專利名稱：一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法
技術領域：
本發明涉及一種藏藥組合物制劑的質量檢測方法，特別涉及一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法。
背景技術：
解毒膠囊源于藏醫典籍《甘露庫》，是藏醫治療各種中毒癥的良方。收載于中成藥地方標準上升國家標準部分，標準編號WS-10537 (ZD-0537)-2002。解毒膠囊由馬錢子(制)、紅花、鐵粉(制)、人工牛黃、商陸、干松、草果、翼首草等35味藥組成的，具有消熱解毒，祛腐生肌的作用。用于各種毒癥，陳舊熱病，某些接觸性皮炎等。
解毒膠囊含有馬錢子類毒性藥材，其毒性成分主要為生物堿類成分，具有通絡止痛，散結消腫的功效，但是服用過量可能引起中毒，甚至死亡等各種不良反應，不宜過多服用或久服。同時處方中含有鐵粉，《開寶本草》記載鐵粉具有安心神，堅骨髓，潤肌膚等作用。鐵為人體的微量元素，具有促進紅細胞生成等重要作用。藏藥組合物解毒膠囊及其制劑處方中所用鐵粉是通過炮制后進行入藥，更加有利于吸收。但是鐵攝入過多可能造成急性鐵中毒，危害人體健康。解毒膠囊原質量標準只有膽酸薄層鑒別、沒食子酸含量測定項，未對馬錢子中毒性成分生物堿，鐵粉含量進行質量控制，使該制劑存在安全隱患。

發明內容
針對現有技術的不足，本發明的目的是提供一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法。發明概述本發明提供了一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑中馬錢子中士的寧和馬錢子堿、鐵粉中鐵含量的控制方法，人工牛黃中膽酸、紅花中羥基紅花黃色素A的含量測定方法，確保士的寧、馬錢子堿及鐵含量均不過量，使該制劑在治療疾病的同時，保證了用藥的安全有效。術語說明解毒膠囊是國家中成藥標準匯編(中成藥地方標準上升國家標準部分)記載的藥品名稱。解毒膠囊及其制劑包括用解毒膠囊原料藥配方制備的其他制劑，包括解毒膠囊。各原料藥的配比可以與解毒膠囊配比相同，也可以在藥效范圍內適當調整。馬錢子(制)、硼砂(制)、珍珠(制)、青金石(制)、松石(制)、鐵粉(制)、響銅(制)、石花(制)，是藏藥的常規技術用語，括號中的“制”均按照《青海省藏藥炮制規范》(青海省食品藥品監督管理局編，青海人民出版社出版的2010年版)里的方法炮制。為實現上述目的，本發明采用下述技術方案一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法，該制劑的原料藥組成為動物寶、蔓菁膏、蚓果芥、馬錢子(制)、水柏枝、硼砂(制)、珍珠(制)、珊瑚、青金石(制)、松石(制)、鐵粉(制)、響銅(制)、石花(制)、巖精膏、肉豆蘧、草果、天竺黃、紅花、丁香、訶子、商陸、檀香、紫檀香、麝香、人工牛黃、輪葉棘豆、石菖蒲、豆蘧、翼首草、川西小黃菊、骨碎補、甘松、扁葉珊瑚盤、白花龍膽、蘚生馬先蒿，其特征是，質量檢測方法包括如下含量測定方法中的一種或幾種A.馬錢子的含量測定分別取士的寧對照品、馬錢子堿對照品為對照，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與
O.02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)為流動相；檢測波長為250-270nm的高效液相色譜法；B.鐵粉的含量測定將待測定的中藥制劑灰化后，用濃鹽酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化錫溶液將Fe3+還原為Fe2+，溶液變為淡紅色，然后以二苯胺磺酸鈉為指示齊U，用重鉻酸鉀標準溶液滴定至溶液呈紫色即為終點，以已知的重鉻酸鉀標準溶液的量計 算鐵粉的含量；C.紅花的含量測定取羥基紅花花色素A對照品加體積份數比25%甲醇水溶液配制成對照品溶液，取待檢測制劑加入體積份數比25%甲醇水溶液經超聲溶解、除雜后配制成供試品溶液，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20-30:80-70的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相，檢測波長為400-410nm的高效液相色譜法；D.人工牛黃的含量測定取膽酸對照品加甲醇配制成對照品溶液，取待檢測制劑加入甲醇經超聲溶解、除雜后配制成供試品溶液，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比80-70:20-30的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相，蒸發光散射檢測器的高效液相色譜法。作為本發明的進一步改進，所述馬錢子的含量測定具體步驟為照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)為流動相；檢測波長為250-270nm ;理論板數按士的寧峰計算應不低于5000 ；對照品溶液的制備取士的寧對照品6mg、馬錢子堿對照品3mg,精密稱定,分別置IOOml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含士的寧12 μ g，馬錢子堿6 μ g);供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末10_14g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液10ml，混勻，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，置水浴中回流提取2小時，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，分取三氯甲烷液，用鋪有少量無水硫酸鈉的濾紙濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各5-10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。作為本發明的進一步改進，所述鐵粉的含量測定方法具體步驟為取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末6 10g，精密稱定，將盛有樣品的坩堝置電爐上緩緩熾燒，熾灼至供試品全部炭化，呈黑色，并不再冒煙，放冷至室溫；滴加質量百分濃度95%-98%濃硫酸O. 5-2ml，使炭化物全部濕潤，繼續加熱至蒸汽除盡，白煙冒盡，于500-700°C熾灼3-5小時，放冷，用50ml質量百分濃度36%_38%濃鹽酸分次洗滌移至250ml具塞錐形瓶中，在60-70°C左右加熱溶解3-5小時，冷卻后將溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml，置250ml錐形瓶中，加入質量百分濃度36%_38%濃鹽酸0_15ml，加熱至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁熱邊搖邊滴加重量百分濃度5% 二氯化錫溶液至溶液變為淡粉色，若搖動后粉色褪去，可補加I滴甲基橙至溶液呈現穩定的淡粉色，迅速用冷水冷卻至室溫后，加入蒸餾水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸鈉指示液15滴，立即用重鉻酸鉀滴 定液(O. 002mol/l)滴定。每Iml重鉻酸鉀滴定液(O. 002mol/l)相當于O. 6702mg的鐵。作為本發明的進一步改進，所述紅花的具體步驟為照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20-30:80-70的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相；檢測波長為400_410nm ;理論板數按羥基紅花黃色素A峰計算應不低于3000 ；對照品溶液的制備取羥基紅花花色素A對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，力口體積份數比25%甲醇水溶液制成每Iml含6-10 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末4_6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，稱定重量，超聲40分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數比25%甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各5-10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。作為本發明的進一步改進，所述人工牛黃含量測定的具體步驟為照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比80-70:20-30的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相；蒸發光散射檢測器；理論板數按膽酸峰計算應不低于5000 ；對照品溶液的制備精密稱取膽酸對照品適量，加甲醇制成每Iml含O. 4-0. 5mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末6_8g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇40-60ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液20-30ml，40°C以下減壓回收，轉移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液10 μ 1、20 μ 1，供試品溶液10 μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。本發明優選下面原料藥組成的解毒膠囊及其制劑動物寶4. O重量份、蔓菁膏4. O重量份、蚓果芥30. 4重量份、馬錢子(制)I. 6重量份、水柏枝30. 4重量份、硼砂(制)O. 8重量份、珍珠(制)3. 2重量份、珊瑚I. 6重量份、青金石(制)1. 6重量份、松石(制)1. 6重量份、鐵粉(制)2. 4重量份、響銅(制)O. 8重量份、石花(制)O. 8重量份、巖精膏4. O重量份、肉豆蘧I. 6重量份、草果I. 6重量份、天竺黃I. 6重量份、紅花I. 6重量份、丁香I. 6重量份、訶子2. 4重量份、商陸I. 6重量份、檀香30. 4重量份、紫檀香27. 9重量份、磨香I. 6重量份、人工牛黃2. 4重量份、輪葉棘丑30. 4重量份、石菖蒲I. 6重量份、丑蘧I. 6重量份、翼首草30. 4重量份、川西小黃菊30. 4重量份、骨碎補3. 2重量份、甘松I. 6重量份、扁葉珊瑚盤30. 4重量份、白花龍膽30. 4重量份、蘚生馬先蒿30. 4重量份。對于上述優選制劑，所述質量檢測方法是A.馬錢子的含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20:80的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數 比10%磷酸調節pH值2. 8)為流動相；檢測波長為260nm ;理論板數按士的寧峰計算應不低于 5000 ；對照品溶液的制備取士的寧對照品6mg、馬錢子堿對照品3mg,精密稱定,分別置IOOml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含士的寧12 μ g，馬錢子堿6 μ g);供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末12g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液10ml，混勻，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，置水浴中回流提取2小時，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，分取三氯甲烷液，用鋪有少量無水硫酸鈉的濾紙濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。B.鐵粉的含量測定取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末Sg，精密稱定，將盛有樣品的坩堝置電爐上緩緩熾燒，熾灼至供試品全部炭化，呈黑色，并不再冒煙，放冷至室溫；滴加質量百分濃度95%-98%濃硫酸1ml，使炭化物全部濕潤，繼續加熱至蒸汽除盡，白煙冒盡，于600°C熾灼4小時，放冷，用50ml質量百分濃度36%-38%濃鹽酸分次洗滌移至250ml具塞錐形瓶中，在65°C左右加熱溶解4小時，冷卻后將溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml，置250ml錐形瓶中，加入質量百分濃度36%-38%濃鹽酸5ml，加熱至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁熱邊搖邊滴加重量百分濃度5% 二氯化錫溶液至溶液變為淡粉色，若搖動后粉色褪去，可補加I滴甲基橙至溶液呈現穩定的淡粉色，迅速用冷水冷卻至室溫后，加入蒸餾水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸鈉指示液15滴，立即用重鉻酸鉀滴定液(0.002mol/l)滴定。每Iml重鉻酸鉀滴定液(O. 002mol/l)相當于O. 6702mg的鐵。C.紅花的含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比25:75的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相；檢測波長為403nm ;理論板數按羥基紅花黃色素A峰計算應不低于3000 ；對照品溶液的制備取羥基紅花花色素A對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，力口體積份數比25%甲醇水溶液制成每Iml含8 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數比25%甲醇水溶液25ml，密塞，稱定重量，超聲40分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數比25%甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得;測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即
得。 D.人工牛黃的含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比76:24的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相；蒸發光散射檢測器；理論板數按膽酸峰計算應不低于5000 ；對照品溶液的制備精密稱取膽酸對照品適量，加甲醇制成每Iml含O. 45mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末7g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液25ml，40°C以下減壓回收，轉移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液10 μ 1、20 μ 1，供試品溶液10 μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。在對優選制劑的質量檢測方法中，所述馬錢子含量中馬錢子含量以士的寧(C31H22N2O2)計，應為 O. 043mg/g-0. 080mg/g ;以馬錢子堿(C23H26N2O1)計，不得少于 O. 028mg/go所述鐵粉的含量測定中鐵含量為O. 409mg/g-0. 682mg/g。所述紅花含量測定中紅花含量以羥基紅花黃色素A (C27H3tlO15)計，不得少于O. 027mg/g。所述人工牛黃含量測定中人工牛黃含量以膽酸(C24H40O5)計，不得少于 O. 252mg/g。本說明書中所述的重量份與體積份的單位對應關系為g/ml或kg/1。為了保證患者用藥安全有效，原標準亟待需要進行提高，對解毒膠囊中馬錢子含有的毒性成分生物堿進行含量控制，對鐵粉中鐵的含量進行全面控制，同時增加有效成分膽酸、羥基紅花黃色素A的含量測定。本發明公開了一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法，對馬錢子中士的寧和馬錢子堿含量、鐵粉中鐵含量進行了質量控制，對人工牛黃中膽酸、紅花中羥基紅花黃色素A進行了定量檢測，既保證了藥效又保證不至于服用過多造成健康隱患，提高了產品質量，確保了產品安全、穩定、質量可控。同時本法還可用于藏藥組合物解毒膠囊的其他制劑，如解毒顆粒、解毒丸、解毒片等。下述實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發明。實驗例I :馬錢子的含量測定實驗
I.儀器、試藥和供試樣品儀器L_2100型日立高效液相色譜儀，Auff220D型島津電子分析天平。對照品士的寧對照品(中國藥品生物制品檢定所)，批號110705-200306 ;馬錢子堿對照品(中國藥品生物制品檢定所)，批號110706-200505。樣品解毒膠囊(青海金訶藏藥藥業股份有限公司提供)，批號20100701、20100702,20100703ο2.檢測波長的選擇取士的寧、馬錢子堿混合對照品溶液，于190_400nm波長范圍內進行掃描，根據紫外吸收圖譜，選定260nm為檢測波長。
3.流動相選擇選擇乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)為流動相。分別考察了乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)不同體積比例為流動相時的分離效果，體積份數比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與
O.02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)為流動相時均可達到較好分離效果，且乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液(用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8)體積份數比為20:80時，士的寧峰保留時間為21min,馬錢子堿峰保留時間為17min,分離效果最好。4.系統適用性及陰性干擾試驗在上述色譜條件下，分別精密吸取混合對照溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明，混合對照品、供試品色譜中士的寧、馬錢子堿與其相鄰色譜峰的分離度均大于I. 5，陰性對照溶液在士的寧、馬錢子堿出峰位置無干擾。結果見圖I、圖2和圖3。5.混合對照品制備取士的寧對照品6mg、馬錢子堿對照品3mg,精密稱定,分別置IOOml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含士的寧12 μ g，馬錢子堿6 μ g)。6.供試品制備6. I提取溶劑量的考察按含量測定項下方法對供試品溶液進行檢測。按供試品溶液的制備項下的方法制備3份，分別精密加入三氯甲烷20ml、25ml、50ml。以每克藥品中士的寧、馬錢子堿的含量為指標確定加入三氯甲烷量。結果見表I。表I提取溶劑量考察試驗結果
權利要求
1.一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法，該制劑的原料藥組成為動物寶、蔓菁膏、蝴果芥、制馬錢子、水柏枝、制硼砂、制珍珠、珊瑚、制青金石、制松石、制鐵粉、制響銅、制石花、巖精膏、肉豆蘧、草果、天竺黃、紅花、丁香、訶子、商陸、檀香、紫檀香、麝香、人工牛黃、輪葉棘豆、石菖蒲、豆蘧、翼首草、川西小黃菊、骨碎補、甘松、扁葉珊瑚盤、白花龍膽、蘚生馬先蒿，其特征是，質量檢測方法包括如下含量測定方法中的一種或幾種 A.馬錢子的含量測定分別取士的寧對照品、馬錢子堿對照品為對照，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液并用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8為流動相；檢測波長為250-270nm的高效液相色譜法； B.鐵粉的含量測定將待測定的中藥制劑灰化后，用濃鹽酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化錫溶液將Fe3+還原為Fe2+，溶液變為淡紅色，然后以二苯胺磺酸鈉為指示劑，用重鉻酸鉀標準溶液滴定至溶液呈紫色即為終點，以已知的重鉻酸鉀標準溶液的量計算鐵粉的含量； C.紅花的含量測定取羥基紅花花色素A對照品加體積份數比25%甲醇水溶液配制成對照品溶液，取待檢測制劑粉末加入體積份數比25%甲醇水溶液經超聲溶解、除雜后配制成供試品溶液，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20-30:80-70的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相，檢測波長為400-410nm的高效液相色譜法； D.人工牛黃的含量測定取膽酸對照品加甲醇配制成對照品溶液，取待檢測制劑粉末加入甲醇經超聲溶解、除雜后配制成供試品溶液，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比80-70:20-30的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相，蒸發光散射檢測器的高效液相色譜法。
2.如權利要求I所述的質量檢測方法，其特征是，所述馬錢子的含量測定具體步驟為 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液并用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8為流動相；檢測波長為250-270nm ;理論板數按士的寧峰計算應不低于5000 ； 對照品溶液的制備取士的寧對照品6mg、馬錢子堿對照品3mg,精密稱定，分別置IOOml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得； 供試品溶液的制備取待檢測制劑粉末10_14g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液10ml，混勻，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，置水浴中回流提取2小時，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，分取三氯甲烷液，用鋪有少量無水硫酸鈉的濾紙濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各5-10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
3.如權利要求I所述的質量檢測方法，其特征是，所述鐵粉的含量測定方法具體步驟為 取待檢測制劑粉末6 10g，精密稱定，將盛有樣品的坩堝置電爐上緩緩熾燒，熾灼至供試品全部炭化，呈黑色，并不再冒煙，放冷至室溫；滴加質量百分濃度95%-98%濃硫酸O.5-2ml，使炭化物全部濕潤，繼續加熱至蒸汽除盡，白煙冒盡，于500-700°C熾灼3_5小時，放冷，用50ml質量百分濃度36%-38%濃鹽酸分次洗滌移至250ml具塞錐形瓶中，在60_70°C左右加熱溶解3-5小時，冷卻后將溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml，置250ml錐形瓶中，加入質量百分濃度36%-38%濃鹽酸0-15ml，加熱至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁熱邊搖邊滴加重量百分濃度5% 二氯化錫溶液至溶液變為淡粉色，若搖動后粉色褪去，可補加I滴甲基橙至溶液呈現穩定的淡粉色，迅速用冷水冷卻至室溫后，加入蒸餾水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸鈉指示液15滴，立即用O. 002mol/l重鉻酸鉀液滴定滴定。
4.如權利要求I所述的質量檢測方法，其特征是，所述紅花的具體步驟為 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20-30:80-70的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相；檢測波長為400_410nm ;理論板數按羥基紅花黃色素A峰計算應不低于3000 ； 對照品溶液的制備取羥基紅花花色素A對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，加體積份數比25%甲醇水溶液制成每Iml含6-10 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取待檢測制劑粉末4-6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，稱定重量，超聲40分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數比25%甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得； 測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各5-10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
5.如權利要求I所述的質量檢測方法，其特征是，所述人工牛黃含量測定的具體步驟為 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比80-70:20-30的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相；蒸發光散射檢測器；理論板數按膽酸峰計算應不低于5000 ； 對照品溶液的制備精密稱取膽酸對照品適量，加甲醇制成每Iml含O. 4-0. 5mg的溶液，即得； 供試品溶液的制備取待檢測制劑粉末6-8g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇40-60ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液20-30ml，40°C以下減壓回收，轉移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，濾過，取續濾液，即得； 測定法分別精密吸取對照品溶液10μ 1、20μ 1，供試品溶液10 μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
6.如權利要求I所述的質量檢測方法，其特征是，所述制劑的原料藥組成為動物寶4.O重量份、蔓菁膏4. O重量份、蚓果芥30. 4重量份、制馬錢子I. 6重量份、水柏枝30. 4重量份、制硼砂O. 8重量份、制珍珠3. 2重量份、珊瑚I. 6重量份、制青金石I. 6重量份、制松石I. 6重量份、制鐵粉2. 4重量份、制響銅O. 8重量份、制石花O. 8重量份、巖精膏4. O重量份、肉豆蘧I. 6重量份、草果I. 6重量份、天竺黃I. 6重量份、紅花I. 6重量份、丁香I. 6重量份、訶子2. 4重量份、商陸I. 6重量份、檀香30. 4重量份、紫檀香27. 9重量份、磨香I. 6重量份、人工牛黃2. 4重量份、輪葉棘丑30. 4重量份、石菖蒲I. 6重量份、丑蘧I. 6重量份、翼首草30. 4重量份、川西小黃菊30. 4重量份、骨碎補3. 2重量份、甘松I. 6重量份、扁葉珊瑚盤30. 4重量份、白花龍膽30. 4重量份、蘚生馬先蒿30. 4重量份。
7.如權利要求6所述的質量檢測方法，其特征是，所述質量檢測方法是 A.馬錢子的含量測定 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比20:80的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸鈉與O. 02mol/l磷酸二氫鉀等量混合溶液并用體積份數比10%磷酸調節pH值2. 8為流動相；檢測波長為260nm ;理論板數按士的寧峰計算應不低于 5000 ； 對照品溶液的制備取士的寧對照品6mg、馬錢子堿對照品3mg,精密稱定，分別置IOOml量瓶中，加三氯甲烷適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得； 供試品溶液的制備取待檢測制劑粉末12g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液10ml，混勻，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，置水浴中回流提取2小時，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，分取三氯甲烷液，用鋪有少量無水硫酸鈉的濾紙濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得； 測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，測定，即得； B.鐵粉的含量測定 取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末Sg，精密稱定，將盛有樣品的坩堝置電爐上緩緩熾燒，熾灼至供試品全部炭化，呈黑色，并不再冒煙，放冷至室溫；滴加質量百分濃度95%-98%濃硫酸Iml，使炭化物全部濕潤，繼續加熱至蒸汽除盡，白煙冒盡，于600°C熾灼4小時，放冷，用50ml質量百分濃度36%-38%濃鹽酸分次洗滌移至250ml具塞錐形瓶中，在65°C左右加熱溶解4小時，冷卻后將溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml，置250ml錐形瓶中，加入質量百分濃度36%-38%濃鹽酸5ml，加熱至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁熱邊搖邊滴加重量百分濃度5% 二氯化錫溶液至溶液變為淡粉色，若搖動后粉色褪去，則補加I滴甲基橙至溶液呈現穩定的淡粉色，迅速用冷水冷卻至室溫后，加入蒸餾水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸鈉指示液15滴，立即用O. 002mol/l重鉻酸鉀滴定液滴定； C.紅花的含量測定 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比25:75的甲醇-體積份數比O. 5%甲酸水溶液為流動相；檢測波長為403nm ;理論板數按羥基紅花黃色素A峰計算應不低于3000 ； 對照品溶液的制備取羥基紅花花色素A對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，加體積份數比25%甲醇水溶液制成每Iml含8 μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取藏藥組合物解毒膠囊內容物或制劑粉末5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數比25%甲醇水溶液25ml，密塞，稱定重量，超聲40分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數比25%甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別吸取對照品溶液和供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，測定，即得； D.人工牛黃的含量測定 照高效液相色譜法測定； 色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數比76:24的甲醇-體積份數比1%冰醋酸水溶液為流動相；蒸發光散射檢測器；理論板數按膽酸峰計算應不低于5000 ； 對照品溶液的制備精密稱取膽酸對照品適量，加甲醇制成每Iml含O. 45mg的溶液，SP得; 供試品溶液的制備取待檢測制劑粉末7g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液25ml，40°C以下減壓回收，轉移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，濾過，取續濾液，即得； 測定法分別精密吸取對照品溶液10μ 1、20μ 1，供試品溶液10 μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數方程計算，即得。
8.如權利要求7所述的質量檢測方法，其特征是，所述馬錢子含量中馬錢子含量以士的寧(C31H22N2O2)計，應為 O. 043mg/g-0. 080mg/g ;以馬錢子堿(C23H26N2O1)計，不得少于O.028mg/g ;所述鐵粉的含量測定中鐵含量為O. 409mg/g-0. 682mg/g ;所述紅花含量測定中紅花含量以羥基紅花黃色素A (C27H30O15)計，不得少于O. 027mg/g ;所述人工牛黃含量測定中人工牛黃含量以膽酸(C24H4tlO5)計，不得少于O. 252mg/g。
全文摘要
本發明公開了一種藏藥組合物解毒膠囊及其制劑的質量檢測方法，采用高效液相色譜法(HPLC法)對馬錢子中士的寧和馬錢子堿進行了含量控制，使用滴定法對鐵粉中鐵含量進行了含量控制，同時使用高效液相色譜法對人工牛黃中膽酸、紅花中羥基紅花黃色素A進行了定量檢測，既保證了藥效又保證不至于服用過多造成健康隱患，提高了產品質量，確保了產品安全、穩定、質量可控。
文檔編號G01N21/78GK102879495SQ20121036550
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月27日 優先權日2012年9月27日
發明者馬振元, 陳芹利, 任松鵬, 王海蘋, 董玉波 申請人:山東阿如拉藥物研究開發有限公司