本發(fā)明涉及一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，屬于醫(yī)藥檢測(cè)。

背景技術(shù)：

1、奧美沙坦酯是一種血管緊張素ⅱ受體拮抗劑類藥物，主要用于高血壓的治療。該藥物由日本sankyo（三共公司）和美國(guó)forestlaboratories共同開(kāi)發(fā)，于2002年在美國(guó)上市。相對(duì)同類降壓藥，具有劑量小、起效快、半衰期長(zhǎng)、不良反應(yīng)率低等明顯優(yōu)點(diǎn)。

2、基因毒性雜質(zhì)微量殘留即可產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用，故藥物中其殘留限度通?？刂圃谳^低水平（ppm級(jí)或更低），各國(guó)藥監(jiān)部門以及制藥企業(yè)對(duì)該類雜質(zhì)的研究均持保守的從嚴(yán)控制態(tài)度，以保證藥品的安全性。

3、奧美沙坦酯原料藥制備時(shí)關(guān)鍵起始物料（4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮）中涉及到的基因毒性雜質(zhì)名稱和結(jié)構(gòu)如下：

4、

5、雜質(zhì)1與奧美沙坦酯關(guān)鍵起始物料（4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮）為同分異構(gòu)體，其與雜質(zhì)2均為為合成物料過(guò)程中的原料剩余，且不具備參與奧美沙坦酯工藝反應(yīng)的官能團(tuán)，雖不會(huì)參與反應(yīng)，但存在以原型殘留至原料藥產(chǎn)品中的潛在風(fēng)險(xiǎn)；雜質(zhì)3與雜質(zhì)4為一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體，均為合成物料過(guò)程中的副產(chǎn)物，也存在殘留至原料藥產(chǎn)品中的潛在風(fēng)險(xiǎn)。通過(guò)雜質(zhì)毒性評(píng)估，按照ich?m7雜質(zhì)毒性分類原則，該雜質(zhì)屬于第2類雜質(zhì)，需要按照基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行控制，文獻(xiàn)調(diào)研未獲取到這四種雜質(zhì)的毒理數(shù)據(jù)，依據(jù)在ema（歐洲藥物評(píng)審組織）推出的《遺傳毒性雜質(zhì)限度指導(dǎo)原則》，對(duì)于無(wú)毒理學(xué)研究數(shù)據(jù)的雜質(zhì)可采用?ttc?計(jì)算可接受攝入量，即單個(gè)雜質(zhì)的可接受攝入量為?1.5?μg/天。奧美沙坦酯每日最大劑量為40?mg/天，則上述雜質(zhì)的限度均為37.5?ppm。

6、基因毒性雜質(zhì)限度低，常規(guī)檢測(cè)方法可能存在靈敏度不夠的問(wèn)題。目前行業(yè)內(nèi)多采用gc-ms或hplc-ms進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)試成本較高。亟待開(kāi)發(fā)出一種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、低成本的測(cè)試方法用于奧美沙坦酯及其關(guān)鍵起始物料中的基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，操作簡(jiǎn)單、成本低廉、選擇性好、準(zhǔn)確度高、普適性強(qiáng)，對(duì)奧美沙坦酯中的基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行有效研究。

2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法為：

3、（1）溶液的配制：

4、供試品溶液制備：取本品適量，加空白溶劑溶解并定量稀釋，過(guò)濾，取續(xù)濾液進(jìn)樣；

5、對(duì)照品溶液制備：取雜質(zhì)1、雜質(zhì)2、雜質(zhì)3、雜質(zhì)4對(duì)照品適量，加空白溶劑溶解并定量稀釋制得到對(duì)照品溶液；

6、所述雜質(zhì)1為4-氯-4-甲基-5-烯基-1,3-二氧雜環(huán)戊基-2-酮，雜質(zhì)2為4,5-二甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮，雜質(zhì)3為（4r,5r）-4,5-二氯-4,5-二甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊基-2-酮，雜質(zhì)4為（4s,5r）-4,5-二氯-4,5-二甲基-1,3-二氧雜環(huán)戊基-2-酮；

7、（2）用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)，色譜條件為：

8、檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，毛細(xì)管色譜柱為cp-volamine；

9、進(jìn)樣口溫度為150-200℃，檢測(cè)器溫度為215-225℃，柱溫為程序升溫，載氣為氮?dú)狻?/p>

10、進(jìn)一步的，所述空白溶劑為二甲基亞砜、n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙醇、異丙醇、三氯甲烷-甲醇的組合、三氯甲烷-乙醇的組合、三氯甲烷-異丙醇的組合、二氯甲烷-甲醇的組合、二氯甲烷-乙醇的組合、二氯甲烷-異丙醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-甲醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-乙醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-異丙醇的組合中的任意一種。

11、優(yōu)選的，所述空白溶劑為二氯甲烷和異丙醇的組合，所述二氯甲烷和異丙醇的體積比為9:1、8:2、6:4、1:1、3:7、2:8或7:3。

12、優(yōu)選的，cp-volamine色譜柱規(guī)格為：30m×0.32mm×5μm。

13、進(jìn)一步的，進(jìn)樣方式為頂空進(jìn)樣或直接進(jìn)樣。

14、進(jìn)一步的，步驟（2）中的流速為0.5ml/min~4.0ml/min。

15、優(yōu)選的，步驟（2）中的流速為1.0ml/min。

16、進(jìn)一步的，所述程序升溫過(guò)程為：

17、1）起始溫度為40℃，維持時(shí)間為5-6分鐘；

18、2）升溫速率為每分鐘10℃的速率，升溫至100℃；

19、3）升溫速率為每分鐘30℃的速率，升溫至200℃，維持時(shí)間為10-20分鐘。

20、優(yōu)選的，所述程序升溫過(guò)程為：

21、1）起始溫度為40℃，維持時(shí)間為5分鐘；

22、2）升溫速率為每分鐘10℃的速率，升溫至100℃；

23、3）升溫速率為每分鐘30℃的速率，升溫至200℃，維持時(shí)間為20分鐘。

24、優(yōu)選的，進(jìn)樣口溫度為150℃，檢測(cè)器溫度為220℃。

25、本發(fā)明的有益效果是：

26、1、本發(fā)明創(chuàng)造性的采用氣相色譜法對(duì)奧美沙坦酯原料藥及其關(guān)鍵起始物料中的基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行研究。

27、2、本發(fā)明采用兩種溶劑混合的方式，解決了奧美沙坦酯溶解性差的問(wèn)題，有效的提高了供試品溶液的濃度。

28、3、本發(fā)明有效的將該基因毒性雜質(zhì)與其他雜質(zhì)完全基線分離，即便微量雜質(zhì)殘留也可達(dá)到分離度要求，也可為其他基因毒性雜質(zhì)的分離提供技術(shù)依據(jù)。

29、4、本發(fā)明采用常規(guī)檢測(cè)器進(jìn)行基因毒性雜質(zhì)的有效監(jiān)測(cè)，避免了使用價(jià)格昂貴的質(zhì)譜檢測(cè)器，解決了基因毒性雜質(zhì)“限度低、靈敏度差”問(wèn)題的同時(shí)顯著的降低了測(cè)試成本，拓展了該方法的普適性。

30、5、本發(fā)明采用氣相色譜法，無(wú)需復(fù)雜前處理，成本低廉、普適性強(qiáng)，精密度高，分離度好，可順利轉(zhuǎn)移至制藥企業(yè)質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行奧美沙坦酯的質(zhì)量控制，進(jìn)而可保證其安全、有效及質(zhì)量可控性。

技術(shù)特征：

1.一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，所述檢測(cè)方法為：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，所述空白溶劑為二甲基亞砜、n,n-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙醇、異丙醇、三氯甲烷-甲醇的組合、三氯甲烷-乙醇的組合、三氯甲烷-異丙醇的組合、二氯甲烷-甲醇的組合、二氯甲烷-乙醇的組合、二氯甲烷-異丙醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-甲醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-乙醇的組合、二氯甲烷-三氯甲烷-異丙醇的組合中的任意一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，所述空白溶劑為二氯甲烷和異丙醇的組合，所述二氯甲烷和異丙醇的體積比為9:1、8:2、6:4、1:1、3:7、2:8或7:3。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，cp-volamine色譜柱規(guī)格為30m×0.32mm×5μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，進(jìn)樣方式為頂空進(jìn)樣或直接進(jìn)樣。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟（2）中的流速為0.5ml/min~4.0ml/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟（2）中的流速為1.0ml/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，所述程序升溫過(guò)程為：

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，所述程序升溫過(guò)程為：

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，進(jìn)樣口溫度為150℃，檢測(cè)器溫度為220℃。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種奧美沙坦酯原料藥及基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法，屬于醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。所述檢測(cè)方法為：（1）供試品溶液制備：取本品適量，加空白溶劑溶解并定量稀釋，過(guò)濾，取續(xù)濾液進(jìn)樣；對(duì)照品溶液制備：取雜質(zhì)1、雜質(zhì)2、雜質(zhì)3、雜質(zhì)4對(duì)照品適量，加空白溶劑溶解并定量稀釋制得到對(duì)照品溶液；（2）用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)，色譜條件為：檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器，毛細(xì)管色譜柱為CP?Volamine；進(jìn)樣口溫度為150?200℃，檢測(cè)器溫度為215?225℃，柱溫為程序升溫。該方法具有操作簡(jiǎn)單、成本低廉、選擇性好、準(zhǔn)確度高、普適性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，適用于奧美沙坦酯原料藥及其關(guān)鍵起始物料中的基因毒性雜質(zhì)的研究。

技術(shù)研發(fā)人員：沈文麗,李運(yùn),侯姣姣,劉慶春
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中節(jié)能萬(wàn)潤(rùn)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/24