專利名稱：馥芳艾納香種苗快速繁育與栽培方法
技術領域：
本發明涉及一種馥芳艾納香種苗快速繁育與栽培方法。
背景技術：
馥芳艾納香(擬腫⑶aromatica DC.)，為菊科多年生草本植物，又名山風、香艾、 香艾納。全草入藥，味辛、微苦，性溫，氣香。有祛風消腫，活血止癢功效，用于主治風濕性關節痛、濕疹、皮膚瘙癢、外出血等癥，是國家中藥保護品種“華佗風痛寶”的主要原料藥。目前馥芳艾納香藥材只依靠采集野生資源，隨著人們用藥的不斷增加，醫藥企業對有限的野生資源進行大量采集，造成了資源嚴重匱乏，致使被迫使用療效相差甚遠的代用品艾納香。 因此，迫切需要盡快進行馥芳艾納香種苗繁育與栽培以滿足人們的日常用藥和工業的原料藥需求。馥芳艾納香在自然狀態下依靠種子繁殖，但種子發芽率極低，不到0. 1%，且種子在傳播過程中很難遇到能夠滿足其發芽生根的環境條件。經查閱文獻和深訪了解藥材收購店 (站)及制藥企業，目前尚未有馥芳艾納香種苗繁育與栽培方面的研究。

發明內容
為了保護和可持續利用馥芳艾納香藥材的野生資源，同時又保障醫藥企業生產的用藥需求，我們對馥芳艾納香種苗快速繁殖與栽培進行了系統研究，包括外植體滅菌、初代誘導、繼代增殖、生根移栽等技術環節，能在短時間內生產大量種苗，并栽培出揮發油有效成分含量高的藥材。
本發明的技術方案
本發明以馥芳艾納香的帶腋芽莖段作為外植體誘導叢生芽，叢生芽誘導的最適培養基為 MS (Murashige and skoog(1962)培養基，下同)+2.0 mgdBA (6-芐基嘌呤， 下同)+0.2 mg-L^NAA (萘乙酸，下同)，誘導率為100% ；最佳繼代增殖培養基為MS+2. 0 mg.Ll-BA+O. Smg-L^1KT (激動素，下同)+0. 2 mg·I^1NAA,增殖倍數為 6. 83/20d ；最適的生根培養基為1/2MS+0. 3 mg·L^1NAA,生根率100%，移栽成活率84. 07%。最適培養條件為溫度^±2°C、光照強度為2000LX、光照時間10h。栽培方法
包括種植密度為40X40cm，種植最佳時間2-3月；種植前進行選地和整地，種植后進行排灌、施肥、病蟲害防治、采收等栽培管理。施用基肥廄肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg或未施基肥時分兩次施用尿素。用50%多菌靈500倍液進行灌根防治根腐病，用50%辛硫磷乳油1000倍或35% 辛齊乳油1500倍噴施防治斜紋夜蛾幼蟲。采收時間為10月份進入花期之前，采收方法為留地上部分2cm有待第二年根莖基部萌芽。本發明的優點或積極效果
本發明提供的整套馥芳艾納香種苗快速繁殖與栽培方法，能在短時間內生產出大量種苗，并生產出揮發油有效成分含量高的藥材。種苗的繁殖速度塊，周期短，成本低廉，適用于工廠化生產。人工栽培技術完整，栽培措施簡便可靠，保證藥材的有效成分含量。


圖1為叢生芽誘導情況圖。
圖2為叢生芽增殖情況。
圖3為組培苗生根培養情況。
圖4為組培苗生根情況。
圖5為組培苗移栽情況。
圖6為4月份除草后的馥芳艾納香生長情況。
圖7為7月山風生長情況。
圖8為10月山風生長情況。
圖9為宿根春季萌芽情況。
具體實施例方式(1)種苗快速繁育方法
配置配方為 MS+2. 0 mg.Ll-BA+O. 2 mg·L^1NAA 的培養基 IL 1.用移液管量取MS基本培養基母液
(1)大量元素50ml，其中含硝酸鉀(KNO3)1900mg、硝酸銨(NH4NO3) 1650mg、七水合硫酸鎂(MgSO4. 7H20) 370mg、磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg、無水氯化鈣(CaCl2) 332. 24mg ；
(2)微量元素5ml，其中含四水合硫酸錳(MnSO4.4H20) 22. 3mg,七水合硫酸鋅 (ZnSO4. 7H20) 8. 6mg、硼酸(H3BO3) 6. 2mg、碘化鉀(ΚΙ) 0. 8;3mg、二水合鉬酸鈉(NaMoO4. 2H20) 0. 25mg、五水合硫酸銅(CuSO4. 5H20) 0. 025mg、六水合氯化鈷(CoCl. 6H20) 0. 025mg;
(3)鐵鹽5ml，其中含乙二胺四乙酸納(Na2-EDTA)37. :3mg、七水合硫酸鐵(FeSO4. 7H20) 27. 8mg;
(4)肌醇25 ml，其中含肌醇(C6H12O6) IOOmg;
(5)有機物5ml，其中含煙酸(C6H5NO2)O. lmg、鹽酸硫胺素(Vit. B1)0. lmg、鹽酸吡哆醇 (Vit. B6) 0. 5mg、甘氨酸(NH2CH2COOH) 2. Omg。2.用移液管量取各種激素母液；
(1)0.5mg/ml 的 6-BA 母液 4ml ；
(2)0. 2 mg/ml 的 NAA 母液 1 ml。
3.稱量瓊脂5g和蔗糖25g ；
4.將500ml蒸餾水煮沸后加入上述稱量的瓊脂和蔗糖，待瓊脂和蔗糖溶解后加入上述量取的MS基本培養基和激素混合；
5.用蒸餾水定容至1L，并將PH值調節至6.0 ；
6.分裝培養基至培養瓶中，20ml/瓶；
7.將分裝好的培養瓶放入高壓滅菌鍋，121°C滅菌20分鐘；
8.將滅菌好的培養基取出移至接種室，冷卻后即可使用。
①外植體選擇與滅菌將帶腋芽的莖段放在燒杯中，用0. 05%洗潔精溶液浸泡lOmin，浸泡過程中用毛筆輕輕刷洗莖段和嫩葉的表面以去除表面污垢，再經流水沖洗15min。在超凈工作臺上用 0. l%HgCl2溶液滅菌8min，然后用無菌水搖蕩洗滌4次，再用無菌吸水紙將水分吸干后，將莖段切成0. 5cm左右帶一個腋芽的莖段。此滅菌方法的污染率為13. 33%，成活率為80. 00%。②初代誘導
將滅菌好的外植體接種至初代誘導培養基MS+2. O mg-L^e-BA+O. 2 mg.I^NAA上進行叢生芽誘導培養，誘導率100%。培養25d后，在葉腋處誘導出具有4-5個小芽的叢生芽。利用該配方進行叢生芽誘導所需的時間最短，芽生長速度快，無玻璃化現象。③繼代增殖
將初代誘導培養獲得的叢生芽切下單個芽轉接到繼代培養基MS+2. 0 mg'L^e-BA+O. Smg'L^KT+O. 2 mg·L^1NAA中進行增殖培養，增殖倍數為6. 83/20d,叢生芽生長快，無玻璃化現象。④生根
當繼代增殖芽苗長至2cm以上，從基部切成單個芽，轉接到生根培養基1/2MS+NAA0. 3 mg-r1中誘導生根，培養7d開始長根，15d后可以開蓋煉苗。生根率100%，根數>30條，新葉多。⑤培養條件
初代和繼代增殖培養的基本培養基為MS，生根培養的基本培養基為1/2MS，培養基均附加3. 0%蔗糖和0. 5%瓊脂，pH6. 0，配制分裝后，于121°C滅菌20分鐘。培養條件為 26士2°C、光照強度2000Lx、光照時間10 h/d。⑥煉苗移栽
把生根的瓶苗搬到煉苗棚，打開瓶蓋煉苗4d，然后用鑷子將瓶苗取出，用清水洗去粘附在根部的培養基，移栽到泥炭土 細河沙(3 1)的基質上，移栽后IOd內保持相對濕度95% 左右，溫度白天控制在23-25°C，夜間15-18°C，沒有直射光的條件，移栽成活率為84. 07%。 移栽15d后即可進行大田栽培。(2)栽培方法 ①選地和整地
選擇土層深厚、土質疏松、排水良好、光照充足的沙壤土或壤土地塊。種植前一個月深耕翻曬。種植前犁耙土塊細碎，起畦寬70 cm，高15 cm 20 cm，整平畦面。按行距40 cm 、株距40 cm挖穴，穴長、深、寬為20 cm X 15 cm X 15 cm，每穴最好施入廄肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg，肥土拌勻后，即可種植。②種植
每年春季2-3月，每穴放種苗1株。放苗時要讓其根自然伸展開，覆土過根莖為宜，把土稍壓實，并澆足定根水。③田間管理 A.除草
春季氣溫較低，且雨水充足容易生長雜草，宜在畦面鋪上稻草或蕨草，既可防止雜草滋生，又起到保墑作用。4月份和7-8月份各除草一次。為了避免傷害其根部，鋤草宜淺。B.排灌馥芳艾納香生長較快，葉片大蒸騰作用強，保持土壤濕潤，有利于植株生長。所以，應及時淋(灌)水。但是，如果土壤濕度過大，也容易發生根部病害。因此，在雨季(灌水后)要及時排水，畦溝里不能有積水。C.施肥
在施足基肥的情況下，整個生長周期均可以不再進行追肥。若種苗時未施用基肥，則可在幼苗生長期(3-5月份)薄施一次尿素，每株5 g ；第二次在7-8月份除完草后施，每株2g 尿素。D.病蟲害防治
馥芳艾納香常見病蟲害有以下三種 a.根腐病
癥狀表現為病植株地上部枝葉萎縮，拔出根部可見根部變腐爛，有的黑腐，有的腐爛伴有白色菌絲索。發病嚴重時，病苗干枯死亡。地下害蟲危害可加重該病發生。發病期選用50%多菌靈500倍液等藥劑進行灌根防治。b.病毒病
癥狀病葉扭曲畸變并有下卷曲趨向，葉組織皺縮不平增厚呈花葉狀，或呈綠色濃淡不均勻的斑駁花葉狀。由病毒感染引起。蚜蟲、葉蟬等是該病蟲媒，病害通過蟲媒、摩擦等方式傳播。一旦發現病毒株應立即拔除。c.斜紋夜蛾幼蟲
癥狀初齡幼蟲在葉背群集危害，被食葉片僅留葉脈及上表皮，老齡幼蟲把葉片吃成缺口或全葉吃光。可用50%辛硫磷乳油1000倍或35%辛齊乳油(克蛾寶)1500倍噴施，也可人工進行捕殺。E.采收
馥芳艾納香是一年生的藥用植物，進入花期后葉片從下部開始逐漸向上干枯脫落，同時經檢測結果表明山風開花前采收植株其揮發油得率最高，因此，山風以10月份進入花期之前進行采收為宜。采收方法為用刀將離地2cm以上的地上部分收割，留下根和莖基部待
第二年萌芽。
權利要求
1. 一種馥芳艾納香種苗快速繁育與栽培方法，其特征是以馥芳艾納香的帶腋芽莖段作為外植體誘導叢生芽，(1)培養基配方叢生芽誘導的最適培養基為MS+2. 0 mg-L^e-BA+O. 2 mg-L^1NAA ；最佳繼代增殖培養基為 MS+2. 0 mg'L^e-BA+O. Smg'L^KT+O. 2 mg·L^1NAA ；最適生根培養基為1/2MS+0. 3 mg-L^1NAA ；(2)培養條件為溫度^±2°C、光照強度為2000Lx、光照時間IOh；(3)栽培方法包括種植密度為40X40cm，種植最佳時間為春季2-3月；施用基肥廄肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg或未施基肥時分兩次施用尿素；用50%多菌靈500倍液進行灌根防治根腐病，用50%辛硫磷乳油1000倍或35%辛齊乳油1500倍噴施防治斜紋夜蛾幼蟲；采收時間為10月份進入花期之前，采收方法為留地上部分2cm有待第二年根莖基部萌芽。
全文摘要
本發明涉及一種馥芳艾納香種苗快速繁育與栽培方法，是以馥芳艾納香的帶腋芽莖段作為外植體誘導叢生芽，提供了整套馥芳艾納香種苗快速繁殖與栽培方法，包括外植體滅菌、初代誘導、繼代增殖、生根移栽等技術環節，能在短時間內生產出大量種苗，并生產出揮發油有效成分含量高的藥材。種苗的繁殖速度塊，周期短，成本低廉，適用于工廠化生產。人工栽培技術完整，栽培措施簡便可靠，保證藥材的有效成分含量。
文檔編號A01G1/00GK102550421SQ201210051539
公開日2012年7月11日 申請日期2012年3月1日 優先權日2012年3月1日
發明者凌征柱, 劉麗輝, 姚紹嫦, 李翠, 潘麗梅, 藍祖栽 申請人:廣西壯族自治區藥用植物園