專利名稱：一種貫月忍冬的育苗方法
技術領域：
本發明涉及的是一種忍冬的育苗方法。
背景技術：
貫月忍冬(Zoflicera sempervirens)屬于忍冬科忍冬屬纏繞型攀緣藤本植物，原產北美。常綠纏繞藤本，北京植物園引種變為落葉性，具有生長蔓延快、抗性強、花期長、繁殖容易等特點，花色鮮艷，枝繁葉茂，單株覆蓋面廣，平面和立體效果好，是不可多得的園林觀賞樹種之一。春季在5 °C以上植物體液開始流動，10 °C時芽開始膨大發育，15°C時植株進入生長期，在陽光充足的露地條件下，葉色濃綠，花色鮮艷，從早春到晚秋均花開滿枝，入冬后在室內生長的貫月忍冬葉色依然濃綠，正常開花，在室外生長的植株葉片凋落，以莖越冬。目前，關于貫月忍冬的育苗技術主要為無性繁殖(即分株、壓條、硬枝扦插、綠枝扦插)等技術，利用組培技術繁育貫月忍冬的技術及對貫月忍冬的育苗尚未有人研究，優良品種的推廣普及尚未完成，苗木供求矛盾日益加劇，嚴重影響了貫月忍冬的園林應用和推廣。

發明內容
本發明針對現有的不足提供了一種貫月忍冬的育苗方法。本發明通過以下方法實現上述目的。一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟
(1)移栽前準備土壤若肥力不足，必須先進行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機肥3000kg,另加尿素50kg,為預防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細，平整床面后進行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細,床面中央稍高,兩側稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢；
(2)移栽以及管理將經過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當天要澆透定根水，如遇連續晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時排水，移栽后35天內要架設遮陽網，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時松土除草，以防止土壤表面板結；
所述的組培苗通過以下方法得到
①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體；
②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片；
③初代培養在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養基上，該培養基是在 MS 常規培養基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為1800-19001uX，待培養22天左右后，新芽長至3. 5cm時，即開始下一個階段；
④繼代培養將初代培養的外植體新芽剪下接種在繼代培養基上，該培養基是在3/4MS 常規培養基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時，即開始下一個 階段；
⑤生根培養將繼代培養的外植體新芽剪下接種在生根培養基上，該培養基是在1/2MS 常規培養基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時，即開始下一個階段；
⑥煉苗移栽先將培養瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當遮光，使光照強度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養基，移栽到經消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質中，溫度控制在28°C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。有益效果本發明對貫月忍冬采用組織培養技術，以嫩莖段和葉片為外植體，經外植體滅菌、初代培養、繼代培養、增殖培養、生根培養和煉苗移栽步驟，研究培養過程中試管苗的營養需求、激素對苗木生長分化的調控，解決貫月忍冬的微體快速增殖、誘導生根的重要技術問題，建立了完善的貫月忍冬組織培養體系，并通過移栽前后的管理達到了高效誘導外植體分化增殖和高質量保證幼苗成活的目的，并且保存了母體的全部優良性狀，遺傳性狀穩定。這種方法可在短期內形成大量優良試管苗，進行規模化、工廠化生產，并具體具有一下優點
I、本發明針對貫月忍冬原產地的氣候特點，提高了組培過程中的培養溫度，并且縮短了光照周期，降低了光強度，從而使培養環境更接近其原生地的氣候，通過對初代培養基、繼代培養基、增殖培養基、生根培養基配方的精確篩選，達到了增殖速度快、遺傳性狀穩定、繁殖系數高、試管苗生長旺盛的優良效果。2、在煉苗移栽中通過逐漸提高光照強度，并且在移栽過程中，逐漸降低濕度、嚴格控制溫度，采用合適的基質配方，最終提高了生根試管苗的成活率。3、移栽前通過對土地的改良、苗床的改造，以及移栽之后溫度、水分、光照等因素的控制，保證了貫月忍冬的移栽成活率和苗木質量。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的說明，下述各實施例僅用于說明本發明，對本發明并沒有限制。一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟
(I)移栽前準備土壤若肥力不足，必須先進行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機肥3000kg,另加尿素50kg,為預防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細，平整床面后進行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細,床面中央稍高,兩側稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢；
(2)移栽以及管理將經過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當天要澆透定根水，如遇連續晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時排水，移栽后35天內要架設遮陽網，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時松土除草，以防止土壤表面板結；
所述的組培苗通過以下方法得到
①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體；
②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片；
③初代培養在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養基上，該培養基是在 MS 常規培養基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為1800-19001uX，待培養22天左右后，新芽長至
3.5cm時，即開始下一個階段；
④繼代培養將初代培養的外植體新芽剪下接種在繼代培養基上，該培養基是在3/4MS 常規培養基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時，即開始下一個階段；
⑤生根培養將繼代培養的外植體新芽剪下接種在生根培養基上，該培養基是在1/2MS 常規培養基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時，即開始下一個階段；
⑥煉苗移栽先將培養瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當遮光，使光照強度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養基，移栽到經消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質中，溫度控制在28 °C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。經過上述步驟的培養，貫月忍冬的愈傷組織的萌動率達到了 95. 1%，增殖倍數達到了 4. 5倍，生根率達到了 100%，最終的成活率達到了 95%，而移栽成活率達到了 100%。
權利要求
1. 一種貫月忍冬的育苗方法，其特征在于該方法包括下列步驟 (1)移栽前準備土壤若肥力不足，必須先進行土壤改良，施入基肥，每畝施腐熟有機肥3000kg,另加尿素50kg,為預防地下害蟲,每畝施入殺蟲劑樂果I. 5kg,第一次翻耕,采用深翻，深度26cm以上，田間不留死角，然后細耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙細，平整床面后進行開溝，在田塊四周開邊溝，深度50 80cm，寬60cm，在田塊中央開中溝，與邊溝相通，深40 60cm,寬50 60cm,做床,床面寬IlOcm,床面土塊整細,床面中央稍高,兩側稍低，每條苗床之間開步道，深25cm以上，寬40cm，步道中部稍高，兩頭稍低，保證溝溝相通，排水流暢； (2)移栽以及管理將經過煉苗后的組培苗移栽到步驟(I)所述的苗床上，移栽后當天要澆透定根水，如遇連續晴天，移栽后要每天澆I次水，保持土壤濕潤，如遇雨天，要及時排水，移栽后35天內要架設遮陽網，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，結合施肥，松土除草，雨后晴天，要及時松土除草，以防止土壤表面板結； 所述的組培苗通過以下方法得到 ①外植體的選擇于5 8月采取生長健壯的貫月忍冬幼嫩莖段和葉片作外植體； ②材料處理方法先用軟毛刷將貫月忍冬表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射20 min，轉入超凈工作臺，在超凈工作臺上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用無菌水沖洗，再轉入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升萊溶液中浸泡5-10min,依時間長短用無菌水沖洗5 6次,最后在無菌條件下分割材料, 段切割成0. 5 0. 6cm長,葉片分割成約0. 5 cm X0. 5 cm的小片； ③初代培養在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養基上，該培養基是在 MS 常規培養基中添加了 0. 6mg/L 的 2，4_D、0. 2mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為1800-19001uX，待培養22天左右后，新芽長至·3.5cm時，即開始下一個階段； ④繼代培養將初代培養的外植體新芽剪下接種在繼代培養基上，該培養基是在3/4MS 常規培養基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 IBA, 0. 2mg/L 的 KT, PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期Ilh/d，光強度為1800-19001UX，待新芽長至2. 5cm時，即開始下一個階段； ⑤生根培養將繼代培養的外植體新芽剪下接種在生根培養基上，該培養基是在1/2MS 常規培養基中添加了 0. 7mg/L 的 IBA、0. 5mg/L 的 NAA，0. 2mg/L 的 KT，PH 5. 9，培養溫度為29°C，光照周期llh/d，光強度為21001UX，待新苗長至2. 1-2. 5cm時，即開始下一個階段； ⑥煉苗移栽先將培養瓶移至溫室，自然條件下煉苗4d，然后解開封口膜，煉苗3d，煉苗期間適當遮光，使光照強度為自然光的55%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養基，移栽到經消毒的重量比腐殖土草炭珍珠巖=3 2 2的混合基質中，溫度控制在28°C，前5d濕度控制在90%左右，以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下。
全文摘要
本發明公開了一種貫月忍冬的快速繁殖方法，主要通過對貫月忍冬移栽前后的管理，特別是組織培養過程中初代培養、繼代培養、增殖培養、生根培養以及煉苗移栽的步驟，達到了增殖速度快、遺傳性狀穩定、繁殖系數高、試管苗生長旺盛的優良效果，貫月忍冬的愈傷組織的萌動率達到了95.1%，增殖倍數達到了4.5倍，生根率達到了100%，最終的成活率達到了95%，移栽成活率達到了100%。
文檔編號A01G9/10GK102630563SQ20121008570
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月28日 優先權日2012年3月28日
發明者董國新 申請人:常熟市濱江農業科技有限公司