本發(fā)明屬于疾病輔助診斷標(biāo)志物，尤其是涉及cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途。

背景技術(shù)：

1、重癥肌無(wú)力（myasthenia?gravis,?mg）是一種自身抗體攻擊神經(jīng)肌肉接頭的自身免疫病，表現(xiàn)為波動(dòng)性骨骼肌無(wú)力和易疲勞，重者累及呼吸肌甚至危及生命，導(dǎo)致部分青壯年患者喪失勞動(dòng)能力。隨著人口老齡化和診療技術(shù)的提高，過(guò)去70年內(nèi)mg的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)逐步攀升。2020年一項(xiàng)對(duì)全國(guó)1665家三級(jí)醫(yī)院住院患者的調(diào)查顯示，我國(guó)mg發(fā)病率約為0.68/10萬(wàn)，由于該調(diào)查并未納入門診患者，因此實(shí)際發(fā)病率可能遠(yuǎn)高于此。2022中國(guó)mg患者健康報(bào)告紅皮書顯示，我國(guó)青年群體mg發(fā)病率高，多種因素可導(dǎo)致病情反復(fù)，給社會(huì)及患者帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。然而，mg患者發(fā)病機(jī)制的始動(dòng)環(huán)節(jié)并不完全清楚，目前認(rèn)為可能與胸腺內(nèi)固有免疫激活形成慢性炎癥環(huán)境有關(guān)。而慢性炎癥環(huán)境被認(rèn)為是th細(xì)胞失衡及treg功能障礙的重要始動(dòng)因素，同時(shí)th1/th2和/th17/treg比例失衡及功能紊亂維持了胸腺內(nèi)的慢性炎癥環(huán)境，促進(jìn)致病性抗體achr的自身敏化和產(chǎn)生。近年來(lái)，血小板在固有免疫中的研究不斷涌現(xiàn)，逐漸被視為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。

2、cd62p，也稱為p-選擇素或gmp?140，是粘附分子的選擇素家族的成員，一種細(xì)胞表面糖蛋白?；罨难“鍟?huì)將最初存在于細(xì)胞質(zhì)顆粒中的?p?選擇素重新定位到其表面，因此可以用來(lái)表征活化血小板（cd62p陽(yáng)性血小板，cd62p-positive?platelets）。中性粒細(xì)胞周圍的血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，即血小板-中性粒細(xì)胞聚集體（platelet?neutrophilaggregates,?pnas）是全血中血小板選擇性粘附中性粒細(xì)胞的特征。

3、mg臨床表現(xiàn)具有極大異質(zhì)性，全身骨骼肌均可受累，表現(xiàn)為波動(dòng)性無(wú)力和易疲勞性，癥狀呈“晨輕暮重”，活動(dòng)后加重、休息后可減輕。在具有典型mg臨床特征（波動(dòng)性肌無(wú)力）的基礎(chǔ)上，藥理學(xué)檢查（新斯的明試驗(yàn)呈陽(yáng)性）、電生理檢查（重復(fù)神經(jīng)電刺激及單纖維肌電圖）及血清抗achr等抗體檢測(cè)（約50%~60%的omg、85%~90%的gmg血清中可檢測(cè)到achr抗體，在10%~20%的achr抗體陰性mg患者血清中可檢測(cè)到musk抗體；7%~33%的achr、musk抗體陰性mg患者中可檢測(cè)出lrp4抗體）滿足一項(xiàng)異常即可輔助診斷，同時(shí)需排除其他疾病。所有確診mg患者需進(jìn)一步完善胸腺影像學(xué)檢查（縱隔ct或mri），進(jìn)一步行亞組分類。

4、然而，mg發(fā)病率較低，近80%的患者以單純眼肌癥狀起病，早期易漏診、誤診。對(duì)于一些臨床表現(xiàn)不典型，抗體檢測(cè)及電生理檢查結(jié)果無(wú)顯著異常的患者，輔助診斷常常較困難。

5、本領(lǐng)域現(xiàn)有技術(shù)尚未見采用cd62p或pnas輔助診斷重癥肌無(wú)力的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、出于填補(bǔ)本領(lǐng)域現(xiàn)有技術(shù)上述技術(shù)空白以及開發(fā)cd62p或pnas輔助診斷用途的目的，本發(fā)明提供cd62p和/或pnas作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途。

4、cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途。

5、所述重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑包括檢測(cè)cd62p的試劑和/或檢測(cè)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體的試劑。

6、所述檢測(cè)cd62p的試劑指檢測(cè)受試者體內(nèi)cd62p水平或含量的試劑；

7、優(yōu)選地，所述檢測(cè)受試者體內(nèi)cd62p水平或含量的試劑包括：抗人?cd61/cd41?抗體、抗人?cd62p抗體。

8、所述檢測(cè)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體的試劑指檢測(cè)受試者體內(nèi)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體水平或含量的試劑；

9、優(yōu)選地，所述檢測(cè)受試者體內(nèi)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體水平或含量的試劑包括：抗人?cd61/cd41?抗體。

10、重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑，其包括：檢測(cè)標(biāo)志物的試劑；所述標(biāo)志物選自：cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體。

11、所述檢測(cè)標(biāo)志物的試劑包括：檢測(cè)cd62p在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑和/或檢測(cè)pnas在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑。

12、檢測(cè)cd62p在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑包括：抗人?cd61/cd41?抗體、抗人cd62p抗體。

13、優(yōu)選地，檢測(cè)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑包括：抗人?cd61/cd41?抗體。

14、優(yōu)選地，所述輔助診斷包括：早期篩查、預(yù)警、臨床輔助診斷。

15、一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)，其包括：數(shù)據(jù)主路上依次連接的檢測(cè)單元和計(jì)算分析單元；所述檢測(cè)單元檢測(cè)標(biāo)志物陽(yáng)性的細(xì)胞個(gè)數(shù)并將標(biāo)志物陽(yáng)性的細(xì)胞個(gè)數(shù)輸出至計(jì)算分析單元?；所述計(jì)算分析單元計(jì)算標(biāo)志物cd62p陽(yáng)性的血小板細(xì)胞個(gè)數(shù)占外周血總血小板個(gè)數(shù)的百分比＜8.9%和/或標(biāo)志物血小板-中性粒細(xì)胞聚集體占外周血總中性粒細(xì)胞數(shù)的百分比＜4.29%時(shí)輸出第一數(shù)據(jù)支路；所述計(jì)算分析單元計(jì)算標(biāo)志物cd62p陽(yáng)性血小板細(xì)胞個(gè)數(shù)占外周血總血小板個(gè)數(shù)的百分比≥8.9%和/或標(biāo)志物血小板-中性粒細(xì)胞聚集體個(gè)數(shù)占外周血總中性粒細(xì)胞的百分比≥4.29%時(shí)輸出至主路下游。

16、所述的一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)，其還包括：設(shè)置在主路上分析單元下游的陰性報(bào)告輸出單元；

17、優(yōu)選地，所述檢測(cè)單元還檢測(cè)外周血總血小板個(gè)數(shù)及外周血總中性粒細(xì)胞數(shù)并將外周血總血小板個(gè)數(shù)及外周血總中性粒細(xì)胞數(shù)輸出至計(jì)算分析單元；

18、優(yōu)選地，所述的一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)還包括：與第一數(shù)據(jù)支路連接的陽(yáng)性報(bào)告輸出單元；

19、優(yōu)選地，所述數(shù)據(jù)主路、第一數(shù)據(jù)支路均為數(shù)據(jù)通路。

20、本發(fā)明具有如下突出的有益效果：

21、本發(fā)明在臨床搜集的若干重癥肌無(wú)力患者和健康人群中進(jìn)行了標(biāo)志物的篩選，發(fā)現(xiàn)存在水平差異的物質(zhì)中包括cd62p、pnas，cd62p陽(yáng)性血小板和pnas比例在mg患者中顯著升高，與重癥肌無(wú)力疾病的活動(dòng)密切相關(guān)，同時(shí)經(jīng)roc曲線驗(yàn)證這兩類物質(zhì)適于作為候選的輔助診斷標(biāo)志物，因此本發(fā)明提供cd62p和/或pnas作為重癥肌無(wú)力（mg）輔助診斷標(biāo)志物的用途。本發(fā)明還基于cd62p陽(yáng)性血小板、pnas這兩種輔助診斷標(biāo)志物提供cd62p和/或pnas在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途，并提供重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)，該系統(tǒng)通過(guò)監(jiān)控患者血液中cd62p陽(yáng)性血小板和/或pnas比例輔助診斷重癥肌無(wú)力，其中pnas比例能夠評(píng)估其嚴(yán)重程度。本發(fā)明的輔助診斷標(biāo)志物及輔助診斷系統(tǒng)法能夠?yàn)閙g的早期輔助診斷和疾病監(jiān)控提供重要的參考依據(jù)，提高臨床輔助診斷的準(zhǔn)確性和效率。

技術(shù)特征：

1.cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途。

2.?cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途，其特征在于，所述重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑包括檢測(cè)cd62p的試劑和/或檢測(cè)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體的試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途，其特征在于，所述檢測(cè)cd62p的試劑指檢測(cè)受試者體內(nèi)cd62p水平或含量的試劑；

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途，其特征在于，所述檢測(cè)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體的試劑指檢測(cè)受試者體內(nèi)血小板-中性粒細(xì)胞聚集體水平或含量的試劑；

6.重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑，其特征在于，包括：檢測(cè)標(biāo)志物的試劑；所述標(biāo)志物選自：cd62p和/或血小板-中性粒細(xì)胞聚集體。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑，其特征在于，所述檢測(cè)標(biāo)志物的試劑包括：檢測(cè)cd62p在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑和/或檢測(cè)pnas在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑。

8.?根據(jù)權(quán)利要求7所述的重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑，其特征在于，檢測(cè)cd62p在受試者體內(nèi)的含量或水平的試劑包括：抗人?cd61/cd41?抗體、抗人?cd62p抗體；

9.?一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)，其特征在于，包括：數(shù)據(jù)主路上依次連接的檢測(cè)單元和計(jì)算分析單元；所述檢測(cè)單元檢測(cè)標(biāo)志物陽(yáng)性的細(xì)胞個(gè)數(shù)并將標(biāo)志物陽(yáng)性的細(xì)胞個(gè)數(shù)輸出至計(jì)算分析單元?；所述計(jì)算分析單元計(jì)算標(biāo)志物cd62p陽(yáng)性的血小板細(xì)胞個(gè)數(shù)占外周血總血小板個(gè)數(shù)的百分比＜8.9%和/或標(biāo)志物血小板-中性粒細(xì)胞聚集體占外周血總中性粒細(xì)胞數(shù)的百分比＜4.29%時(shí)輸出第一數(shù)據(jù)支路；所述計(jì)算分析單元計(jì)算標(biāo)志物cd62p陽(yáng)性血小板細(xì)胞個(gè)數(shù)占外周血總血小板個(gè)數(shù)的百分比≥8.9%和/或標(biāo)志物血小板-中性粒細(xì)胞聚集體個(gè)數(shù)占外周血總中性粒細(xì)胞的百分比≥4.29%時(shí)輸出至主路下游。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)，其特征在于，還包括：設(shè)置在主路上分析單元下游的陰性報(bào)告輸出單元；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明CD62P和/或血小板?中性粒細(xì)胞聚集體作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途屬于疾病輔助診斷標(biāo)志物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供CD62P和/或血小板?中性粒細(xì)胞聚集體作為重癥肌無(wú)力輔助診斷標(biāo)志物的用途，還提供CD62P和/或血小板?中性粒細(xì)胞聚集體在制備重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑方面的用途，并基于該用途提供相關(guān)的重癥肌無(wú)力輔助診斷試劑及一種重癥肌無(wú)力輔助診斷系統(tǒng)。本發(fā)明的輔助診斷標(biāo)志物及輔助診斷系統(tǒng)法能夠?yàn)镸G的早期輔助診斷和疾病監(jiān)控提供重要的參考依據(jù)，提高臨床輔助診斷的準(zhǔn)確性和效率。

技術(shù)研發(fā)人員：笪宇威,溫琪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/24