專利名稱：一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊及其制備方法。
背景技術(shù)：
鹽生杜氏藻是一種營(yíng)養(yǎng)豐富均衡、生長(zhǎng)繁殖快的單細(xì)胞綠藻，是已知的最具嗜鹽特性的真核生物，其直徑僅有10-15 μ m，細(xì)胞內(nèi)含有多種對(duì)人體有益的物質(zhì)。鹽生杜氏藻可以利用廣闊的沿海灘涂進(jìn)行養(yǎng)殖，在對(duì)優(yōu)良藻種篩選后，藻粉中天然β_胡蘿卜素的含量可達(dá)14%。天然β_胡蘿卜素一般作為食品添加劑使用，以取代合成色素，β_胡蘿卜素本身又是維生素A原，近來(lái)發(fā)現(xiàn)，β-胡蘿卜素還能清除人體內(nèi)自由基，是一種良好的抗氧 化劑和氧化保護(hù)劑，起防癌、抗衰老、延年益壽等作用，β_胡蘿卜素在食品、醫(yī)學(xué)、保健等方面有著廣泛的用途。藻類的β_胡蘿卜素是一種天然制品，價(jià)格是化學(xué)合成品的兩倍。受到逆境脅迫的鹽生杜氏藻可被誘導(dǎo)合成大量β_胡蘿卜素，因此選用鹽生杜氏藻作為工業(yè)化生產(chǎn)β_胡蘿卜素的生物反應(yīng)器具有很大的潛力。該產(chǎn)品售價(jià)近600美元/公斤，估計(jì)每年有2億美元的市場(chǎng)。目前國(guó)際市場(chǎng)的天然β -胡蘿卜素供不應(yīng)求，價(jià)格在7000-10000元/公斤。澳大利亞、以色列、美國(guó)等已實(shí)現(xiàn)了鹽藻養(yǎng)殖的工業(yè)化，用來(lái)提取β_胡蘿卜素和甘油。由于β-胡蘿卜素分子中存在共軛雙鍵的結(jié)構(gòu)，對(duì)氧敏感而不穩(wěn)定的，特別是純的結(jié)晶產(chǎn)品更易被氧化破壞，另外，光輻射、高溫、酸、堿、游離鹵素、水分狀況等也會(huì)影響天然β_胡蘿卜素的穩(wěn)定性，導(dǎo)致天然β_胡蘿卜素本身不易保存，在酸堿熱紫外線等條件下極易遭到破壞，這給胡蘿卜素的運(yùn)輸、貯藏及其應(yīng)用帶來(lái)了極大的限制。微膠囊技術(shù)是一種利用天然或合成的高分子成膜材料作為壁膜壁殼，將固體或液體的活性物質(zhì)包埋并封存于一種微型膠囊內(nèi)成為一種固體微粒產(chǎn)品的技術(shù)。中國(guó)專利名稱為胡蘿卜素微囊粉及其制備工藝(申請(qǐng)?zhí)朇N95121363.6)公開了一種胡蘿卜素微囊粉及其制備工藝由胡蘿卜素、植物油、沒食子酸丙脂、明膠、淀粉、苯甲酸鈉六種物質(zhì)組成。把胡蘿卜素與沒食子酸丙脂和植物油做成的油相加入用明膠、淀粉、苯甲酸鈉、蒸餾水做成的水相中，經(jīng)乳化均質(zhì)后，再進(jìn)行噴霧干燥即做成β_胡蘿卜素微囊粉，具有含量高，微囊粉直徑小等特點(diǎn)。該方法以明膠、淀粉、苯甲酸鈉等為壁材制取微囊粉，生產(chǎn)過(guò)程中需要大量的合成乳化劑，會(huì)影響微膠囊的食用安全。中國(guó)專利名稱一種β-胡蘿卜素微囊粉及其制備方法(申請(qǐng)?zhí)朇N201010510779. 3)公開了一種β -胡蘿卜素微囊粉及其制備方法。β _胡蘿卜素微囊粉中各成分組成按重量百分比計(jì)算為β -胡蘿卜素3 6%、維生素C棕桐酸酯3 5%、食品級(jí)明膠30 45%、淀粉15 30%、維生素C鈉3 5%、大豆磷脂2 5%和蔗糖20 30%。其制備方法包括提取胡蘿卜素，有機(jī)相、水相溶液的配制并混合后經(jīng)超聲波高速剪切、高壓均質(zhì)乳化及噴霧干燥等步驟，最終得粒徑達(dá)到納米級(jí)的β_胡蘿卜素微囊粉，該微囊粉具有溶解時(shí)間短，穩(wěn)定不分層等特點(diǎn)。該方法過(guò)程復(fù)雜，使用了大量的明膠，容易造成粘度過(guò)大，兩項(xiàng)混合攪拌難以保證乳液的均勻，從而影響包埋效果，超聲波高速剪切和高壓均質(zhì)乳化會(huì)影響β —胡蘿卜素的質(zhì)量，導(dǎo)致β —胡蘿卜素被部分破壞。上述兩種專利均需采用噴霧干燥制備得到微囊粉，能耗均較制作微膠囊高。中國(guó)專利名稱為一種類β—胡蘿卜素微囊及其制備方法(申請(qǐng)?zhí)朇N200710011080.0)公開了一種類β —胡蘿卜素微囊及其制備方法，它是由下述原料按照重量比組成，類β —胡蘿卜素脂質(zhì)物質(zhì)囊材乳化劑水=1:1 一 20 :1 —20 1- 10 80 — 100，該微囊產(chǎn)品具有良好的對(duì)光熱穩(wěn)定性和水溶性或水分散性。類胡蘿卜素是β —胡蘿卜素、番茄紅素、葉黃素、蝦青素和玉米黃質(zhì)等物質(zhì)的混合物，由于各種成分用途不盡相同，相較β —胡蘿卜素單一物 質(zhì)，其應(yīng)用范圍受到了一定的限制。目前，國(guó)內(nèi)外還沒有關(guān)于利用鹽生杜氏藻制備β_胡蘿卜素微膠囊的方法的相關(guān)研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種簡(jiǎn)便、有效、食用安全、能耗低且能提高鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素穩(wěn)定性的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊及其制備方法。本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為一種鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊，以鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素提取液為芯材，以加乳化劑吐溫-80的海藻酸鈉為壁材，將芯材和壁材按體積比1:1-3的比例混合均勻后，加入到凝固劑氯化鈣中，經(jīng)固化、過(guò)濾和干燥處理后得到。一種鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊的制備方法，具體步驟如下
(1)芯材的制備將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的濃度為O.8X IO7 IX IO7個(gè)細(xì)胞/mL的鹽生杜氏藻液置于離心管中，5000rpm離心8_10min后，取固體沉淀物藻泥，按質(zhì)量體積比lg: 40ml的比例加入萃取液于離心管中，在震蕩儀上震蕩2-3 min，在功率450-550W、頻率20-24KHZ的超聲輔助下萃取8-12min,然后5000rpm離心5_10min,將上層萃取液轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中100°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸發(fā)25-35min后，取料液瓶，加石油醚定容于容量瓶中，得到質(zhì)量體積濃度濃度為l-10mg/L的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素溶液，作為芯材溶液，其中所述的萃取液為乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯、乙醇-正己烷和乙醇-氯仿中的任一種；
(2)壁材的制備以海藻酸鈉為溶質(zhì)，以水為溶劑，水浴加熱溶解后，加乳化劑吐溫80配制海藻酸鈉溶液，得到壁材溶液，其中所述的壁材溶液中海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為O. 5-2%，吐溫80的質(zhì)量濃度為4-10% ；
(3)芯材/壁材混合液的制備將芯材溶液和壁材溶液按體積比1:1-3的比例混合，得到芯材/壁材混合液；
(4)凝珠的制備以氯化鈣為溶質(zhì)，以水為溶劑，溶解后制備得到氯化鈣濃度為1-6%的凝固劑；將步驟(3)制備得到的芯材/壁材混合液用針頭勻速注射到凝固劑中，并用磁力攪拌器攪動(dòng)，待芯材/壁材混合液在凝固劑中形成小球珠后，將小球珠在固化溫度20-30°C下，靜置5-15 min后，獲得凝珠；
(5)微膠囊的制備將步驟(4)獲得的凝珠用干凈的紗布過(guò)濾除去凝固劑，將過(guò)濾后獲得的凝珠在常溫下干燥，即獲得鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊。步驟(I)中所述的萃取液為乙醇-氯仿提取液，所述的乙醇-氯仿提取液中乙醇和氯仿體積比為3:7。采用乙醇和氯仿按體積比3:7混合成的萃取液。β-胡蘿卜素的提取率最佳，β -胡蘿卜素的含量達(dá)27. 99ug/ml。步驟(I)中所述的超聲萃取時(shí)間為lOmin。步驟(2)中所述的海藻酸鈉濃度為1%，所述的吐溫80濃度為8%，所述的海藻酸鈉的加熱溶解采用100°c水浴。步驟(3)中所述的芯材溶液和所述的壁材溶液按體積比1:2的比例混合。按該比例混合鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊的包埋率最佳，達(dá)到70%。步驟(4)中所述的氯化鈣濃度為2%。步驟(4)中所述的針頭孔徑大小為O. 5-0. 6mm，所述的針頭注射速度為100-110滴
/分鐘。 步驟(4)中所述的磁力器攪拌速度為800rpm。步驟(4)中所述的固化溫度為25°C，靜置時(shí)間為10 min。步驟(5)中所述的過(guò)濾紗布的層數(shù)為3-5層。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于本發(fā)明公開了一種鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊及其制備方法，其以鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素提取液為芯材，以加乳化劑吐溫-80的海藻酸鈉為壁材，將芯材和壁材按一定比例混合均勻后，加入到凝固劑氯化鈣中，經(jīng)固化、過(guò)濾和干燥處理后得到，包括芯材的制備、壁材的處理、芯材/壁材混合液的制備、制珠、固化，最后過(guò)濾干燥，即獲得鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素微膠囊。微膠囊化天然β_胡蘿
卜素不僅可以保持其固有活性，又可以增強(qiáng)其穩(wěn)定性，克服自身易遭破壞的缺點(diǎn)，同時(shí)彌補(bǔ)其在水溶液中不易分散的不足，便于天然胡蘿卜素的應(yīng)用、運(yùn)輸和貯藏。優(yōu)點(diǎn)如下
1)本發(fā)明所使用的壁材海藻酸鈉，原料來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉，對(duì)人體無(wú)毒，為食品許可添加劑；
2)本發(fā)明的制備方法操作簡(jiǎn)單，路線合理，安全可靠，對(duì)操作人員專業(yè)素質(zhì)要求低，具有應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)的能力；
3)本發(fā)明制備的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊，包埋率為60 70%，大大提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，增強(qiáng)了其著色效果，擴(kuò)大了其使用范圍；
4)本發(fā)明制備的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊粒度均勻，具有較好的流動(dòng)性，便于貯藏和運(yùn)輸。綜上所述，本發(fā)明所述的制備鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊的方法采用合適的對(duì)人體無(wú)毒的包埋材料，不僅提高了胡蘿卜素的穩(wěn)定性，而且可通過(guò)微膠囊的緩釋作用來(lái)增強(qiáng)β_胡蘿卜素的生理功能。該制備方法操作簡(jiǎn)單，所用原料均為食品領(lǐng)域許可原料，不僅擴(kuò)大了其使用范圍，還有效地克服了鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素使用時(shí)存在的弊端，具有極大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。一、實(shí)驗(yàn)方法1、β_胡蘿卜素含量的測(cè)定方法
準(zhǔn)確稱取 β -胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品(Labor Dr. Ehren-storfer-Schafers , Augshurg 公司,German),用石油醚配制 lug/mL、2ug/mL、3ug/mL、4ug/mL、5ug/mL、6ug/mL、7ug/mL、8ug/mL、9ug/mL和lOug/mL的β-胡蘿卜素溶液共IO管，用紫外分光光度計(jì)測(cè)出I 10號(hào)管在450nm處的吸光值，其中每個(gè)濃度做3個(gè)平行。以吸光值為縱坐標(biāo)，胡蘿卜素溶液的濃度(ug/mL)為橫坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)樣品在450nm下測(cè)定吸光值，根據(jù)β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中β_胡蘿卜素的含量。2、包埋率的測(cè)定方法
微膠囊包埋率用間接法測(cè)定。微膠囊制作后，離心取上清，測(cè)定上清液中β_胡蘿卜素含量，用初始β_胡蘿卜素含量減去上清液β_胡蘿卜素含量可計(jì)算出微膠囊包埋的β_胡蘿卜素含量，再計(jì)算微膠囊的包埋率。包埋率％=(初始β_胡蘿卜素含量一上清液β_胡蘿卜素含量)/初始β_胡蘿卜素含量。
二、具體實(shí)施例 實(shí)施例1 本發(fā)明一種鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊，以鹽生杜氏藻胡蘿卜素提取液為芯材，以加乳化劑吐溫-80的海藻酸鈉為壁材，將芯材和壁材按一定比例混合均勻后，加入到凝固劑氯化鈣中，經(jīng)固化、過(guò)濾和干燥處理后得到，其制備方法具體包括以下步驟
(1)芯材的制備量取40ml處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的濃度為O. 8 X IO7-1 X IO7個(gè)細(xì)胞/mL的鹽生杜氏藻液放在50 ml大離心管中，5000rpm離心8min,去掉上清液,得到O.1g藻泥,取O.1g藻泥加入4 ml乙醇-氯仿(3:7，V/V)萃取液于離心管中，在震蕩儀上震蕩2_3 min,在功率500W、頻率20-24KHZ的超聲輔助下萃取lOmin，5000rpm離心5min，將上層液轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中100°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸發(fā)30min后，取下料液瓶，加石油醚定容于IOml容量瓶中，制得胡蘿卜素濃度為1-10 mg/L的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素母液，即制得芯材溶液；
(2)壁材的制備以海藻酸鈉為溶質(zhì)，以水為溶劑，水浴加熱溶解后，加乳化劑吐溫80配制海藻酸鈉溶液，得到壁材溶液，其中所述的壁材溶液中海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為1%，吐溫80的質(zhì)量濃度為8% ；
(3)芯材/壁材混合液的制備將芯材溶液和壁材溶液按1:2(V/V，體積比)比例混合，得到芯材/壁材混合液；
(4)凝固劑的制備以氯化鈣為溶質(zhì)，以水為溶劑，溶解后制備得到氯化鈣濃度為2%的凝固劑；
(5)制珠用O.6mm孔徑針頭將步驟(3)制備的芯材/壁材混合液以100-110滴/分鐘的注入速度勻速注射到步驟(4)制備的2%凝固劑中，并用磁力攪拌器以SOOrpm的速度攪動(dòng)；
(6 )固化待芯材/壁材混合液在凝固劑中形成小球珠后，將其放在25 °C下放置IOmin，
獲得凝珠；
(7)過(guò)濾干燥將步驟(6)獲得的凝珠用干凈的紗布過(guò)濾除去凝固劑，將過(guò)濾后獲得的凝珠在常溫下干燥，即獲得鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊。用該方法制取的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊成珠速度較快，形成的膠囊外形飽滿圓潤(rùn)，凝膠強(qiáng)度較好，顏色綠色，透明度好，膠囊上泡沫較少。實(shí)施例2
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于吐溫濃度為4%、6%或10%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊均顏色不均一，顏色發(fā)黃，透明度差，形狀不成圓形。吐溫80作為非離子型表面活性劑對(duì)微膠囊粒徑大小、微膠囊形態(tài)的影響非常重要。表面活性劑吐溫80可以增強(qiáng)Gibbs-Marangoni效應(yīng),增加膠囊的彈性或提高界面粘度,減少聚并,而吐溫濃度過(guò)高或過(guò)低均影響膠囊的形成，導(dǎo)致形狀變形。實(shí)施例3
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于海藻酸鈉溶液濃度為O. 5%、1. 5%或2%，海藻酸鈉溶液濃度為O. 5%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊顏色不均勻，形狀不均勻；海藻酸鈉溶液濃度為1. 5%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊形狀呈豆?fàn)睿缓Ｔ逅徕c溶液濃度為2%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊形狀呈豆?fàn)睿z強(qiáng)度較差；制備得到的鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素微膠囊外形呈蝌蚪狀，顏色淺黃，凝膠強(qiáng)度較差，原因是隨著海藻酸鈉濃度的增加，單位體積中凝聚物量增加，更易相互碰撞而聚集成不規(guī)則的狀態(tài)。 實(shí)施例4
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于凝固劑中氯化鈣濃度為1%、3%或6%，凝固劑中氯化鈣濃度為1%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊透明度較低；凝固劑中氯化鈣濃度為3%或6%時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊顏色發(fā)黃。凝固效果與凝固劑濃度和時(shí)間有關(guān)，凝固劑濃度過(guò)高，則乳狀液粘度過(guò)高，會(huì)產(chǎn)生均質(zhì)或破壞β_胡蘿卜素，導(dǎo)致顏色發(fā)黃。實(shí)施例5
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于針頭大小為O. 5mm、1. Omm或1. 2mm，針頭大小為O. 5mm時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊較小；針頭大小為1. 2_時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊較大。針頭大小決定微膠囊形成的粒徑大小，針頭過(guò)大，形成的膠囊粒徑大,但由于表面張力而不易成圓形。實(shí)施例6
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于針頭的注射速度為40-50滴/min、70-80滴/min或者120-130滴/min，針頭的注射速度為40-50滴/min時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊產(chǎn)生泡沫；針頭的注射速度為70-80滴/min時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊顏色較淺；針頭的注射速度為120-130滴/min時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊泡沫很多。滴注速度太慢，耗費(fèi)時(shí)間，滴注速度過(guò)快，易粘連并形成氣泡。實(shí)施例7
同實(shí)施例1，其區(qū)別在于攪拌器攪拌速度為500rpm、1100rpm或者1400rpm,攪拌速度為500rpm時(shí),制備得到的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊形狀不圓；攪拌速度為IlOOrpm時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊顏色不均勻；攪拌速度為1400rpm時(shí)，制備得到的鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素微膠囊外形圓形，但容易粘在一起，凝膠強(qiáng)度差，凝膠表明有大量泡沫產(chǎn)生。在凝膠形成過(guò)程中，攪拌可避免微膠囊互相粘連，但速度過(guò)慢或過(guò)快均可能導(dǎo)致微膠囊互相粘連。從上述七個(gè)實(shí)施例可以看出，實(shí)施例1制備所得的鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊，不但成珠速度較快，形成的膠囊外形飽滿圓潤(rùn)，凝膠強(qiáng)度較好，且顏色綠色，透明度好，膠囊上泡沫較少，是一種最佳的鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素微膠囊制備方法。實(shí)施例8將萃取β-胡蘿卜素的萃取液設(shè)置為乙醇-石油醚(3:7，V/V)、乙醇-乙酸乙酯(3:7，V/V)、乙醇-正己烷(3:7，V/V)、乙醇-氯仿(3:7，V/V)，萃取輔助超聲時(shí)間設(shè)置為IOmin,25min、40min和55min共4個(gè)水平，固體沉淀物藻泥與萃取液料液比設(shè)置1:40、1 :60，I 80和1:100，4個(gè)水平，采用L16 (45)正交試驗(yàn)，結(jié)果以乙醇-氯仿(3:7，V/V)為萃取液，料液比為1:40 (g/ml)，超聲提取IOmin為最佳，β -胡蘿卜素含量為27. 99ug/ml。除上述實(shí)施例外，本發(fā)明一種鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊的制備方法的步驟
(I)中的萃取液還可以選擇乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯或乙醇-正己烷，并且各個(gè)萃取液中的兩種組分可按任意比混合。對(duì)比試驗(yàn)
研究光照、溫度對(duì)鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊貯藏穩(wěn)定性的影響，以胡蘿卜素保存率(處理后的β_胡蘿卜素含量除以處理前的β_胡蘿卜素含量得到的值)為指標(biāo)。將上述所得微膠囊貯藏在光照、黑暗和紫外照射等條件下，5h后測(cè)定β-胡蘿卜素保存率。將上述所得微膠囊貯藏在一 20°C、一 4°C、25°C和37°C等溫度下，15d后測(cè)定β -胡蘿卜素保存率。結(jié)果表明在相同貯藏條件下，鹽生杜氏藻胡蘿卜素微膠囊穩(wěn)定性均高于胡蘿卜素提取液。表I光照對(duì)鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊貯藏穩(wěn)定性的影響
權(quán)利要求
1.一種鹽生杜氏藻β_胡蘿卜素微膠囊，其特征在于以鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素提取液為芯材，以加乳化劑吐溫-80的海藻酸鈉為壁材，將芯材和壁材按體積比1:1-3的比例混合均勻后，加入到凝固劑氯化鈣中，經(jīng)固化、過(guò)濾和干燥處理后得到。
2.—種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于具體步驟如下(1)芯材的制備將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的濃度為O.8X IO7 IX IO7個(gè)細(xì)胞/mL的鹽生杜氏藻液置于離心管中，5000rpm離心8_10min后，取固體沉淀物藻泥，按質(zhì)量體積比lg: 40ml 的比例加入萃取液于離心管中，在震蕩儀上震蕩2-3 min，在功率450-550W、頻率20-24KHZ 的超聲輔助下萃取8-12min,然后5000rpm離心5_10min,將上層萃取液轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中100°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸發(fā)25-35min后，取料液瓶，加石油醚定容于容量瓶中，得到質(zhì)量體積濃度濃度為1-10 mg/L的鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素溶液，作為芯材溶液，其中所述的萃取液為乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯、乙醇-正己烷和乙醇-氯仿中的任一種；(2)壁材的制備以海藻酸鈉為溶質(zhì)，以水為溶劑，水浴加熱溶解后，加乳化劑吐溫80 配制海藻酸鈉溶液，得到壁材溶液，其中所述的壁材溶液中海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為O. 5-2%， 吐溫80的質(zhì)量濃度為4-10% ；(3)芯材/壁材混合液的制備將芯材溶液和壁材溶液按體積比1:1-3的比例混合，得到芯材/壁材混合液；(4)凝珠的制備以氯化鈣為溶質(zhì)，以水為溶劑，溶解后制備得到氯化鈣濃度為1-6%的凝固劑；將步驟(3)制備得到的芯材/壁材混合液用針頭勻速注射到凝固劑中，并用磁力攪拌器攪動(dòng)，待芯材/壁材混合液在凝固劑中形成小球珠后，將小球珠在固化溫度20-30°C 下，靜置5-15 min后，獲得凝珠；(5)微膠囊的制備將步驟(4)獲得的凝珠用干凈的紗布過(guò)濾除去凝固劑，將過(guò)濾后獲得的凝珠在常溫下干燥，即獲得鹽生杜氏藻β -胡蘿卜素微膠囊。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的萃取液為乙醇-氯仿提取液，所述的乙醇-氯仿提取液中乙醇和氯仿的體積比為3:7，所述的超聲萃取時(shí)間為lOmin。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的海藻酸鈉濃度為1%，所述的吐溫80濃度為8%，所述的海藻酸鈉的加熱溶解采用100°c水浴。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的芯材溶液和所述的壁材溶液按體積比1:2的比例混合。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(4)中氯化鈣濃度濃度為2%。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(4)中所述的針頭孔徑大小為O. 5-0. 6mm，所述的針頭注射速度為100-110滴/分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(4)中所述的磁力器攪拌速度為800rpm。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于驟(4)中所述的固化溫度為25°C,靜置時(shí)間為10 min。
10.根據(jù)權(quán)利要求2-9中任一項(xiàng)所述的一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊的制備方法，其特征在于步驟(5)中所述的過(guò)濾紗布的層數(shù)為3-5層。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊及其制備方法，該膠囊以鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素提取液為芯材，以加乳化劑吐溫-80的海藻酸鈉為壁材，將芯材和壁材按體積比1:1-3的比例混合均勻后，加入到凝固劑氯化鈣中，經(jīng)固化、過(guò)濾和干燥處理后得到，具體制備過(guò)程包括芯材的制備、壁材的處理、芯材/壁材混合液的制備、制珠、固化，最后過(guò)濾干燥，即獲得鹽生杜氏藻β-胡蘿卜素微膠囊，優(yōu)點(diǎn)是該微膠囊化天然β-胡蘿卜素不僅可以保持其固有活性，又可以增強(qiáng)其穩(wěn)定性，克服自身易遭破壞的缺點(diǎn)，同時(shí)彌補(bǔ)其在水溶液中不易分散的不足，便于天然β-胡蘿卜素的應(yīng)用、運(yùn)輸和貯藏。
文檔編號(hào)A23P1/04GK103005458SQ20121055808
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月20日
發(fā)明者龔一富, 李軍, 袁鑫, 項(xiàng)程莉, 周霞, 章麗, 劉曉丹, 王何瑜 申請(qǐng)人:寧波大學(xué)