專利名稱：粘質沙雷氏菌在防治白蟻中的應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于生物領域，尤其涉及粘質沙雷氏菌在防治白蟻中的應用。
背景技術：
白蟻是地球上最古老的社會性昆蟲，具有生殖力強，存活力高，破壞性大的特點。其分布于除南極洲以后的六大洲，主要分布在以赤道為中心，南北緯度45度之間。在我國，白蟻的種類已知的有476種，危害房屋建筑的種類有70多種，主要的蟻害種類有19種。白蟻在我國的分布主要在淮河以南，向北逐漸減少，向南邊逐漸增多，我國大部分省均有分布的記錄。目前，白蟻的防治以化學防治為主。由于白蟻為社會性昆蟲，化學防治難以達到根 除白蟻的作用。而且，多種白蟻危害房屋建筑，和人類的生活環境密切相關，化學防治會對人類的身體健康帶來不良影響。伴隨著科學技術的發展，人類對生態環境平衡的日益關注，生物防治技術的發展受到越來越多的重視。生物防治技術相比于化學防治方法對環境和人體健康的危害以及在持續控制病害方面有長足的進步。害蟲綜合管理(IPM)概念的提出完善與推廣使用生物防治技術的重要性和可行性已經逐漸的被人們接受并應用于生產實踐中。

發明內容
基于以上背景技術，本發明涉及一種白蟻的生物防治方法。為了實現本發明的目的，擬采用如下技術方案粘質沙雷氏菌在防治白蟻中的應用，優選地，本發明的粘質沙雷氏菌保藏編號為CGMCC NO. 6325。本發明另外一方面還涉及一種防治白蟻的藥劑，其特征在于含有粘質沙雷氏菌作為活性成分。此外，本發明還涉及粘質沙雷氏菌的關鍵生產技術，其特征在于將粘質沙雷氏菌接種在液體培養基中，然后將其置于搖床10°C _40°C，100-600轉/分鐘轉速，密閉遮光培養5-60小時，優選置于搖床28°C，200轉/分鐘轉速，密閉遮光培養36小時。按照本發明，通過試驗驗證，達到了以下有益技術效果(I)達到了對白蟻較好的殺滅作用。不僅對接觸到的白蟻效果較好，而且由于粘質沙雷氏菌在白蟻之間可以互相感染，對蟻穴中的其他白蟻也能達到較好的防效。(2)本發明作為生物防治，避免了化學防治的環境污染，避免了對人體健康的影響。
具體實施例方式實施例1粘質沙雷氏菌生產制備技術供試材料
粘質沙雷氏菌菌種來源采自感染粘質沙雷氏菌的白蟻(采自南京林業大學校園)，米用下面的培養基培養，每年移菌一次，該菌株被命名為粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens),并于2012年8月15日被保藏在中國微生物菌株保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCN0. 6325。白蟻采自南京林業大學校園，采回室內后25±1°C，黑暗培養。細菌培養基配方細菌固體培養基配方牛肉膏蛋白胨培養基牛肉膏3克，蛋白胨5克，氯化鈉5克，瓊脂18克，水1000毫升，pH 至 7. 2-7.4 細菌液體培養基配方牛肉膏3克，蛋白胨5克，氯化鈉5克，水1000毫升，pH至7. 2-7. 4。固體培養基接菌在無菌操作臺中接種。接種完成后，將試管豎直放入28°C的溫箱中培養48h，放入冰箱4°C保存；平板培養基倒置放入28 °C溫箱中培養。液體培養基接菌在無菌操作臺中用接種環取粘質沙雷氏菌接種在液體培養基中，然后將其置于搖床28°C，200轉/分鐘轉速，密閉遮光培養36h。實施例2 :粘質沙雷氏菌防治白蟻效果測定液體培養基稀釋:將液體培養基原液分別稀釋為2-^212^2-4和2_5稀釋度的溶液。測OD 倌:在分光光度計600nm波長下測得各濃度溶液的OD值。測溶液濃度將各濃度的溶液分別稀釋為10_7、10_8和10_9稀釋度的溶液。用無菌吸管按無菌操作分別吸取各稀釋液O.1mL加入到培養皿中，用無菌玻璃刮棒將菌液涂抹均勻，平放于桌上20-30分鐘，使菌液滲入培養基表層內，然后倒置于28°C溫箱培養24h，重復3次。計數每毫升含菌數=每稀釋度平均菌落數X IOX稀釋倍數逾定每培養皿放10頭白蟻，用O. 04 μ L微量點滴儀分別將各濃度菌液滴定到白蟻前胸背板上，重復3次，以清水為對照。具體用藥方法不限如此，也可以采用噴霧的方式。觀察:記錄白蟻的死亡數量。當對照死亡率為20%時結束觀察。數據處理利用SPSS13. O統計分析軟件進行數據處理，求出菌液對白蟻的LD5tl和95%置信限。結果與分析OD倌與粘質沙雷氏菌數量的關系從表I可以看出，在一定的范圍內，隨著粘質沙雷氏菌數量的增加，其OD6tltl也增力口。0D_值與粘質沙雷氏菌數量呈線性相關，方程為
y = 3. 8771x-0. 3732 (R2 = O. 993)。因此，可以根據此方程，利用菌液OD6tltl值求得菌液的菌數量。表1:0D600值與粘質沙雷氏菌數量的關系
權利要求
1.粘質沙雷氏囷在防治白蟻中的應用，優選地，粘質沙雷氏囷保減編號為CGMCCNO. 6325。
2.一種防治白蟻的藥劑，其特征在于含有粘質沙雷氏菌作為活性成分，優選地，粘質沙雷氏菌保藏編號為CGMCC NO. 6325。
3.權利要求1所述的粘質沙雷氏菌的培養方法，其特征在于將粘質沙雷氏菌接種在液體培養基中，然后將其置于搖床10°C -40°C, 100-600轉/分鐘轉速，密閉遮光培養5_60小時，優選置于搖床28°C，200轉/分鐘轉速，密閉遮光培養36小時。
4.根據權利要求3所述的培養方法，其特征在于所述的液體培養基包括牛肉膏2-4重量份克，蛋白胨4-6重量份，氯化鈉4-6重量份，水1000重量份，液體培養基的pH介于·7.2-7. 4 之間。
全文摘要
本發明公開了粘質沙雷氏菌在防治白蟻中的應用及關鍵制備技術，粘質沙雷氏菌保藏編號為CGMCC NO.6325。本發明公開的粘質沙雷氏菌，對白蟻具有較好的殺滅作用，又不污染環境，具有綠色高效的特點。
文檔編號A01N63/00GK102986736SQ201210398930
公開日2013年3月27日 申請日期2012年10月19日 優先權日2012年10月19日
發明者湯方, 李生臣 申請人:湯方, 李生臣