專利名稱：無籽刺梨種苗快速擴繁的方法
無籽刺梨種苗快速擴繁的方法技術領域
本發明屬于植物組織培養中的一項苗木生產應用技術，主要是通過反復誘導無籽刺梨腋芽來進行快速培育組培苗的方法。
背景技術：
無籽刺梨(愈sa俗稱搭鉤刺梨，為貴州特有種，屬薔薇科攀援性多年生常綠灌木，高4-6m，生長強旺。小枝和葉柄紫紅色，具稀少彎曲的皮刺，被灰白色絨毛。羽狀復葉，具小葉7-9枚，小葉橢圓形或倒卵狀橢圓形，長1. 5-3. 5厘米，寬1-2. 5厘米，先端急尖或鈍，基部近圓形，兩側不對稱，兩面無毛，托葉附生于葉柄上，披針形。花3-5朵組成傘房花序，頂生。果實扁球形，徑約2厘米，灰棕色，疏被刺。成熟果暗橙黃色，果面皮刺基本脫落。由于無籽刺梨的雄蕊敗育，幾乎沒有花粉，因此種子敗育，無籽，故叫做無籽刺梨。無籽刺梨人工種植后，一般第三年便可掛果，成熟的刺梨果肉肥厚、味酸甜，其果實內含有豐富的維生素C，被稱為“維C之王”，因其食補、藥補功效明顯，又被稱為“延年果”，是加工保健食品的上等原料，具有多種醫療保健作用，鮮食加工均宜。
此外，無籽刺梨生長快，根系發達，適宜山地造林，特別是山區可作為重要的經濟樹種進行開發，有效帶動當地百姓致富。由于無籽刺梨屬野生資源，分布范圍窄，資源較少，無法通過種子繁殖，所以自然繁殖較慢。采用傳統的扦插方法進行無籽刺梨的種苗繁育，其繁殖速度相對較慢，需要的材料多；特別是對于優良無性系材料的擴繁，材料數量少，短時間內很難大量擴繁，不能有效的滿足企業及種植戶對優質種苗的需求，采用組培的方法其繁殖系數達3-4倍，有效解決了無籽刺梨優良材料快速擴繁的問題，從而使得優良無性系材料能夠大面積推廣，為高產奠定堅實的基礎。發明內容
本發明的目的在于提供一種遺傳性狀穩定、培養過程簡單、易生根，移栽容易成活的無籽刺梨快速擴繁的方 法。
本發明是一種無籽刺梨種苗快速擴繁的方法，按下列步驟實施(1)腋芽誘導的啟動培養，選取優良的無籽刺梨的當年生嫩莖，將嫩莖先用流水沖洗 10-15分鐘后，剪成5cm長的莖段進行消毒，消毒采用75%的酒精和O. 1%升汞組合消毒，酒精30秒，升汞8-12分鐘，消毒后用無菌水沖洗3-4遍，用消毒過的濾紙吸干莖段上的水分， 再將其切成帶I個葉腋的莖段，斜插在腋芽啟動培養基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，啟動培養基為MS+6-BA0. 5-2. 0mg/L+IBA0. 1-0. 3mg/L, 10天后從葉腋處位置誘導出腋芽，繼續培養，整個啟動培養的條件均為光強1000-2000LUX，光照時間12小時/ 天，溫度在23-26 °C間；(2)腋芽的增殖誘導，當腋芽長高成4厘米以上的小苗后，將其切成2厘米長的莖段， 每段帶1-3個葉腋，然后斜插在腋芽增殖培養基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，增殖培養基為MS+ZT1. 0-1. 5mg/L+IBA0. 05-0. lmg/L, 15天后，誘導出腋芽，同時在腋芽基部會誘導出1-3個不定芽小苗，再經過30天的培養，待小苗長到4厘米高，再將小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段轉到相同的腋芽增殖培養基上，經過45天的培養，誘導出來的小苗又可長高到4-5厘米，反復將高4-5厘米的小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段在增殖培養基上進行增殖培養，可以使得無籽刺梨進行快速大量的擴繁，其增殖倍數為3-4倍，整個腋芽增殖培養的條件均為光強1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在23-26。。間；
(3)無籽刺梨組培苗的生根，將長高到4厘米的小苗轉接到生根培養基上，生根培養基為1/2MS+IBA0. 01-0. 05mg/L +ΙΑΑ0. 01-0. 05mg/L, 15天后可生根，得到無籽刺梨生根苗，生根率達95%以上，整個生根培養的條件均為光強1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在 23-26。。間；
(4)無籽刺梨生根苗的清洗及移栽當無籽刺梨生根苗的根長到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗凈沾附在根部的培養基，之后進行煉苗移栽，移栽基質配比為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1，移栽后注意棚內控溫控濕，溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15·天后成活，成活率達90%以上，成活后移至IOcmX IOcm的營養袋中，移栽基質為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1。該方法結合了組培技術及扦插技術，利用在組培過程中的無菌環境，采用微型扦插的方法，首先從無籽刺梨的葉腋處誘導出腋芽，不必經過脫分化和再分化，當試管苗長大伸長后，將其剪成帶I葉或2葉的莖段，一定時間后腋芽萌發，同時腋芽也會萌生出1-2個小芽，之后莖伸長，下端不生根。爾后再將莖切成小段，利用腋芽萌發成植株，這樣周而復始繼代培養繁殖苗木。該方法和扦插繁殖一樣，不過是在無菌條件下的試管內進行，由于沒有經過脫分化和再分化階段，每次轉苗可增加2-4倍。它具有遺傳性狀穩定、培養過程簡單、易生根，移栽容易成活的優點。
具體實施例方式實施例1:實施時間為2012年，無籽刺梨組培苗批量生產在昆明美蘭花卉種苗有限責任公司進行。按下列步驟實施
(I)腋芽誘導的啟動培養，于2012年3月選取優良的無籽刺梨的當年生嫩莖，啟動培養基為MS+6-BA1. 0mg/L+IBA0. lmg/L，消毒后共接種2000瓶，每瓶接種I個葉腋，莖段長度2厘米。10天后從葉腋處位置誘導出腋芽，去除污染后，腋芽誘導率90%以上，20天后腋芽長至4厘米以上，進行一下步操作。啟動培養條件為光強1000-2000LUX，光照時間12小時/天，溫度在23-26°C間。(2)腋芽的增殖誘導，當腋芽長高到4厘米以上后，將其再切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段，接種于增殖培養基上，增殖培養基為MS+ZT1. 0mg/L+IBA0. 05mg/L。培養15天后，在誘導出腋芽的同時，在腋芽基部會誘導出2個不定芽小苗，待小苗長到4厘米以上后，再將小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段轉到相同的增殖培養基上，重復腋芽的增殖培養過程，使得無籽刺梨進行快速大量的擴繁，其增殖系數為3。培養條件為光強1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在23_26°C間。(3)無籽刺梨組培苗的生根。2012年10月開始對小苗進行生根，生根培養基為1/2MS+IBA0. Olmg/L +IAAO. Olmg/L，15天后生根率達98%以上，培養條件為光強 1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在23_26°C間。
(4)無籽刺梨生根苗的清洗及移栽當根長到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗 凈后進行煉苗移栽，棚內溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15天后小苗開始生長， 成活率達99%以上，I個月后，轉到營養袋中，營養袋規格為IOcmX 10cm，再養護3個后，苗高20厘米以上，進行上山造林。
權利要求
1.一種無籽刺梨種苗快速擴繁的方法，其特征在于包括腋芽誘導、組培苗生根、生根苗移栽等步驟，具體是 (1)腋芽誘導的啟動培養，選取優良的無籽刺梨的當年生嫩莖，將嫩莖先用流水沖洗10-15分鐘后，剪成5cm左右的莖段進行消毒，消毒采用75%酒精和O. 1%升汞組合消毒，酒精30秒，升汞8-12分鐘，消毒后用無菌水沖洗3-4遍，用消毒過的濾紙吸干莖段上的水分，再將其切成帶I個葉腋的莖段，斜插在腋芽啟動培養基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，啟動培養基為MS+6-BA0. 5-2. 0mg/L+IBA0. 1-0. 3mg/L, 10天后從葉腋處位置誘導出腋芽，繼續培養，整個啟動培養的條件均為光強1000-2000LUX，光照時間12小時/天，溫度在23-26 °C間； (2)腋芽的增殖誘導，當腋芽長高成4厘米以上的小苗后，將其切成2厘米長的莖段，每段帶1-3個葉腋，然后斜插在腋芽增殖培養基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，增殖培養基為MS+ZT1. 0-1. 5mg/L+IBA0. 05-0. lmg/L, 15天后，誘導出腋芽，同時在腋芽基部會誘導出1-3個不定芽小苗，再經過30天的培養，小苗可長到4厘米高，之后再將小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段轉到相同的腋芽增殖培養基上，經過45天的培養，誘導出來的小苗又可長高到4-5厘米，反復將高4-5厘米的小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段在增殖培養基上進行增殖培養，其增殖倍數為3-4倍，整個腋芽增殖培養的條件均為光強1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在23_26°C間； (3)無籽刺梨組培苗的生根，將長高到4厘米的小苗轉接到生根培養基上，生根培養基為1/2MS+IBA0. 01-0. 05mg/L +ΙΑΑ0. 01-0. 05mg/L, 15天后可生根，得到無籽刺梨生根苗，整個生根培養的條件均為光強1000-2000Lux，光照時間12小時/天，溫度在23_26°C間； (4)無籽刺梨生根苗的清洗及移栽當無籽刺梨生根苗的根長到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗凈沾附在根部的培養基，之后進行煉苗移栽，移栽基質配比按體積比為腐殖土 珍珠巖=5 :1，移栽后注意棚內控溫控濕，溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15天后成活，成活后移至IOcmXlOcm的營養袋中，移栽基質為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1。
全文摘要
本發明涉及一種植物無性繁殖苗木的方法，特別是一種無籽刺梨種苗快速擴繁的方法，按以下步驟進行1.腋芽誘導啟動培養階段；2.腋芽快速增殖階段，將伸長的腋芽切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段，接種于增殖培養基上，進行增殖培養，待小苗長高到4厘米以上后，再將小苗切成2厘米長帶1-3個葉腋的莖段進行腋芽增殖誘導，重復2此過程便可進行無籽刺梨的大量擴繁；3.組培生根煉苗移栽階段，將獲得的增殖苗接種于生根培養基后，待根系長至2-3厘米后，洗凈根上的培養基，移栽到煉苗基質(腐殖土珍珠巖=51)中，成活后移至營養袋中。煉苗4個月后，可直接用于造林。該方法操作簡單，增殖系數穩定，苗木質量有保證，可以有效地滿足工廠化生產需求。
文檔編號A01H4/00GK102986535SQ20121054199
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月14日 優先權日2012年12月14日
發明者李永和, 唐軍榮, 辛靜, 辛培堯, 林 源 申請人:西南林業大學