專利名稱：高產(chǎn)櫛孔扇貝與蝦夷扇貝遠(yuǎn)緣雜交育種方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海洋生物技術(shù)領(lǐng)域，系貝類遺傳育種研究中遠(yuǎn)緣雜交育種技術(shù)，是在生產(chǎn)規(guī)模下培育抗逆、高產(chǎn)養(yǎng)殖扇貝新品種的一種技術(shù)方法。
背景技術(shù)：
雜交一般是指品種或品系以上的兩個不同類型的親本之間的交配，分類地位在種以上的兩個親本之間的交配稱為遠(yuǎn)緣雜交。
櫛孔扇貝是我國扇貝養(yǎng)殖的主要種類，其營養(yǎng)豐富、經(jīng)濟(jì)價值高，深受國內(nèi)外消費者的喜愛。因適溫范圍廣，養(yǎng)殖成本較低，在我國有開展扇貝養(yǎng)殖的優(yōu)越條件，發(fā)展扇貝養(yǎng)殖很有潛力。1997年以來，連續(xù)出現(xiàn)大規(guī)模死亡，挫傷了養(yǎng)殖業(yè)的積極性，養(yǎng)殖面積逐年減少，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。種質(zhì)退化，病害頻發(fā)、養(yǎng)殖個體小型化已成為櫛孔扇貝養(yǎng)殖業(yè)亟待解決的問題。
蝦夷扇貝個體大，經(jīng)濟(jì)價值高，抗逆性強(qiáng)，為冷水性貝類，1982年從日本引種以來，北方各海區(qū)積極進(jìn)行了養(yǎng)殖試驗，因受我國海區(qū)夏季水溫的影響，渡夏困難。另外，因其無足絲附著，人工筏式養(yǎng)殖需特殊的器材，常采用人工底播的方法，局限在我國北方的少數(shù)海區(qū)進(jìn)行養(yǎng)殖，未能大面積推廣。與櫛孔扇貝相比，雙方在性狀方面所表現(xiàn)出的優(yōu)缺點有互補(bǔ)性，同時雙方的生物學(xué)差異顯著，雜交后代可供選擇的變異幅度廣泛，可通過雜交途徑，集兩種扇貝的優(yōu)良性狀于一體，獲得新的優(yōu)良品種。
目前有關(guān)扇貝遠(yuǎn)緣雜交育種的工作主要有櫛孔扇貝與海灣扇貝、海灣扇貝與蝦夷扇貝、蝦夷扇貝與西北盤扇貝、櫛孔扇貝與蝦夷扇貝的雜交，大部分僅發(fā)育到胚胎發(fā)育階段，其中已報道櫛孔扇貝與蝦夷扇貝的雜交為未經(jīng)選育的親貝之間的雜交，而且研究也僅限于雜交的可行性和早期的胚胎發(fā)育和遺傳學(xué)研究，未見有關(guān)應(yīng)用選育的高產(chǎn)櫛孔扇貝與蝦夷扇貝進(jìn)行雜交而生產(chǎn)抗逆、高產(chǎn)扇貝的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過連續(xù)多年選育的櫛孔扇貝雌性個體與蝦夷扇貝雄性個體雜交技術(shù)，培育出生長快、抗逆能力強(qiáng)的雜交扇貝苗種，有效遏制目前存在的品質(zhì)下降，大面積死亡問題，為扇貝養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展提供了一條新的出路。
本發(fā)明是按照以下操作方法完成的培育高產(chǎn)櫛孔扇貝群體建立高產(chǎn)櫛孔扇貝家系，以殼長為標(biāo)準(zhǔn)，針對生長速度，通過連續(xù)四代的選擇育種，形成一個生產(chǎn)性狀優(yōu)異的選種群體。
抗逆、高產(chǎn)扇貝雜交育種技術(shù)從選擇育種獲得的高產(chǎn)櫛孔扇貝家系中挑選雌性個體，與蝦夷扇貝雄性個體進(jìn)行雜交，為保證遺傳多樣性，每次使用雄性個體不少于30只。為了達(dá)到櫛孔扇貝和蝦夷扇貝同時產(chǎn)卵、排精的目的，櫛孔扇貝需要進(jìn)行升溫培育，與蝦夷扇貝的繁殖期相一致。2月份移入池內(nèi)，第3天開始升溫培育，每天升溫1℃，至12℃恒溫6天，14℃恒溫5天，水溫至16℃時恒溫培養(yǎng)5-7天，此時要嚴(yán)格挑選雌體，等待與蝦夷扇貝同時產(chǎn)卵，受精。
雜交子一代培育適宜水溫為D-型幼蟲初期至殼頂中期水溫16-18℃，幼蟲殼長生長到170微米后，每天升高1℃，至20℃恒溫培育。
與已有技術(shù)對比，本發(fā)明技術(shù)具有如下特點1.雜交可以增加變異性，綜合雙親的優(yōu)良性狀，出現(xiàn)可利用的雜種優(yōu)勢。本發(fā)明是在傳統(tǒng)的雜交技術(shù)基礎(chǔ)上，采用已有的具有高產(chǎn)性狀的櫛孔扇貝家系與蝦夷扇貝雜交，以保留櫛孔扇貝的高產(chǎn)性狀，同時在此基礎(chǔ)上提高雜交子一代的抗逆能力，從而獲得能夠應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)中的高產(chǎn)、抗逆扇貝苗種的培育方法。
2.采用本方法培育的雜交子一代表現(xiàn)出了良好的生物學(xué)性狀，養(yǎng)殖二周年，生長速度比生產(chǎn)用種提高30％；特別是抗逆性有明顯增強(qiáng)，雜交子一代的成活率在80-90％，櫛孔扇貝的成活率在10-20％。扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)量可提高50-60％。
實施方式下面通過實施例詳細(xì)敘述本發(fā)明的高產(chǎn)櫛孔扇貝與蝦夷扇貝遠(yuǎn)緣雜交育種方法最佳實施例具體操作工藝過程通過對櫛孔扇貝連續(xù)四代的選擇育種，形成了一個生產(chǎn)性狀優(yōu)異的選種群體，其生長速度與生產(chǎn)用種相比提高20％以上。從此家系中挑選雌性個體，與蝦夷扇貝雄性個體進(jìn)行雜交，為保證遺傳多樣性，每次使用雄性個體不少于30只。
為了達(dá)到櫛孔扇貝和蝦夷扇貝同時產(chǎn)卵、排精的目的，櫛孔扇貝需要從2月下旬移入室內(nèi)進(jìn)行升溫培育。櫛孔扇貝入池后從第3天開始升溫培育，每天升溫1℃，至12℃恒溫6天，14℃恒溫5天，水溫至16℃時恒溫培養(yǎng)5-7天，此時櫛孔扇貝性腺已經(jīng)充分發(fā)育成熟。水溫升至14℃時，嚴(yán)格挑選雌雄，將雄貝全部剔除，同時也要防止雌雄同體混雜其中。3月中旬從海區(qū)挑選蝦夷扇貝雄貝，入池后每天升溫1℃，至8℃恒溫暫養(yǎng)，等待與櫛孔扇貝同時產(chǎn)卵、排精。櫛孔扇貝產(chǎn)卵水溫17℃，卵子產(chǎn)出后，檢查有無精子污染。蝦夷扇貝排精水溫15℃。精卵產(chǎn)出后應(yīng)盡快受精，卵子產(chǎn)出后不超過2小時，精子不超過0.5小時，精子用量以鏡檢每個卵子周圍有2-3個精子為宜。雜交子一代幼蟲階段的培育水溫D-型幼蟲初期至殼頂中期水溫16-18℃，幼蟲殼長生長到170微米后，每天升高1℃至20℃恒溫培育。
完成上述操作過程具體操作如下1.高產(chǎn)櫛孔扇貝家系的建立在前期的工作中，經(jīng)數(shù)據(jù)分析，殼長和體重是相關(guān)的，考慮到諸多因素，選種方案中把殼長和體重作為一個性狀指標(biāo)來考慮，只以殼長為指標(biāo)，簡化選種程序。針對生長速率進(jìn)行選種，經(jīng)過四代的選育，形成一個生產(chǎn)性狀優(yōu)異的選種群體(G7)，其生長情況見表1、表2。
經(jīng)過近五年的選擇培育，G7群體生長性狀表現(xiàn)優(yōu)異，群內(nèi)個體變異較小，性狀趨于穩(wěn)定。G7生長期比野生種長一個月，但G7的平均殼長超過半人工采苗扇貝的一倍，說明其生長速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過野生種群。
表1、櫛孔扇貝選育家系(G3，G4，G7)與野生種群生長情況比較(2002年6月)項目N(個)平均殼長cm軟體部指數(shù)％干貝指數(shù)％生長速率增加值野生種群50 4.36 6.425.11 /G3 58 5.37 8.066.23 23.20G4 53 5.56 8.416.18 27.60G7 60 5.91 8.777.02 35.40注軟體部指數(shù)＝軟體部干重(g)/貝殼重(g)×100干貝指數(shù)＝閉殼肌干重(g)/貝殼重(g)×100生長速率增加值＝(選育家系殼高-對照系殼高)×100/對照系(野生種)殼高表2、高產(chǎn)種群G7與野生種群(半人采苗)生長情況比較(2002年9月)組別平均殼長最大最小標(biāo)準(zhǔn)誤差生長期G7 6.467.2 5.6 0.388 16野生種群3.144.6 2.1 0.673 152.抗逆、高產(chǎn)扇貝雜交育種技術(shù)從選擇育種獲得的高產(chǎn)櫛孔扇貝家系中挑選雌性個體，與蝦夷扇貝雄性個體進(jìn)行雜交，為保證遺傳多樣性，每次使用雄性個體不少于30只。
櫛孔扇貝與蝦夷扇貝自然繁殖期不同，櫛孔扇貝的繁殖季節(jié)在5月初至5月中下旬，繁殖水溫14-15℃。蝦夷扇貝繁殖季節(jié)在3月底至4月初，繁殖水溫4-8℃。為了達(dá)到櫛孔扇貝和蝦夷扇貝同時產(chǎn)卵、排精的目的，櫛孔扇貝需要從2月下旬移入室內(nèi)進(jìn)行升溫培育。櫛孔扇貝入池后從第3天開始升溫培育，每天升溫1℃，至12℃恒溫6天，14℃恒溫5天，水溫至16℃時恒溫培養(yǎng)5-7天，此時櫛孔扇貝性腺已經(jīng)充分發(fā)育成熟。水溫升至14℃時，嚴(yán)格挑選雌雄，將雄貝全部剔除，同時也要防止雌雄同體混雜其中。3月中旬從海區(qū)挑選蝦夷扇貝雄貝，入池后每天升溫1℃，至8℃恒溫暫養(yǎng)，等待與櫛孔扇貝同時產(chǎn)卵、排精。櫛孔扇貝產(chǎn)卵水溫17℃，卵子產(chǎn)出后，檢查有無精子污染。蝦夷扇貝排精水溫15℃。精卵產(chǎn)出后應(yīng)盡快受精，卵子產(chǎn)出后不超過2小時，精子不超過0.5小時，精子用量以鏡檢每個卵子周圍有2-3個精子為宜。
研究結(jié)果表明雜交子一代偏母本特征，幼蟲階段的培育水溫應(yīng)高于蝦夷扇貝幼蟲的培育水溫，水溫過低不利于雜交子一代的生長，適宜培育水溫D-型幼蟲初期至殼頂中期水溫16-18℃，幼蟲殼長生長到170微米后，每天升高1℃至20℃恒溫培育，可以正常變態(tài)為稚貝。幼蟲生長速度較櫛孔扇貝幼蟲快，眼點幼蟲的個體較大，可達(dá)200微米。稚貝中間育成及養(yǎng)殖技術(shù)同櫛孔扇貝。
通過多年的養(yǎng)殖試驗，雜交子一代生長速度比生產(chǎn)用種提高30％，成活率提高70-80％，該項技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用將使扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)量在現(xiàn)有條件下提高50-60％。
權(quán)利要求
1.一種高產(chǎn)櫛孔扇貝與蝦夷扇貝雜交育種方法，其特征在于它的操作程序是培育高產(chǎn)櫛孔扇貝群體、進(jìn)行櫛孔扇貝與蝦夷扇貝雜交育種和雜交子一代培育，其培育高產(chǎn)櫛孔扇貝群體是建立高產(chǎn)櫛孔扇貝家系，經(jīng)四代選育，以殼長為準(zhǔn)，針對生長速度，進(jìn)行選擇育種，獲得高產(chǎn)櫛孔扇貝家系的雌性個體，并嚴(yán)格挑選雌體，與蝦夷扇貝雄性個體進(jìn)行雜交，蝦夷扇貝雄性個體不少于30個；櫛孔扇貝與蝦夷扇貝雜交育種櫛孔扇貝需要進(jìn)行升溫培育，在2月下旬移入室內(nèi)，每天升溫1℃，至12℃恒溫6天，14℃恒溫5天，水溫至16℃時恒溫培養(yǎng)5-7天，與蝦夷扇貝的繁殖期相一致，達(dá)到櫛孔扇貝和蝦夷扇貝同時產(chǎn)卵、同時排精；雜交子一代培育幼蟲階段的培育水溫、適宜溫度為D-型幼蟲初期至殼頂中期水溫16-18℃，幼蟲殼長生長到170微米后，每天升高1℃，至20℃恒溫培育。
全文摘要
一種高產(chǎn)櫛孔扇貝與蝦夷扇貝雜交育種方法，主要是利用選擇育種獲得高產(chǎn)櫛孔扇貝家系的雌貝與蝦夷扇貝雄貝進(jìn)行雜交，解決親貝培育，同步產(chǎn)卵，同步受精，并掌握雜交子一代苗種培育技術(shù)，培育出具有抗逆、高產(chǎn)特性的雜交子一代。本發(fā)明技術(shù)可適用于扇貝大規(guī)模生產(chǎn)，培育出的雜交子一代經(jīng)養(yǎng)成試驗，與生產(chǎn)用種相比較，生長速度提高30％，成活率提高70－80％，該項技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用，將使扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)量在現(xiàn)有條件下提高50－60％。
文檔編號A01K67/00GK1552202SQ0311241
公開日2004年12月8日 申請日期2003年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月29日
發(fā)明者楊愛國, 劉志鴻, 王清印, 常青 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所