專利名稱：提高動物出生雄性比例的方法及其動物模型的建立的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)療評價、藥物分析領(lǐng)域，具體地說，是關(guān)于雙酚A在制備調(diào)節(jié)動物性別比例的制劑中的用途，以及關(guān)于提高動物出生雄性比例的方法及其動物模型的建立。
背景技術(shù)：
出生性別比是某一時期內(nèi)出生男嬰與女嬰的數(shù)量之比的反映。其數(shù)值為每100名女嬰對應的男嬰數(shù)，即出生性別比=男嬰出生數(shù)/同期女嬰出生數(shù)X100。從人口學意義上來說，出生人口性別比的正常范圍在102至107之間。中國在建國初的30年中，出生人口性別比基本上維持在正常范圍內(nèi)，然而從1980年起中國出生人口性別比開始失調(diào)，1982年時中國出生人口性別比為108. 47，1990年達到111. 3，2000年時已經(jīng)上升到116. 86,2006年更是達到119. 3，少數(shù)省份的出生人口性別比異常偏高甚至突破130。
至于人口性別比失衡的原因，學者們主要從直接原因和根本原因兩個方面進行分析。根本原因即是根植于經(jīng)濟、文化、家族體制的男性偏好，而直接原因則是性別鑒定、人工選擇性流產(chǎn)女嬰、瞞報女嬰、生育率迅速下降所造成的。由于出生性別比的正常與否關(guān)系到人口結(jié)構(gòu)的平衡和社會的穩(wěn)定，性別比異常升高會帶來一系列的社會問題，因此我們國家非常重視這個問題，相繼出臺了一個個抑制出生性別比偏高的法規(guī)、條例和規(guī)定，然而出生嬰兒性別比非但沒有下降，卻仍在一路走高，解決出生性別比偏高的有效辦法仍然沒有找到。事實上出生性別比歸結(jié)到底是由人的自然或者生理因素決定的，它并不直接受社會經(jīng)濟因素的影響，那么中國持續(xù)近30年的性別比升高，是主觀因素的作用(人為因素)還是自然客觀因素的作用，還需要進一步的深入研究。然而目前國內(nèi)學者都是僅僅依靠人口普查資料匯總就推斷出性別比升高是由主觀原因引起的，而忽視了客觀自然因素所起的作用，即自然條件變化所引起的人的生理機能的改變而導致的原因。因此，國內(nèi)性別比升高有關(guān)的很多問題并沒有說清楚，也始終沒有找到解決問題的辦法。我們都知道，環(huán)境污染對人體健康具有巨大的危害和影響，在這些環(huán)境污染物中，對生殖健康影響最深的首推環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(EDCs)。隨著工業(yè)化的發(fā)展，大量的化學物質(zhì)通過廢水、廢氣、廢渣、農(nóng)藥等多種途徑排放到環(huán)境中，污染水源、土壤、空氣。由于不易降解，環(huán)境內(nèi)分泌干擾物可通過生物鏈的層層聚集，可在生物機體內(nèi)長期蓄積，最終經(jīng)過人體的消化道、呼吸道、皮膚進入體內(nèi)。大量實驗以及流行病學的調(diào)查結(jié)果表明，EDCs可引起發(fā)育、生殖、精神、情緒等多個方面的異常。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物種類繁多，其中雙酚A(BPA)是近幾年公眾和科學家關(guān)注較多的一種，每年，超過60億磅的BPA用于環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯塑料的制造，進而制造成各種各樣的日用產(chǎn)品(食物容器、嬰兒奶瓶等等)。當這些物品反復使用或暴露于高溫、酸、堿環(huán)境中時，BPA就會從中釋放或溶出，造成雙酚A也隨之進入體內(nèi)。由于雙酚A在人類生存環(huán)境中廣泛存在，因此人群的雙酚A暴露是非常普遍的。BPA具有微弱的雌激素樣作用。嚙齒類實驗動物(小鼠、大鼠)得到的絕大多數(shù)研究都表明，BPA對雄性生殖系統(tǒng)有害，特別是在組織形成和發(fā)育階段如在妊娠期和新生兒期的暴露能對實驗動物造成重要影響。主要包括睪丸內(nèi)生精細胞、支持細胞及間質(zhì)細胞受到不同程度損害，睪酮水平、精子數(shù)量、密度及活力下降，精子畸形率增高；甚至隱睪、尿道下裂的發(fā)生率也會增加。隨著1979年開始的改革開放，我國經(jīng)濟得到飛速發(fā)展的同時，也帶來了觸目驚心的環(huán)境污染問題，包括大氣污染、水污染、重金屬污染等，于此同時，中國的出生性別比也持續(xù)不斷的升高，不僅如此，根據(jù)2000年全國人口普查數(shù)據(jù)，將344個地市出生人口性別比按東、中、西部聚類比較，東部地區(qū)出生人口性別比偏高起始時間早于西部地區(qū)，同時，偏高程度也比西部地區(qū)嚴重，總體上表現(xiàn)為西部-中部-東部漸次升高。與第三、四次人口普查進行比較，出生人口性別比偏高的范圍逐漸從沿海發(fā)達地區(qū)向中西部地區(qū)蔓延。這一數(shù)據(jù)與中西部大開發(fā)、中西部環(huán)境污染加重的大背景相吻合，這些數(shù)據(jù)上的一致性背后一定有某些因素在起作用。然而，目前還沒有研究人員將環(huán)境內(nèi)分泌干擾物BPA與中國的出生性別比升高聯(lián) 系在一起，這兩者之間是否具有相關(guān)性并不清楚。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供雙酚A在制備調(diào)節(jié)動物性別比例的制劑中的用途。本發(fā)明的另一目的在于提供一種出生性別比失調(diào)的動物模型及其建立方法和應用。在本發(fā)明的第一方面，提供一種雙酚A的用途，用于制備提高哺乳動物子代中雄性比例的組合物。在另一優(yōu)選例中，所述的哺乳動物是非人哺乳動物。在另一優(yōu)選例中，所述的哺乳動物是鼠。在本發(fā)明的另一方面，提供一種提高哺乳動物子代中雄性比例的組合物，所述的組合物含有10_20mg/ml 雙酌· A ;和玉米油。在本發(fā)明的另一方面，提供所述的組合物的制備方法，包括將有效量的雙酚A添加上玉米油中。在本發(fā)明的另一方面，提供一種提高非人哺乳動物子代中雄性比例的方法，包括將雙酚A施用于雄性非人哺乳動物，經(jīng)過一個生精周期后，再與雌性非人哺乳動物交配，繁殖產(chǎn)生子代，該子代中雄性非人哺乳動物的比例提高。在另一優(yōu)選例中，所述的雄性非人哺乳動物是性成熟前的非人哺乳動物。在另一優(yōu)選例中，所述的非人哺乳動物是小鼠，所述方法包括選用性成熟前的3周齡雄性小鼠；施用的雙酹A的劑量為50mg/kg/天,連續(xù)施用7天；或在雙酚A注射后5周，雄性小鼠與正常的雌性小鼠交配產(chǎn)生子代。在本發(fā)明的另一方面，提供一種非人哺乳動物模型，其為雄性非人哺乳動物，其被施用了雙酚A。
在另一優(yōu)選例中，所述的非人哺乳動物模型的子代中，雄性動物的比例高于雌性動物(雄性個數(shù)與雌性個數(shù)的比值高于I. 18)。所述的非人哺乳動物模型的用途，用于篩選可調(diào)節(jié)哺乳動物子代中雄性比例的物質(zhì)。在本發(fā)明的另一方面，提供一種篩選可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)的方法，所述方法包括步驟(I)將候選物質(zhì)給予非人哺乳動物，所述的非人哺乳動物是施用了(較佳地在性成熟之前施用了)雙酚A的雄性非人哺乳動物；(2)將(I)的雄性非人哺乳動物與雌性非人哺乳動物交配，繁殖產(chǎn)生子代，檢測子代動物的性別比例；若雄性與雌性的性別比例趨于正常(雄性個數(shù)與雌性個數(shù)的比值接近 于1，如在1-1. 08之間)，則說明所述候選物質(zhì)是可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)。在另一優(yōu)選例中，步驟(I)包括在測試組中，將候選物質(zhì)給予施用了雙酚A的雄性非人哺乳動物；和/或步驟⑵包括檢測測試組子代動物的性別比例，并與對照組比較，其中所述的對照組是不給予候選物質(zhì)的施用了雙酚A的雄性非人哺乳動物；如果測試組中子代雄性個數(shù)與雌性個數(shù)的比值在統(tǒng)計學上小于對照組(或與對照組相比，測試組中子代雄性個數(shù)與雌性個數(shù)的比值更接近于I)，則表明該候選物質(zhì)是可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。


圖1、F1代雄雌性別比柱狀圖。統(tǒng)計了雙酚A(BPA)組的Fl代452只小鼠，對照組(CON) Fl代265只小鼠，雙酚A組的Fl代性別比(雄性雌性)為118.8 100，對照組Fl代性別比為101. 42 100，T檢驗顯示，兩組之間的P = O. 0474 (P < O. 05)，即兩組的性別比差異具有統(tǒng)計學上的意義。
具體實施例方式本發(fā)明人在研究中出乎意料地發(fā)現(xiàn)，以雙酚A(BPA)施用于性成熟之前的雄性哺乳動物，可使得該雄性哺乳動物的子代中雄性子代比例的增加。因此，給予雙酚A的動物可作為動物模型，應用于篩選調(diào)節(jié)哺乳動物子代性別比例、預防性別比例失調(diào)的藥物。雙酹A及其用途雙酚A (BPA)學名2，2-二(4_羥基苯基)丙烷，簡稱二酚基丙烷。白色晶體，熔點156 158°C。主要用于制備環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯，其鉀鹽或鈉鹽是生產(chǎn)聚砜的原料。雙酚A的化學結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種雙酚A的用途，其特征在于，用于制備提高哺乳動物子代中雄性比例的組合物。
2.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述的哺乳動物是非人哺乳動物。
3.一種提高哺乳動物子代中雄性比例的組合物，其特征在于，所述的組合物含有 10-20mg/ml雙酚A ;和玉米油。
4.權(quán)利要求3所述的組合物的制備方法，其特征在于，包括將有效量的雙酚A添加上玉米油中。
5.一種提高非人哺乳動物子代中雄性比例的方法，其特征在于，包括 將雙酚A施用于雄性非人哺乳動物，經(jīng)過一個生精周期后，再與雌性非人哺乳動物交配，繁殖產(chǎn)生子代，該子代中雄性非人哺乳動物的比例提高。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的雄性非人哺乳動物是性成熟前的非人哺乳動物。
7.一種非人哺乳動物模型，其特征在于，其為雄性非人哺乳動物，其被施用了雙酚A。
8.權(quán)利要求7所述的非人哺乳動物模型的用途，用于篩選可調(diào)節(jié)哺乳動物子代中雄性比例的物質(zhì)。
9.一種篩選可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)的方法，其特征在于，所述方法包括步驟 (1)將候選物質(zhì)給予非人哺乳動物，所述的非人哺乳動物是施用了雙酚A的雄性非人哺乳動物； (2)將(I)的雄性非人哺乳動物與雌性非人哺乳動物交配，繁殖產(chǎn)生子代，檢測子代動物的性別比例；若雄性與雌性的性別比例趨于正常，則說明所述候選物質(zhì)是可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(I)包括在測試組中，將候選物質(zhì)給予施用了雙酚A的雄性非人哺乳動物；和/或 步驟(2)包括檢測測試組子代動物的性別比例，并與對照組比較，其中所述的對照組是不給予候選物質(zhì)的施用了雙酚A的雄性非人哺乳動物；如果測試組中子代雄性個數(shù)與雌性個數(shù)的比值在統(tǒng)計學上小于對照組，則表明該候選物質(zhì)是可預防哺乳動物子代中雄性比例失調(diào)的潛在物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明提供了提高動物出生雄性比例的方法及其動物模型的建立。本發(fā)明人將化合物雙酚A施用于雄性小鼠，其產(chǎn)生子代出生雄性別比升高，即有更多的雄性子代。該動物模型可用于篩選預防出生性別比失調(diào)的藥物及效果評價。
文檔編號A01K67/027GK102961367SQ201110255750
公開日2013年3月13日 申請日期2011年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月31日
發(fā)明者李潤生, 李玉華, 王健, 劉媛媛, 段斐 申請人:上海市計劃生育科學研究所