專利名稱:含硒ms組織培養基的制作方法
技術領域:
本發明涉及MS組培基質技術,特別是一種含硒MS組織培養基。
背景技術:
MS組培基質和誘導基質是組織培養的核心技術。現有技術中的MS組織培養基中含有碳、氫、氧、氮、氯、鉀、鈣、磷、硫、鎂、鐵、鈉、錳、鋅、硼、銅、鉬、碘、鈷十幾種元素組成的化合物或有機物,通常其配方如下1、大量成份硝酸鉀1900毫克/升、硝酸銨1650毫克/ 升、氯化鈣440毫克/升、硫酸鎂370毫克/升、硫酸亞鐵27. 8毫克/升、磷酸二氫鉀170 毫克/升、乙二銨四乙酸鈉37. 3毫克/升。2、微量成份硫酸錳22. 3毫克/升、硫酸鋅8. 6 毫克/升、硼酸6. 2毫克/升、硫酸銅0. 025毫克/升、碘化鉀0. 83毫克/升、氯化鈷0. 025 毫克/升、鉬酸鈉0. 25毫克/升。3、有機成份腺嘌呤5毫克/升、甘氨酸2毫克/升、肌醇100毫克/升、煙酸0. 5毫克/升、維B10. 1毫克/升、維B60. 5毫克/升、吲哚乙酸1毫克/升、6-芐基腺嘌呤1毫克/升、蔗糖30000毫克/升、瓊脂8000毫克/升、H+1995納摩爾οMS培養基中的MS是培養基發明人穆拉希吉克(MuraShige,T.)和斯科克(Skoog, F.)的縮寫。MS培養基其特點是無機鹽和離子濃度較高,是較穩定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養分的數量和比例合適,能滿足植物細胞的營養和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數植物組織培養快速繁殖用它作為培養基的基本培養基。MS固體培養基可用于誘導愈傷組織,也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養,其液體培養基用于細胞懸浮培養時能獲得明顯的成功。但是,發明人發現,在脫毒組培的實踐中,采用MS組織培養基育種的組培苗長成后抗病、蟲害能力差,植入土壤中后,成活率只有70%。
發明內容
本發明針對現有技術中存在的缺陷或不足,提供一種含硒MS組織培養基,以提高組培苗長成后抗病、蟲害能力,及其植入土壤中后的成活率。本發明的技術方案如下含硒MS組織培養基,其特征在于,在現有不含有硒元素的MS組織培養基中加入硒元素。所述加入硒元素以有機硒型式加入。所述加入硒元素以無機硒型式加入。所述加入硒元素以硒酵素型式加入。所述硒元素的加入量與現有不含有硒元素的MS組織培養基的重量比為0. 1 10 1000000。所述現有不含有硒元素的MS組織培養基是指由碳、氫、氧、氮、氯、鉀、鈣、磷、硫、 鎂、鐵、鈉、錳、鋅、硼、銅、鉬、碘和鈷元素組成的組織培養基。
本發明的技術效果如下現有技術的配方中恰恰缺少了植物生長的一個必需元素——硒。硒是動、植物生長的必需元素,是谷胱甘肽過氧化物歧化酶和P—蛋白的組成部分。在大地生長的植物,由于土壤中或多或少含有硒元素,植根有吸收來源,所以植物較好生長。但在組培基質中,如果不加入硒元素,就缺乏該元素,組培苗長成后抗病、蟲害能力差,植入土壤中后,成活率只有70%。本發明技術在現有不含有硒元素的MS組織培養基中加入硒元素,培養出的組培苗,健壯、抗病蟲害能力強,植物土壤后,成活率96%以上,比不加硒酵素高沈%。對于加入硒元素,可以采用生物發酵技術,將硒元素加入發酵液體培養基中,通過發酵將硒轉化成有機硒,將含硒酵素按一定比例加入至MS培養基中。
具體實施例方式MS組培基質和誘導基質是組織培養的核心技術,現有技術培養基質中含有碳、 氫、氧、氮、氯、鉀、鈣、磷、硫、鎂、鐵、鈉、錳、鋅、硼、銅、鉬、碘、鈷十九種元素組成的化合物或有機物,其配方如下1、大量成份硝酸鉀1900毫克/升、硝酸銨1650毫克/升、氯化鈣440 毫克/升、硫酸鎂370毫克/升、硫酸亞鐵27. 8毫克/升、磷酸二氫鉀170毫克/升、乙二銨四乙酸鈉37. 3毫克/升。2、微量成份硫酸錳22. 3毫克/升、硫酸鋅8. 6毫克/升、硼酸6. 2毫克/升、硫酸銅0. 025毫克/升、碘化鉀0. 83毫克/升、氯化鈷0. 025毫克/升、鉬酸鈉0. 25毫克/升。3、有機成份腺嘌呤5毫克/升、甘氨酸2毫克/升、肌醇100毫克/ 升、煙酸0. 5毫克/升、維B10. 1毫克/升、維B60. 5毫克/升、吲哚乙酸1毫克/升、6-芐基腺嘌呤1毫克/升、蔗糖30000毫克/升、瓊脂8000毫克/升、H+1995納摩爾。該配方缺少了植物生長的一個必需元素——硒,硒是動、植物生長的必需元素,是谷胱甘肽過氧化物歧化酶和P—蛋白的組成部分。在大地生長的植物,由于土壤中或多或少含有硒元素,植根有吸收來源,所以植物較好生長。但在組培基質中,如果不加入硒元素,就缺乏該元素,組培苗長成后抗病、蟲害能力差,植入土壤中后,成活率只有70%。本項技術采用生物發酵技術,將硒元素加入發酵液體培養基中,通過發酵將硒轉化成有機硒,將含硒酵素按一定比例加入至MS培養基中。培養出的組培苗,健壯、抗病蟲害能力強,植物土壤后,成活率96%以上,比不加硒酵素高沈%。加硒組培基質配方為硒酵素占10%,其它同于MS培養基。本領域技術人員能夠參照或參考中華人民共和國農業部發布的農業行業標準,NY/ T1212-2006,馬鈴薯脫毒種薯繁育技術規程,進一步了解MS組織培養基等相關技術概念。含硒MS組織培養基,其特征在于,在現有不含有硒元素的MS組織培養基中加入硒元素。所述加入硒元素以有機硒型式加入。所述加入硒元素以無機硒型式加入。所述加入硒元素以硒酵素型式加入。所述硒元素的加入量與現有不含有硒元素的MS組織培養基的重量比為0. 1 10 1000000。所述現有不含有硒元素的MS組織培養基是指由碳、氫、 氧、氮、氯、鉀、鈣、磷、硫、鎂、鐵、鈉、錳、鋅、硼、銅、鉬、碘和鈷元素組成組織培養基。硒有機型式甲硒胺酸(selenomethione)、硒半胱胺酸(selenocysteine)等。硒無機型式硒酸鹽(selenate)、亞硒酸鹽(selenite)等。在此指明,以上敘述有助于本領域技術人員理解本發明創造,但并非限制本發明創造的保護范圍。任何沒有脫離本發明創造實質內容的對以上敘述的等同替換、修飾改進和/或刪繁從簡而進行的實施,均落入本發明創造的保護范圍。
權利要求
1.含硒MS組織培養基,其特征在于,在現有不含有硒元素的MS組織培養基中加入硒元ο
2.根據權利要求1所述的含硒MS組織培養基,其特征在于,加入硒元素以有機硒型式加入。
3.根據權利要求1所述的含硒MS組織培養基,其特征在于,所述加入硒元素以無機硒型式加入。
4.根據權利要求1所述的含硒MS組織培養基,其特征在于,所述加入硒元素以硒酵素型式加入。
5.根據權利要求1所述的含硒MS組織培養基,其特征在于,所述硒元素的加入量與現有不含有硒元素的MS組織培養基的重量比為ο. 1 10 1000000。
6.根據權利要求1所述的含硒MS組織培養基,其特征在于,所述現有不含有硒元素的 MS組織培養基是指由碳、氫、氧、氮、氯、鉀、鈣、磷、硫、鎂、鐵、鈉、錳、鋅、硼、銅、鉬、碘和鈷元素組成的組織培養基。
全文摘要
含硒MS組織培養基,以提高組培苗長成后抗病、蟲害能力,及其植入土壤中后的成活率,其特征在于,在現有不含有硒元素的MS組織培養基中加入硒元素。
文檔編號A01H4/00GK102342247SQ201110296119
公開日2012年2月8日 申請日期2011年9月28日 優先權日2011年9月28日
發明者李亞雄 申請人:金色種業有限公司