專利名稱：一種無籽刺梨的栽培方法
技術領域：
本發明屬于植物栽培技術領域，特別是涉及一種無籽刺梨的栽培方法。
背景技術：
安順無籽刺梨(安順金刺梨)屬薔薇科落葉灌木，是普通刺梨的近緣種，植株高約2米，具有攀援性，多分枝，冠幅達4一6米，在植物學特征上與貴州繅絲花很相似，親緣關系很接近。無籽刺梨平均單果重5-9g，最大單果重可達12g，果皮黃褐色、密生小刺，成熟時小刺極易脫落，果肉呈艷麗的橙黃色，肥厚脆嫩。其雄蕊高度敗育，花藥干癟，無花粉，偶爾出現1-2粒瘦果種子。無籽刺梨營養成分豐富，果實含糖量較高，經分析測定，是普通刺梨的6倍以上，含酸較低，幾無單寧，富含維生素C，SOD等抗氧化酶，胡蘿卜素含量較高，含鈣、鋅等多種礦物質營養元素及人體所需的多種氨基酸。金刺梨不但具有生津、提神、開胃的功效，還具有自然輔助腸道消化，提高人體維C含量的功能，對老弱病患者而言，更是開胃增進食欲，通便促進新成代謝的補品，含有豐富的維生素C，被稱為“維C之王”。其食補、藥補功效明顯，所以我們稱為‘延年果’，對人體延年益壽的功效名副其實。且果實酸甜適宜、極少澀味，口感明顯優于普通刺梨，市場前景廣。無籽刺梨因其枝條易產生不定根，形成不定芽，目前普遍采用扦插的方法進行繁殖育苗。近年來，組織培養技術在果樹快速育苗和培養無病毒苗方面均有廣泛的應用，但對于無籽刺梨的組培方面存在有繁殖系數低，生根率低，葉片再生困難等問題。

發明內容
針對上述問題，本發明提供以一種無籽刺梨的栽培方法，采用刺梨莖尖作為外植體進行培養，能效的提高繁殖系數及`生根率，解決葉片再生困難等問題。為解決上述問題，本發明采取的技術方案為:—種無籽刺梨的栽培方法，其特征在于，以優良無籽刺梨單株的莖尖作為外植體，按下述步驟進行繁殖和栽培:I)將采集來的莖尖用清水沖洗干凈，置于75-78%的酒精中浸泡20_30s，再用5_7%次氯酸鈉溶液浸泡6-10min，然后用無菌水沖洗3_5次,然后在超凈工作臺上對莖尖進行修剪，減去經藥液浸過的傷口端，將修剪好的莖尖插入滅菌后的誘導培養基上進行試管苗誘導培養，培養溫度為22-25°C、濕度65%—85%、光照強度1000— 20001x、光照時間8_10h/d，培養時間為28-30d ；2)待試管苗成苗后置于滅菌后的生根培養基上進行生根培養，在培養溫度為22-28 °C、濕度60%—80%、光照強度2000— 30001x、光照時間10_15h/d的環境中培養28-34d，使其長成完整的試管苗；3)將試管苗假植到裝有珍珠巖粉的小缽內，澆水后將其移入塑料小拱棚內培養
10-15天，培養溫度為25-28°C、濕度65%—85%、光照強度2000— 35001x、光照時間10_15h/d ；4)把珍珠巖粉小缽內的組培苗移栽到鋪有經過消毒的腐植土箱床上，澆透水，置于塑料小拱棚內培育8-12d，培養溫度為25-28°C、濕度60%—70%、光照強度2500—40001x、光照時間12-18h/d ；5)去掉小拱棚，將組培苗在培養溫度為25_30°C、濕度55%—70%、光照強度3000—42001x、光照時間10-15h/d的環境中培養30-32d，然后移栽到露地苗圃中。進一步，所述的步驟I)中的誘導培養基為:MS作為基本培養基，附加0.6-1.0mg/L 的 6-ΒΑ、0.I 0.35mg/L 的 IBA,0.8 3.5mg/L 的 GA、15 30g/L 的蔗糖、5 12g/L 的瓊脂，培養基PH值為5.5-6.5。進一步，所述的步驟I)中修剪的莖尖長度為:0.5-lcm。進一步，所述的步驟2)中的生根培養基為:MS作為基本培養基，附加0.5 1.2mg/L的IBA、40 80g/L的蔗糖、5 12g/L的瓊脂，培養基pH值為6.0-6.5。進一步，所述的步驟2)中生根培養后的試管苗長1.5-3cm，試管苗的根為1-14條，根長為1.5_3cm。將組培苗移植到排水良好，土層深厚、肥沃的壤土上種植；然后做好施肥管理和田園管理工作，對栽培植物進行適時的修剪和除蟲工作，保證無籽刺梨的優良長勢。在果實完熟、果皮由綠開始轉為黃紅色時采收。采收后放入篩子或竹筐中篩去毛刺，以提高商品性。本發明的有益效果為:本發明應用組織培養的手段，克服梨苗常規育種周期長，扦插繁殖系數低等特點，通過組織培養能夠獲得大量遺傳性狀穩定的試管苗，保持良好的親本特性，而且取材容易，變異率低、增殖系數高，生根率達90%，大大提高了繁殖速度，且繁殖方法性能穩定，試驗重 復性好，試管苗分化良好，投入少，周期短，極大的促進了無籽刺梨的栽種，促進了無籽刺梨的市場推廣。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步描述，在此發明的示意性實施例以及說明用來解釋本發明，但并不作為對本發明的限定。實施例1制備培養基并滅菌:A誘導培養基:MS作為基本培養基，附加0.8mg/L的6_BA、0.25mg/L的IBA、2mg/L的GA、25g/L的蔗糖、8g/L的瓊脂，培養基pH值為6.0。B生根培養基:MS作為基本培養基，附加0.7mg/L的IBA、60g/L的蔗糖、10g/L的瓊脂，培養基PH值為6.2。I)將采集來的莖尖用清水沖洗干凈，置于76%的酒精中浸泡25s，再用6%次氯酸鈉溶液浸泡8min，然后用無菌水沖洗4次，然后在超凈工作臺上對莖尖進行修剪，減去經藥液浸過的傷口端，莖尖長度為0.8cm，將修剪好的莖尖插入滅菌后的誘導培養基上進行試管苗誘導培養，誘導培養基的培養溫度為23°C、濕度70%、光照強度15001x、光照時間9h/d，培養時間為29d ；2)待試管苗成苗后置于滅菌后的生根培養基上進行生根培養，在培養溫度為26°C、濕度70%、光照強度25001x、光照時間13h/d的環境中培養30d，使其長成完整的試管苗，生根培養后的試管苗長2-2.5cm，試管苗的根為5-10條，根長為1.5-3cm。；3)將試管苗假植到裝有珍珠巖粉的小缽內，澆水后將其移入塑料小拱棚內培養13天，培養溫度為27°C、濕度75%、光照強度30001x、光照時間13h/d ；4)把珍珠巖粉小缽內的組培苗移栽到鋪有經過消毒的腐植土箱床上，澆透水，置于塑料小拱棚內培育10d，培養溫度為26°C、濕度65%、光照強度32001x、光照時間16h/d ；5)去掉小拱棚，將組培苗在培養溫度為26°C、濕度65%、光照強度34001x、光照時間13h/d的環境中培養30d，然后移栽到露地苗圃中。將組培苗在排水良好，土層深厚、肥沃的壤土上種植。按4X 3米行株距挖定植穴，定植穴長、寬均為80厘米，深50厘米。挖坑時，表土與心土分開，回填時將表土回填入坑，并與土雜肥30公斤、0.5公斤復混肥拌勻，然后再覆蓋10厘米厚的細土，繼續回填并推土，堆土高出地面20厘米。于11月下旬至次年2月中旬定植，每畝種植80株。定植時，在回填好的定植坑中心挖12厘米的淺坑，將苗木置于坑中央，整理根系均勻分布，植入細土，再將苗木略向上提，使其根系伸展開，邊填土邊踩壓緊土壤，栽種完畢，澆透定根水，加強管理，以保存活。一年施用基肥I次，追施3次。基肥選用腐熟的有機肥，適當配加一定量得復混，每畝果園施用有機肥1200kg、復混肥45kg。在2月份抽梢前追施一次,每畝施用20kg,噴施
0.4%磷酸二氫鉀I次。·在無籽刺梨生長過程中，注意對樹形進行修剪以及蟲害的防治。在果實完熟、果皮由綠開始轉為黃紅色時采收。采收后放入篩子或竹筐中篩去毛刺，以提高商品性。實施例2制備培養基并滅菌:A誘導培養基:MS作為基本培養基，附加0.6mg/L的6_BA、0.lmg/L的ΙΒΑ、0.8mg/L的GA、15g/L的蔗糖、5g/L的瓊脂，培養基pH值為5.5。B生根培養基:MS作為基本培養基，附加0.5mg/L的IBA、40g/L的蔗糖、5g/L的瓊月旨，培養基PH值為6.0。I)將采集來的莖尖用清水沖洗干凈，置于75%的酒精中浸泡30s，再用5%次氯酸鈉溶液浸泡6min，然后用無菌水沖洗3次，然后在超凈工作臺上對莖尖進行修剪，減去經藥液浸過的傷口端，莖尖長度為0.5cm，將修剪好的莖尖插入滅菌后的誘導培養基上進行試管苗誘導培養，誘導培養基的培養溫度為22°C、濕度65%、光照強度ΙΟΟΟΙχ、光照時間8h/d，培養時間為28d ；2)待試管苗成苗后置于滅菌后的生根培養基上進行生根培養,在培養溫度為22°C、濕度60%、光照強度20001x、光照時間10h/d的環境中培養28d，使其長成完整的試管苗，生根培養后的試管苗長1.5-2.0cm，試管苗的根為1-8條，根長為1.5-3cm。；3)將試管苗假植到裝有珍珠巖粉的小缽內，澆水后將其移入塑料小拱棚內培養10天，培養溫度為25°C、濕度65%、光照強度20001x、光照時間10h/d ；4)把珍珠巖粉小缽內的組培苗移栽到鋪有經過消毒的腐植土箱床上，澆透水，置于塑料小拱棚內培育8d，培養溫度為25°C、濕度60%、光照強度25001x、光照時間12h/d ；5)去掉小拱棚，將組培苗在培養溫度為25°C、濕度55%、光照強度30001x、光照時間10h/d的環境中培養31d，然后移栽到露地苗圃中。
將組培苗在排水良好，土層深厚、肥沃的壤土上種植。按4X3米行株距挖定植穴，定植穴長、寬均為80厘米，深50厘米。挖坑時，表土與心土分開，回填時將表土回填入坑，并與土雜肥25公斤、0.5公斤復混肥拌勻，然后再覆蓋10厘米厚的細土，繼續回填并推土，堆土高出地面20厘米。于11月下旬至次年2月中旬定植，每畝種植80株。定植時，在回填好的定植坑中心挖12厘米的淺坑，將苗木置于坑中央，整理根系均勻分布，植入細土，再將苗木略向上提，使其根系伸展開，邊填土邊踩壓緊土壤，栽種完畢，澆透定根水，加強管理，以保存活。一年施用基肥I次，追施3次。基肥選用腐熟的有機肥，適當配加一定量得復混，每畝果園施用有機肥1500kg、復混肥50kg。在2月份抽梢前追施一次,每畝施用30kg,噴施
0.5%磷酸二氫鉀I次。在無籽刺梨生長過程中，注意對樹形進行修剪以及蟲害的防治。在果實完熟、果皮由綠開始轉為黃紅色時采收。采收后放入篩子或竹筐中篩去毛刺，以提高商品性。實施例3制備培養基并滅菌:A誘導培養基:MS作為基本培養基，附加1.0mg/L的6_BA、0.35mg/L的ΙΒΑ、3.5mg/L的GA、30g/L的蔗糖、12g/L的瓊脂，培養基pH值為6.5。B生根培養基:MS作為基本培養基，附加1.2mg/L的IBA、80g/L的蔗糖、12g/L的瓊脂，培養基PH值為6.5。I)將采集來的莖尖用清水沖洗干凈，置于78%的酒精中浸泡20s，再用7%次氯酸鈉溶液浸泡lOmin，然后用無菌水沖洗5次，然后在超凈工作臺上對莖尖進行修剪，減去經藥液浸過的傷口端，莖尖 長度為1cm，將修剪好的莖尖插入滅菌后的誘導培養基上進行試管苗誘導培養，誘導培養基的培養溫度為25°C、濕度85%、光照強度20001x、光照時間10h/d，培養時間為30d ；2)待試管苗成苗后置于滅菌后的生根培養基上進行生根培養,在培養溫度為28°C、濕度80%、光照強度30001x、光照時間15h/d的環境中培養34d，使其長成完整的試管苗，生根培養后的試管苗長2_3cm,試管苗的根為5-14條,根長為1.5_3cm。；3)將試管苗假植到裝有珍珠巖粉的小缽內，澆水后將其移入塑料小拱棚內培養15天，培養溫度為28°C、濕度85%、光照強度35001x、光照時間15h/d ；4)把珍珠巖粉小缽內的組培苗移栽到鋪有經過消毒的腐植土箱床上，澆透水，置于塑料小拱棚內培育12d，培養溫度為28°C、濕度70%、光照強度40001x、光照時間18h/d ；5)去掉小拱棚，將組培苗在培養溫度為30°C、濕度70%、光照強度42001x、光照時間15h/d的環境中培養32d，然后移栽到露地苗圃中。將組培苗在排水良好，土層深厚、肥沃的壤土上種植。按3X2.5米行株距挖定植穴，定植穴長、寬均為80厘米，深50厘米。挖坑時，表土與心土分開，回填時將表土回填入坑，并與土雜肥20公斤、0.5公斤復混肥拌勻，然后再覆蓋10厘米厚的細土，繼續回填并推土，堆土高出地面20厘米。于11月下旬至次年2月中旬定植，每畝種植90株。定植時，在回填好的定植坑中心挖12厘米的淺坑，將苗木置于坑中央，整理根系均勻分布，植入細土，再將苗木略向上提，使其根系伸展開，邊填土邊踩壓緊土壤，栽種完畢，澆透定根水，加強管理，以保存活。
—年施用基肥I次，追施3次。基肥選用腐熟的有機肥，適當配加一定量得復混，每畝果園施用有機肥1000kg、復混肥40kg。在2月份抽梢前追施一次,每畝施用15kg,噴施
0.3%磷酸二氫鉀2次。在無籽刺梨生長過程中，注意對樹形進行修剪以及蟲害的防治。在果實完熟、果皮由綠開始轉為黃紅色時采收。采收后放入篩子或竹筐中篩去毛刺，以提高商品性。本發明的技術方案不限于上述具體實施例的限制，凡是根據本發明的技術方案做出的技術變形，均落入本發明的保護范圍之`內。
權利要求
1.一種無籽刺梨的栽培方法，其特征在于，以優良無籽刺梨單株的莖尖作為外植體，按下述步驟進行繁殖和栽培: 1)將采集來的莖尖用清水沖洗干凈，置于75-78%的酒精中浸泡20-30S，再用5_7%次氯酸鈉溶液浸泡6-10min，然后用無菌水沖洗3_5次，然后在超凈工作臺上對莖尖進行修剪，減去經藥液浸過的傷口端，將修剪好的莖尖插入滅菌后的誘導培養基上進行試管苗誘導培養，培養溫度為22-25°C、濕度65%—85%、光照強度1000— 20001x、光照時間8_10h/d，培養時間為28-30d ； 2)待試管苗成苗后置于滅菌后的生根培養基上進行生根培養，在培養溫度為22-28°C、濕度60%—80%、光照強度2000— 30001x、光照時間10_15h/d的環境中培養28_34d，使其長成完整的試管苗； 3)將試管苗假植到裝有珍珠巖粉的小缽內，澆水后將其移入塑料小拱棚內培養10-15天，培養溫度為25-28°C、濕度65%—85%、光照強度2000— 35001x、光照時間10_15h/d ； 4)把珍珠巖粉小缽內的組培苗移栽到鋪有經過消毒的腐植土箱床上，澆透水，置于塑料小拱棚內培育8-12d，培養溫度為25-28°C、濕度60%—70%、光照強度2500—40001x、光照時間 12-18h/d ； 5)去掉小拱棚，將組培苗在培養溫度為25-30°C、濕度55%—70%、光照強度3000—42001x、光照時間10-15h/d的環境中培養30-32d，然后移栽到露地苗圃中。
2.根據權利要求1所述的無籽刺梨的栽培方法，其特征在于:所述的步驟I)中的誘導培養基為:MS作為基本培養基，附加0.6-1.0mg/L的6_ΒΑ、0.I 0.35mg/L的IBA,0.8 3.5mg/L的GA、15 30g/L的蔗糖、5 12g/L的瓊脂，培養基pH值為5.5-6.5。
3.根據權利要求1所述的無籽刺梨的栽培方法，其特征在于:所述的步驟I)中修剪的莖尖長度為:0.5-lcm。
4.根據權利要求1所述的無籽刺梨的栽培方法，其特征在于:所述的步驟2)中的生根培養基為:MS作為基本培養基，附加0.5 1.2mg/L的IBA、40 80g/L的蔗糖、5 12g/L的瓊脂，培養基PH值為6.0-6.5。
5.根據權利要求1所 述的無籽刺梨的栽培方法，其特征在于:所述的步驟2)中生根培養后的試管苗長1.5_3cm,試管苗的根為1-14條,根長為1.5_3cm。
全文摘要
本發明公開一種無籽刺梨的栽培方法，以優良無籽刺梨單株的莖尖作為外植體，采用組織培養的方法培養出植物苗，然后將其移到苗圃中進行進一步的生長繁殖。本發明應用組織培養的手段，克服刺梨苗常規育種周期長，扦插繁殖系數低等特點，通過組織培養能夠獲得大量遺傳性狀穩定的試管苗，保持良好的親本特性，而且取材容易，變異率低、增殖系數高，生根率達90%，大大提高了繁殖速度，且繁殖方法性能穩定，試驗重復性好，試管苗分化良好，投入少，周期短，極大的促進了無籽刺梨的栽種，促進了無籽刺梨的市場推廣。
文檔編號A01H4/00GK103070070SQ201310010358
公開日2013年5月1日 申請日期2013年1月10日 優先權日2013年1月10日
發明者賀疆 申請人:普定縣元貞農業發展有限責任公司