物5，經(jīng)計(jì)算化合物5的產(chǎn)率60％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ：7.84(d,j＝7.9hz,1h),7.51(t,j＝7.8hz,1h),7.34–7.25(m,2h),7.00(d,j＝8.5hz,2h),6.82(d,j＝8.6hz,2h),4.18(br,1h),3.79(s,3h),2.28–2.08(m,2h),1.69(s,3h),1.61(s,3h),1.56(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.3,157.5,155.8,152.7,135.2,131.3,124.6.123.6,123.2,116.2,114.2,108.3,90.5,55.5,49.3,30.9,28.9,28.5,25.3.esrmsm/z＝366.2[m+h]+.
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度依次為40℃，60℃，80℃和90℃，經(jīng)計(jì)算化合物5的產(chǎn)率依次為18％、57％、60％、52％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物同反應(yīng)溫度為70℃獲得同樣的產(chǎn)物。由此看出，在反應(yīng)溫度為60℃～80℃時(shí)，化合物5的產(chǎn)率最高。
依據(jù)合成方法1，依次改變4-羥基香豆素、甲氧基苯胺和丙酮的摩爾比例，由1:0.5:1.2至1:4:10，在70℃條件下攪拌反應(yīng)12小時(shí)，得到產(chǎn)物的收率范圍為20％至60％。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4-羥基香豆素、甲氧基苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5時(shí)的化合物5的產(chǎn)率最高，最為經(jīng)濟(jì)。
依據(jù)合成方法1，反應(yīng)溫度控制在70℃，反應(yīng)時(shí)間分別為4小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、14小時(shí)和18小時(shí)，后處理得到的化合物1的產(chǎn)率依次為15％、43％、52％、60％、58％和54％。核磁數(shù)據(jù)顯示產(chǎn)物為化合物5。由此看出，在反應(yīng)溫度為70℃時(shí)，反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)時(shí)化合物5的產(chǎn)率最高。
通過對(duì)上述五種化合物的反應(yīng)條件的比較，包括反應(yīng)溫度，反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)物的摩爾比和溶劑的使用，由產(chǎn)物的收率選擇此類反應(yīng)的優(yōu)化條件為：反應(yīng)溫度70℃，反應(yīng)時(shí)間12小時(shí)，4-羥基香豆素、取代苯胺和丙酮的摩爾比例為1:1:2.5，不包括溶劑。鑒于此，下面的實(shí)施例，就以上述優(yōu)化條件為基礎(chǔ)，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說明。
實(shí)施例6：
2,4,4-三甲基-2-(3-甲氧基苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物6)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為間甲氧基苯胺，獲得化合物6，經(jīng)計(jì)算化合物6的產(chǎn)率58％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.91(dd,j1＝7.9hz,j2＝1.6hz,1h),7.50(dd,j1＝8.7hz,j2＝1.6hz,1h),7.32–7.25(m,2h),7.13(t,j＝8.1hz,1h),6.58(d,j＝8.0hz,2h),6.48(d,j＝8.3hz,1h),4.42(br,1h),3.77(s,3h),2.32–2.11(m,2h),1.84(s,3h),1.66(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.2,160.4,157.0,152.6,144.3,131.4,129.8,123.6,123.1,116.3,116.1,111.5,108.6,106.1,104.9,88.9,55.2,49.8,30.7,28.8,28.5,25.4.esrmsm/z＝366.2[m+h]+.
實(shí)施例7：
2,4,4-三甲基-2-(2-甲氧基苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物7)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為鄰甲氧基苯胺，獲得化合物7，經(jīng)計(jì)算化合物7的產(chǎn)率56％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.92–7.87(m,1h),7.48(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.30–7.24(m,3h),6.88(dd,j1＝6.8hz,j2＝2.2hz,1h),6.84–6.77(m,2h),5.12(br,1h),3.78(s,3h),2.38–2.13(m,2h),1.88(s,3h),1.72(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ161.3,157.1,152.6,148.2,132.8,131.2,123.6,123.1,120.8,119.5,116.7,116.2,109.9,108.8,88.6,55.5,49.9,30.5,29.1,28.1,25.4.esrmsm/z＝366.2[m+h]+.
實(shí)施例8：
2,4,4-三甲基-2-(4-氯苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物8)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為對(duì)氯苯胺，獲得化合物8，經(jīng)計(jì)算化合物8的產(chǎn)率63％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.85(dd,j1＝7.8hz,j2＝1.6hz,1h),7.52(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.33–7.25(m,2h),7.22–7.16(m,2h),6.96–6.89(m,2h),4.38(br,1h),2.26(d,j＝14.6hz,2h),1.79(s,3h),1.65(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.1,156.9,152.6,141.5,131.5,129.0,126.1,123.7,122.9,120.5,116.3,116.0,108.6,88.9,49.6,30.7,28.7,28.6,25.3.esrmsm/z＝370.1[m+h]+.
實(shí)施例9：
2,4,4-三甲基-2-(3-氯苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物9)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為間氯苯胺，獲得化合物9，經(jīng)計(jì)算化合物9的產(chǎn)率60％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.89(dd,j1＝8.2hz,j2＝1.7hz,1h),7.51(td,j1＝7.7hz,j2＝1.6hz,1h),7.35–7.27(m,2h),7.13(t,j＝8.1hz,1h),7.04(t,j＝2.1hz,1h),6.84(td,j1＝8.5hz,j2＝2.0hz,2h),4.45(br,1h),2.30–2.11(m,2h),1.83(s,3h),1.67(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.2,156.8,152.6,144.3,134.7,131.5,130.1,123.8,123.0,120.4,118.3,116.5,116.3,116.0,108.8,88.6,49.7,30.6,28.8,28.4,25.3.esrmsm/z＝370.1[m+h]+.
實(shí)施例10：
2,4,4-三甲基-2-(2-氯苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物10)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為鄰氯苯胺，獲得化合物10，經(jīng)計(jì)算化合物10的產(chǎn)率62％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.90(dd,j1＝8.2hz,j2＝1.7hz,1h),7.53–7.47(m,1h),7.40(dd,j1＝8.3hz,j2＝1.5hz,1h),7.32–7.27(m,3h),7.16(dd,j1＝8.4hz,j2＝1.6hz,1h),6.78(td,j1＝7.7hz,j2＝1.5hz,1h),5.11(br,1h),2.37–2.16(m,2h),1.89(s,3h),1.75(s,3h),1.56(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.1,156.7,152.6,139.7,131.4,129.4,127.4,123.7,122.9,121.7,120.2,117.4,116.3,116.0,109.0,88.1,50.1,30.4,29.1,28.2,25.4.esrmsm/z＝370.1[m+h]+.
實(shí)施例11：
2,4,4-三甲基-2-(4-溴苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物11)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為對(duì)溴苯胺，獲得化合物11，經(jīng)計(jì)算化合物11的產(chǎn)率40％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.84(dd,j1＝7.9hz,j2＝1.6hz,1h),7.52(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.37–7.26(m,5h),6.89(d,j＝8.2hz,2h),4.39(br,1h),2.30–2.10(m,2h),1.80(s,3h),1.65(s,3h),1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:162.3,161.2,156.9,152.6,142.0,131.9,131.5,123.8,123.0,120.6,116.3,116.0,113.2,108.6,88.8,49.6,30.7,28.8,28.4,25.3.esrmsm/z＝414.1[m+h]+.
實(shí)施例12：
2,4,4-三甲基-2-(4-碘苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物12)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為對(duì)碘苯胺，獲得化合物12，經(jīng)計(jì)算化合物12的產(chǎn)率35％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.84(dd,j1＝7.9hz,j2＝1.6hz,1h),7.51(dq,j1＝7.3hz,j2＝1.6hz,3h),7.34–7.27(m,2h),6.80(d,j＝8.2hz,2h),4.34(br,1h),2.31–2.10(m,2h),1.81(s,3h),1.64(s,3h)，1.55(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.1,156.9,152.6,142.7,137.8,131.5,123.8,122.9,120.8,116.3,115.9,108.7,88.7,82.8,49.6,31.6,30.7,28.8,28.5,25.3,22.7.esrmsm/z＝462.1[m+h]+.
實(shí)施例13：
2,4,4-三甲基-2-(2,4-二甲基苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物13)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為2.4-二甲基苯胺，獲得化合物13，經(jīng)計(jì)算化合物13的產(chǎn)率58％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.90(dd,j1＝8.3hz,j2＝1.6hz,1h),7.53–7.46(m,1h),7.32–7.20(m,3h),6.95(d,j＝6.6hz,2h),4.21(br,1h),2.22(d,j＝29.4hz,8h),1.81(s,3h),1.67(s,3h),1.57(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.4,157.4,152.7,138.3,131.3,130.5,127.3,127.0,123.7,123.2,119.7,116.3,108.4,89.8,50.0,30.8,28.8,25.2,20.5,18.1.esrmsm/z＝364.2[m+h]+.
實(shí)施例14：
2,4,4-三甲基-2-(3,5-二甲基苯基氨基)-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮的合成(化合物13)
與實(shí)施例1的合成方法1相同，不同之處在于：取代苯胺為3.5-二甲基苯胺，獲得化合物14，經(jīng)計(jì)算化合物14的產(chǎn)率69％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.90(dd,j1＝7.9hz,j2＝1.6hz,1h),7.50(dd,j1＝8.6hz,j2＝1.6hz,1h),7.33–7.24(m,2h),6.61(m,j＝29.9hz,3h),4.33(br,1h),2.29–2.12(m,8h),1.82(s,3h),1.66(s,3h),1.54(s,3h).13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:161.3,157.1,152.7,138.7,131.3,123.5,123.1,122.9,117.3,116.3,116.2,108.7,89.2,49.7,30.7,28.8,28.5,25.4,21.4.esrmsm/z＝364.2[m+h]+.
實(shí)施例15：
2,4,4-三甲基-2-取代苯基氨基-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的乙酰膽堿酯酶抑制活性
2,4,4-三甲基-2-取代苯基氨基-3,4-二氫吡喃[3,2-c]色烯-5-酮類化合物的體外乙酰膽堿酯酶抑制活性測(cè)試方法，參考如下三篇文獻(xiàn)完成：
1、周金林，以生物堿為母體進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾的新藥研究.中山大學(xué)博士畢業(yè)論文，2004.
2、ellmangl,courtneydk,andresv,featherstonerm.anewandrapidcolorimetricdeterminationofacetylcholinesteraseactivity.biochem.pharmacol.1961,7:88-95.
3、massouliej,bons,silmani.structureandfunctionsofacetylcholinesteraseandbutyrylcholinesterase.prog.brainres.1993,98:139-146.
具體的測(cè)試方法如下：
溶液的配制:
(1)0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖溶液：用移液管移取6.4ml1mkh2po4，94.0mlk2hpo4至1000ml容量瓶中，后用蒸餾水稀釋，定容至1000ml。
(2)乙酰膽堿酯酶溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配)：稱取0.10mg乙酰膽堿酯酶用0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖液溶解，定容至1.0ml。
(3)2mg/ml硫代乙酰膽堿溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配)：稱取2.0mg硫代乙酰膽堿用0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖液溶解，定容至1.0ml。
(4)4mg/ml5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(現(xiàn)用現(xiàn)配)：稱取4.0mg5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)用0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖液溶解，定容至1.0ml。
(5)1.0mm樣品dmso溶液：稱取一定量待測(cè)分析樣品用dmso溶解，定容。
化合物對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制活性分析
以硫代乙酰膽堿為底物，化學(xué)標(biāo)記的5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)為顯色劑，在0.1cm比色皿中測(cè)定樣品對(duì)ache抑制活性。其反應(yīng)式為：
acetylthiocholine+h2o+ache→acetyrate+thiochline
thiocholine+5,5'-thiobis-2-nitrobenzoicacid→5-thio-2-nitrobenzoicacid
硫代乙酰膽堿被乙酰膽堿酯酶水解后，產(chǎn)生的硫代膽堿，能與5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)反應(yīng)，生成的5-硫-2-硝基苯甲酸可在412nm處產(chǎn)生紫外吸收。
取5支1.5ml分別裝有840μl0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖液的梨型管，依次加入0，5μl，10μl，20μl，40μl，50μl的上述步驟配制的濃度的樣品dmso溶液，并用dmso加至890μl。分別加入50μl4mg/ml5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和10μl乙酰膽堿酯酶溶液，并在37℃保溫15分鐘，立刻加入50μl2mg/ml硫代乙酰膽堿溶液，搖勻后測(cè)其在λ＝412nm處的a值(an)。參比用0.1mph＝8.0磷酸鹽緩沖液，以未加樣品所測(cè)得的acontrol值作為100個(gè)活力單位：
然后以酶的相對(duì)活力對(duì)抑制劑濃度作圖，根據(jù)抑制曲線求得各種化合物的ic50值(抑制酶活力50％時(shí)的抑制劑濃度)。
由上述方法測(cè)定獲得目標(biāo)產(chǎn)物的ic50值(μm)，列于表2。
表2化合物對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制活性據(jù)(ic50值，μm)
注：a由于溶解度的問題，其活性很差，沒有測(cè)試。
從表2可以看出，這類化合物具有一定程度的乙酰膽堿酯酶抑制活性。該合成方法為一步反應(yīng)便可提供結(jié)構(gòu)復(fù)雜而新穎的化合物，可以通過該合成方法，制備出所希望的初步結(jié)構(gòu)骨架，再進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，獲得計(jì)劃合成的化合物，有望進(jìn)一步提高其活性。所以該合成方法以及所涉及的這類骨架結(jié)構(gòu)的化合物具有潛在的藥物研發(fā)價(jià)值。
以上實(shí)施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的技術(shù)方案及其核心思想，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。