專利名稱：植物組培方法及裝置的制作方法
技術領域：
本發明涉及植物科學技術，尤其是一種無糖式的組培方法及裝置。
背景技術：
傳統組培是在全封閉的無菌環境下進行，傳統組培需要用糖作為植物生長所需的碳源，且要求高壓滅菌和超凈工作臺，對操作技術和培養環境要求極其嚴格，對工作人員的業務素質要求也較高，每個環節都可能增加微生物污染的機會，造成植物生產緩慢，組培苗質量較差。為解決傳統組培存在的這些問題，許多科技工作者探索了開放組培和無糖組培等新的組培方法。當前的無糖組培雖改進了傳統組培的許多不足，但無糖組培不僅需要高壓滅菌鍋及超凈工作臺，還需要昂貴的設備來控制CO2氣體的供給，限制其廣泛推廣應用；而植物開放組培雖然簡化了傳統組培繁瑣的程序，不需要高壓滅菌鍋及超凈工作臺，但開放式組培添加到培養基里的糖，又為微生物的污染創造了有利條件，仍然沒能從根本上解決污染問題。

發明內容
本發明的目的是提供一種植物組培方法及裝置，它操作簡單，能抑菌殺菌，能提高組培苗質量，以克服現有技術的不足。本發明是這樣實現的植物組培方法，在相對無菌的環境下，配制IL培養基需稱取瓊脂粉3. 5 5. 5g，將瓊脂粉加熱至充分溶解，然后按照培養階段加入除蔗糖以外的MS培養基各種元素，根據不同培養階段添加入對應的植物激素和抑菌劑3 5ml，調整培養基pH值至5. 6 5. 8，定容、分裝，獲得無糖培養基；在接種室內，用質量百分比濃度為75%的酒精將接種臺面和手擦干凈，將無糖培養基放入二氧化碳氣肥培養瓶中，再將植物外植體接種到無糖培養基上，將二氧化碳氣肥放入二氧化碳氣肥培養瓶后，使二氧化碳氣肥培養瓶密閉；二氧化碳氣肥的用量為0. 5 I. 0g/250ml。根據不同培養階段添加不同濃度的植物激素是指，植物愈傷組織的誘導、增殖、壯苗和生根等4個階段，根據現有技術的方式加入相應的植物激素。接種工具浸泡于無水乙醇中，每轉接一瓶外植體就用酒精燈灼燒一次接種工具。在接種植物外植體前，為不耽誤白天的接種工作，將接種室用臭氧發生器在夜間消毒2小時，在接種前用質量百分比為75%的乙醇進行降塵處理，并用紫外燈照射15 20分鐘；所述的相對無菌的環境是指將培養室每隔2個月用甲醛熏蒸處理一次。按質量百分比濃度計算，所述的抑菌劑的包括煙堿I 5%、成熟蒜泥汁液2% 6%、50%的多菌靈及水。其中煙堿、成熟蒜泥汁液及多菌靈按質量百分比取量后，再加入水，使其均勻混合并定容。二氧化碳氣肥培養瓶，包括透明的瓶體和瓶蓋，在瓶蓋頂部設有氣肥入孔，在氣肥入孔內裝有氣肥入孔旋蓋，在氣肥入孔的下方設有托盤，托盤與瓶蓋底部連接。由于采用了上述技術方案，與現有技術相比，本發明選用二氧化碳氣肥作為“橋梁”，利用二氧化碳氣體代替培養基中的蔗糖，為植物提供光合作用所需的碳源，同時在培養基中添加抑菌劑來抑制微生物的污染，將“無糖組培”和“開放式組培”的優點有機結合，以達到抑菌殺菌、簡化操作及提高組培苗質量的多重效果；而且由于培養基不經高壓滅菌，無需耗費培養基滅菌所需的大量電能，所以營養成分幾乎無損失；同時由于不需要超凈工作臺，直接在相對無菌的環境接種，其接種速度是傳統組培的3倍以上，勞動力成本投入大大減少；無糖抑菌培養基由于不含糖，且添加有抑菌劑，從很大程度上解決了微生物的污染問題；二氧化碳氣肥在植物組培中的創新應用使組培苗進行自養光合，不經過馴化，可直接移植，組培苗質量優于傳統組培苗；因為不需高壓滅菌鍋和超凈工作臺，而且組培苗由異養轉為自養，所以固定資產投入、基地建設及勞動力成本投入要比傳統組培低50%左右，組培苗質量提高。本發明方法簡單，容易實施，所使用的裝置結構簡單，成本低廉，使用效果好。


附圖I為本發明的結構示意圖。
具體實施例方式
具體實施例方式二氧化碳氣肥培養瓶的結構如圖I所示，包括透明的瓶體4和瓶蓋3，在瓶蓋3頂部設有氣肥入孔I，在氣肥入孔I內裝有氣肥入孔旋蓋2，在氣肥入孔I的下方設有托盤5，托盤5與瓶蓋3底部連接。植物組培方法，在相對無菌的環境下，配制IL培養基需稱取瓊脂粉3. 5 5. 5g，將瓊脂粉加熱至充分溶解，然后按照培養階段加入除蔗糖以外的MS培養基各種元素，根據不同培養階段添加入對應的植物激素和抑菌劑3 5ml，按質量百分比濃度計算，所述的抑菌劑的包括煙堿I 5%、成熟蒜泥汁液2% 6%、50%的多菌靈及水；調整培養基pH值至5. 6
5.8，定容、分裝，獲得無糖培養基7 ;在接種室內，用質量百分比濃度為75%的酒精將接種臺面和手擦干凈，打開二氧化碳氣肥培養瓶的瓶蓋3，將無糖培養基7放入瓶體4中，平鋪在瓶體4底部，再將植物外植體6接種到無糖培養基7上，蓋上瓶蓋3并擰緊至密封狀態，將氣肥入孔旋蓋2左旋或者右旋90°，使氣肥入孔I打開，將粉狀的二氧化碳氣肥從氣肥入孔I中加入，二氧化碳氣肥通過氣肥入孔I落到托盤5上，再將氣肥入孔旋蓋2旋回，使氣肥入孔I關閉；二氧化碳氣肥的用量為0. 5 I. 0g/250ml。最后將培養瓶置于培養室，在光照條件下，二氧化碳氣肥釋放二氧化碳氣體供植物進行光合作用。操作過程使用的接種工具浸泡于無水乙醇中，每轉接一瓶外植體就用酒精燈灼燒一次接種工具；并在接種植物外植體前，將接種室用臭氧在夜間消毒2小時，然后用質量百分比為75%的乙醇進行降塵處理，并用紫外燈照射15 20分鐘；所述的相對無菌的環境是指將培養室每隔2個月用甲醛熏蒸處理一次。由于使用二氧化碳氣肥釋放的二氧化碳氣體代替糖作為植物生長所需的碳源，在開放的環境下，提供合適的光照、溫度、水分和營養物質條件，植物能夠通過光合作用提供自身生長發育所需的物質，使植物在培養瓶內生長的環境更接近于自然環境。無糖抑菌培養基由于不含糖，且培養基里由抑菌物質，在使各種微生物失去能源的同時，還遭受抑菌劑的抑制，從而解決了傳統組培、開放組培和無糖組培過程中氣體環境差、易污染、組培苗質量差等問題 。
權利要求
1.ー種植物組培方法，其特征在于在相對無菌的環境下，配制IL培養基需稱取瓊脂粉3. 5 5. 5g，將瓊脂粉加熱至充分溶解，然后按照培養階段加入除蔗糖以外的MS培養基各種元素，根據不同培養階段添加入對應的植物激素和抑菌劑3 5ml，調整培養基pH值至5.6 5. 8，定容、分裝，獲得無糖培養基；在接種室內，用質量百分比濃度為75%的酒精將接種臺面和手擦干凈，將無糖培養基放入ニ氧化碳氣肥培養瓶中，再將植物外植體接種到無糖培養基上，將ニ氧化碳氣肥放入ニ氧化碳氣肥培養瓶后，使ニ氧化碳氣肥培養瓶密閉；ニ氧化碳氣肥的用量為O. 5 I. 0g/250ml。
2.根據權利要求I所述的植物組培方法，其特征在于接種工具浸泡于無水こ醇中，每轉接ー瓶外植體就用酒精燈灼燒一次接種工具。
3.根據權利要求I所述的植物組培方法，其特征在于所述的相對無菌環境是指，在接 種植物外植體前，將接種室用臭氧發生器在夜間消毒2小時，在接種前用質量百分比為75%的こ醇進行降塵處理，并用紫外燈照射15 20分鐘；將培養室每隔2個月用甲醛熏蒸處理一次。
4.根據權利要求I所述的植物組培方法，其特征在于瓊脂粉在加熱過程中保持不沸騰，加熱時間為6 10分鐘。
5.根據權利要求I所述的植物組培方法，其特征在于按質量百分比濃度計算，所述的抑菌劑的包括煙堿I 5%、成熟蒜泥汁液2% 6%、50%的多菌靈及水。
6.ー種用于權利要求I所述的植物組培方法的ニ氧化碳氣肥培養瓶，包括透明的瓶體(4)和瓶蓋(3)，其特征在于在瓶蓋(3)頂部設有氣肥入孔(1)，在氣肥入孔(I)內裝有氣肥入孔旋蓋(2)，在氣肥入孔(I)的下方設有托盤(5)，托盤(5)與瓶蓋(3)底部連接。
全文摘要
本發明公開了一種植物組培方法及裝置，在相對無菌的環境下，配制1L培養基需稱取瓊脂粉3.5～5.5g，將瓊脂加熱至充分溶解，然后按照培養階段加入除蔗糖以外的各種元素，將培養基調整pH值至5.6～5.8，定容、分裝，獲得無糖培養基；在接種室內，用質量百分比濃度為75%的酒精將接種臺面和手擦干凈，將無糖培養基放入二氧化碳氣肥培養瓶中，再將植物外植體接種到無糖培養基上，將二氧化碳氣肥放入二氧化碳氣肥培養瓶后，使二氧化碳氣肥培養瓶密閉；二氧化碳氣肥的用量為0.5～1.0g/250ml。本發明利用二氧化碳氣體代替培養基中的蔗糖，為植物提供光合作用所需的碳源，同時在培養基中添加抑菌劑來抑制微生物的污染，以達到抑菌殺菌、簡化操作及提高組培苗質量的多重效果。
文檔編號A01H4/00GK102668990SQ20121019413
公開日2012年9月19日 申請日期2012年6月13日 優先權日2012年6月13日
發明者劉鵬飛, 盧加舉, 張志勇, 張正學, 彭仕榮, 李向勇, 査蘭松, 王健, 蒙秋伊, 雷石富, 黃先群 申請人:貴州省亞熱帶作物研究所