一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法
【專利摘要】本發明公開了一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，包括以下步驟：1）采用野生構樹為母本；2）胚芽的選擇和切取；3）胚芽的滅菌；4）通過誘導愈傷組織；5）愈傷組織分化成苗形成完整植株；6）分化成苗后的管理；本發明通過胚芽體細胞組織培養技術，使野生構樹的速生性加強，木質纖維增長，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長木質纖維，還使嫩芽葉的營養更豐富。
【專利說明】一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法。
【背景技術】
[0002]構樹,學名(Broussonetia papyrifera),為桑科構樹屬，多年生、落葉喬木，莖干色白，可作為造紙原料，嫩芽葉含植物蛋白，可作為動物飼料，但由于木質纖維長度較短，不能造出高品質紙漿。因此如何培育木質纖維較長的構樹植株就成了人們探索的一個課題。
[0003]長期以來，廣大生產者主要通過利用多施肥、摘除側芽等手段，有的甚至利用赤霉素等植物激素，從而達到培育所謂較長木質纖維和速生的目的。這種方法不僅增加生產成本，而且生物性狀不能延續。
[0004]近年來，時有報道人們利用植物體細胞進行組織培養改良植物生物性狀；但因其繼代繁殖的分離性較高，優良生物性狀的延續性不強。

【發明內容】

[0005]本發明要解決的技術問題是提供一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，該方法通過胚芽體細胞組織培養技術，使野生構樹的速生性加強，木質纖維增長，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長木質纖維，還使嫩芽葉的營養更豐
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[0006]為解決上述問題，本發明采用如下技術方案:` 一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，包括以下步驟:
1)采用野生構樹為母本:選擇較為粗壯的野生構樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發芽，待胚芽生長到1.5cm-2cm時切取中段胚芽,長度為1.8cm_lcm ;
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；
4)通過誘導愈傷組織:將誘導培養基接種到步驟3)所得到的胚芽體細胞中進行暗培養，得到愈傷組織，靜置25-30天后達到愈傷組織發出高峰期，當愈傷組織生長到1.5-
2.0mm時，轉接到分化培養基上進行分化陪養，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0007]作為優選的技術方案，所述誘導培養基包括以下物質組分:
N6 培養基1300ml-1500ml5%濃度的蔗糖水4500ml-5000ml
2.4—D 丁脂0.lmg/10ml
萘乙酸0.lmg/10ml。
[0008]作為優選的技術方案，所述分化培養基包括以下物質組分:
MS基本培養基 2000ml-2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0009]作為優選的技術方案，所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風、保濕，并保持溫度在25°C -30°C范圍。
[0010]作為優選的技術方案，所述煉苗期的管理，包括保持水分和營養供給，同時增加光照，及時抹除側芽。
[0011]作為優選的技術方案，所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0012]本發明的有益效果是:本發明過胚芽體細胞組織培養技術，使野生構樹的速生性加強，木質纖維增長，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長木質纖維，還使嫩芽葉的營養更豐富，并且本發 明實施方式較為簡單，成活率高，成本低廉，適合推廣使用。
【具體實施方式】
[0013]一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，包括以下步驟:
1)采用野生構樹為母本:選擇較為粗壯的野生構樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發芽，待胚芽生長到1.5cm-2cm時切取中段胚芽,長度為1.8cm_lcm ;胚芽體細胞是指體細胞組織培養時用來進行培養的外植體，是改良構樹的生命基礎。從植物生理學上看胚芽是一個具有根、莖、葉等器官分化能力的活體植物全息細胞，能通過相關生物技術培養后形成植株，具備生長、分枝等生理活動的基礎性植物體；胚芽的選擇直接影響到愈傷組織的發出率，所以選擇健壯色澤白的胚芽是關鍵；
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；
4)通過誘導愈傷組織:將誘導培養基接種到步驟3)所得到的胚芽體細胞中進行暗培養，得到愈傷組織，靜置25-30天后達到愈傷組織發出高峰期，當愈傷組織生長到1.5-
2.0mm時，轉接到分化培養基上進行分化陪養，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0014]其中，所述誘導培養基包括以下物質組分:N6 培養基1300ml-1500ml
5%濃度的蔗糖水4500ml-5000ml
2.4—D 丁脂0.lmg/10ml
萘乙酸0.lmg/10ml。 [0015]作為優選的技術方案，所述分化培養基包括以下物質組分:
MS基本培養基 2000ml-2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0016]所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風、保濕，并保持溫度在250C -30°C范圍。
[0017]所述煉苗期的管理，包括保持水分和營養供給，同時增加光照，及時抹除側芽。
[0018]所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0019]本發明的有益效果是:本發明過胚芽體細胞組織培養技術，使野生構樹的速生性加強，木質纖維增長，嫩芽葉的植物蛋白含量提高，成為既能夠超速生，又有較長木質纖維，還使嫩芽葉的營養更豐富，并且本發明實施方式較為簡單，成活率高，成本低廉，適合推廣使用。
[0020]實施例1
1)采用野生構樹為母本:選擇較為粗壯的野生構樹；
2)胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發芽，待胚芽生長到1.5cm時切取中段胚芽，長度為1.8cm ;胚芽體細胞是指體細胞組織培養時用來進行培養的外植體，是改良構樹的生命基礎。從植物生理學上看胚芽是一個具有根、莖、葉等器官分化能力的活體植物全息細胞，能通過相關生物技術培養后形成植株，具備生長、分枝等生理活動的基礎性植物體；胚芽的選擇直接影響到愈傷組織的發出率，所以選擇健壯色澤白的胚芽是關鍵；
3)胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗5遍；
4)通過誘導愈傷組織:將誘導培養基接種到步驟3)所得到的胚芽體細胞中進行暗培養，得到愈傷組織，靜置30天后達到愈傷組織發出高峰期，當愈傷組織生長到1.5時，轉接到分化培養基上進行分化陪養，增加光照，并保持30°C的溫度，50天后得到分化苗；
5)愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構樹上；
6)分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
[0021]其中，所述誘導培養基包括以下物質組分:
N6培養基1500ml
5%濃度的鹿糖水 5000ml 2.4— D 丁脂 0.lmg/10ml 萘乙酸0.lmg/10ml。[0022]所述分化培養基包括以下物質組分:
MS基本培養基2500ml
6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml
NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
[0023]所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風、保濕，并保持溫度在250C -30°C范圍。
[0024]所述煉苗期的管理，包括保持水分和營養供給，同時增加光照，及時抹除側芽。
[0025]所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
[0026]附表說明如下:
表1:改良構樹和野生構樹一年生長對照表 表2:改良構樹和野生構樹生物性狀的對照表 表1:改良構樹和野生構樹一年生長對照表
【權利要求】
1.一種利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于，包括以下步驟: 采用野生構樹為母本:選擇較為粗壯的野生構樹； 胚芽的選擇和切取:在步驟I)中所選取的野生構樹上選擇飽滿的野生購樹的種子，在無土條件下發芽，待胚芽生長到1.5cm-2cm時切取中段胚芽,長度為1.8 cm-1 cm ； 胚芽的滅菌:將步驟2)中所切取的胚芽，浸入70%-75%濃度的酒精中，消毒30秒，取出后，再投入到0.09%-0.1%濃度的酸性升汞溶液中滅菌15分鐘，再使用無菌水沖洗3-5遍；通過誘導愈傷組織:將誘導培養基接種到步驟3)所得到的胚芽體細胞中進行暗培養，得到愈傷組織，靜置25-30天后達到愈傷組織發出高峰期，當愈傷組織生長到1.5—2.0mm時，轉接到分化培養基上進行分化陪養，增加光照，并保持25°C -30°C的溫度，約50天后得到分化苗； 愈傷組織分化成苗形成完整植株:將步驟4)中最后所得到的分化苗嫁接到步驟I)中所選取的野生構樹上； 分化成苗后的管理，包括:試管苗移植初期的管理、煉苗期的管理和移栽大田的管理。
2.根據權利要求1所述的利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于:所述誘導培養基包括以下物質組分: N6 培養基1300ml-1500ml 5%濃度的蔗糖水 4500ml-5000ml 2.4— D 丁脂0.lmg/10ml 萘乙酸 0.lmg/10ml。`
3.根據權利要求1所述的利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于:所述分化培養基包括以下物質組分: MS基本培養基 2000ml-2500ml 6BA 蔡乙酸0.lmg/10ml NAA 蔡乙酸0.lmg/10ml。
4.根據權利要求1所述的利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于:所述試管苗移植初期的管理，包括做好遮光、防風、保濕，并保持溫度在25°C -30°C范圍。
5.根據權利要求1所述的利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于:所述煉苗期的管理，包括保持水分和營養供給，同時增加光照，及時抹除側芽。
6.根據權利要求1所述的利用胚芽體細胞培育改良野生構樹性狀的方法，其特征在于:所述移栽大田的管理，包括做好所移栽土地的施肥、所移栽苗木的整形修剪、防治病蟲害和摘除頂芽。
【文檔編號】A01H4/00GK103688863SQ201310702512
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月19日 優先權日:2013年12月19日
【發明者】陳民, 方顯初, 李勇, 鄯保玉, 李軍 申請人:云南晉企生物科技有限公司