專利名稱：一種高純度構(gòu)樹素的分離制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，涉及一種高純度構(gòu)樹素的分離制備工藝，尤其是一種應(yīng)用硅藻土脫色、聚酰胺樹脂富集和高速逆流色譜制備構(gòu)樹素的方法。
背景技術(shù)：
劍葉龍血樹(DracaeflacocAiflcAiflefl1Si1S(Lour. ) S. C. chen)為“龍血竭”的來源植物，主產(chǎn)于廣西、云南等省區(qū)，“龍血竭”屬于樹脂類藥材，是貴重中藥進(jìn)口血竭的國(guó)產(chǎn)替代品。主要含有黃酮類、皂苷類、芪類、酚類、有機(jī)酸、酯類和揮發(fā)油等成分。具有抗炎，抗細(xì)菌、真菌，鎮(zhèn)痛，活血，止血，改變血液流變學(xué)等藥理作用，臨床上用于治療外殼、婦科、內(nèi)科、五官科、皮膚科的多種適應(yīng)癥。構(gòu)樹素是劍葉龍血樹樹脂中的有效成分之一，含量較高，藥理研究表明，構(gòu)樹素具有較顯著的抗真菌作用，對(duì)Bipolars Ieersiae的抑制濃度為10-100 μ M。國(guó)內(nèi)對(duì)構(gòu)樹素的 研究尚處于起步階段，中國(guó)專利201010554172.5以構(gòu)樹枝條為原料，采用微波萃取、大孔樹脂吸附、正己烷結(jié)晶等手段提取分離得到構(gòu)樹素，構(gòu)樹中構(gòu)樹素的含量較低，大孔樹脂吸附率較低，工業(yè)化生產(chǎn)難以得到高含量的有效成分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決技術(shù)問題是提供一種高純度構(gòu)樹素的分離制備工藝，該方法獲得的
產(chǎn)品純度高。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
一種高純度構(gòu)樹素的分離制備工藝，其特征在于包括以下步驟以劍葉龍血樹樹脂為原料，粉碎，加入4-10倍量65-90%的乙醇超聲提取，提取液加入適量硅藻土保溫脫色，脫色液濃縮，通過聚酰胺樹脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離得到構(gòu)樹素。所述娃藻土為用量為液體量的O. 2-0. 5%。所述高速逆流色譜的兩相溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水，體積比為(2-5) :(2-5) :(2-3) : (3-5)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，色譜儀轉(zhuǎn)速為800_900rpm。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)采用超聲提取效率高，能耗低；硅藻土脫色，除去部分雜質(zhì)，提高柱層析吸附率；本發(fā)明采用高速逆流色譜進(jìn)行精制，獲得的產(chǎn)品品質(zhì)好，符合食品藥品的要求。本發(fā)明方法不僅適合實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模提取分離，也適合規(guī)模化大生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例I :
取Ikg劍葉龍血樹樹脂，粉碎，加入4L75%的乙醇超聲提取2次，每次I. 5h，超聲頻率為40KHz，過濾得到提取液，提取液加入O. 3%硅藻土，55°C保溫脫色30min，脫色液濃縮至無醇味,通過聚酰胺樹脂柱,先用水洗脫雜質(zhì),再用3BV80%的乙醇溶液洗脫，收集富含構(gòu)樹素的洗脫液，濃縮干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(4:4:3:4)為兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，先后泵入固定相和流動(dòng)相，設(shè)定流動(dòng)相流速為3ml/min，同時(shí)啟動(dòng)主機(jī)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)樣，收集高濃度構(gòu)樹素流分，濃縮干燥即得構(gòu)樹素I. 2g，含量為96. 2%。實(shí)施例2:
取Ikg劍葉龍血樹樹脂，粉碎，加入8L90%的乙醇超聲提取I次，每次2h，超聲頻率為40KHz，過濾得到提取液，提取液加入O. 3%硅藻土，50°C保溫脫色60min，脫色液濃縮至無醇味，通過聚酰胺樹脂柱富集，先用水洗脫雜質(zhì)，再用4BV75%的乙醇溶液洗脫，收集富含構(gòu)樹素的洗脫液，濃縮干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(2:2:2:3)為兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，先后泵入固定相和流動(dòng)相，設(shè)定流動(dòng)相流速為2. 5ml/min,同時(shí)啟動(dòng)主機(jī)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為880rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)樣，收集高濃度構(gòu)樹素流分，濃縮干燥即得構(gòu)樹素O. 9g，含量為98. 3%。
實(shí)施例3:
取2kg劍葉龍血樹樹脂，粉碎，加入10L70%的乙醇超聲提取2次，每次I. Oh,超聲頻率為25KHz，過濾得到提取液，提取液加入O. 2%硅藻土，70°C保溫脫色50min，脫色液濃縮至無醇味，通過聚酰胺樹脂柱富集，先用水洗脫雜質(zhì)，再用3BV80%的乙醇溶液洗脫，收集富含構(gòu)樹素的洗脫液，濃縮干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(3:5:3:5)為兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，先后泵入固定相和流動(dòng)相，設(shè)定流動(dòng)相流速為3ml/min，同時(shí)啟動(dòng)主機(jī)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為800rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)樣，收集高濃度構(gòu)樹素流分，濃縮干燥即得構(gòu)樹素2. 5g，含量為98. 5%。實(shí)施例4:
取2kg劍葉龍血樹樹脂，粉碎，加入5L65%的乙醇超聲提取3次，每次O. 5h，超聲頻率為30KHz，過濾得到提取液，提取液加入O. 5%硅藻土，60°C保溫脫色40min，脫色液濃縮至無醇味，通過聚酰胺樹脂柱富集，先用水洗脫雜質(zhì)，再用5BV85%的乙醇溶液洗脫，收集富含構(gòu)樹素的洗脫液，濃縮干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(5:3:2:4)為兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，先后泵入固定相和流動(dòng)相，設(shè)定流動(dòng)相流速為2ml/min，同時(shí)啟動(dòng)主機(jī)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為820rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)樣，收集高濃度構(gòu)樹素流分，濃縮干燥即得構(gòu)樹素2. 7g，含量為96. 4%。實(shí)施例5
取5kg劍葉龍血樹樹脂，粉碎，加入6L65%的乙醇超聲提取2次，每次lh，超聲頻率為40KHz，過濾得到提取液，提取液加入O. 4%硅藻土，70°C保溫脫色45min，脫色液濃縮至無醇味，通過聚酰胺樹脂柱富集，先用水洗脫雜質(zhì)，再用6BV75%的乙醇溶液洗脫，收集富含構(gòu)樹素的洗脫液，濃縮干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離，以正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水(4:5:3:3)為兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，先后泵入固定相和流動(dòng)相，設(shè)定流動(dòng)相流速為2ml/min，同時(shí)啟動(dòng)主機(jī)，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為900rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達(dá)成動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)樣，收集高濃度構(gòu)樹素流分，濃縮干燥即得構(gòu)樹素6. 2g，含量為98. 1%。
權(quán)利要求
1.一種高純度構(gòu)樹素的分離制備エ藝，其特征在于包括以下步驟以劍葉龍血樹樹脂為原料，粉碎，加入4-10倍量65-90%的こ醇超聲提取，提取液加入適量硅藻土保溫脫色，脫色液濃縮，通過聚酰胺樹脂柱富集，75-85%的こ醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離得到構(gòu)樹素。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種高純度構(gòu)樹素的分離制備エ藝，其特征在于所述硅藻土為用量為液體量的O. 2-0. 5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種高純度構(gòu)樹素的分離制備エ藝，其特征在于所述高速逆流色譜的兩相溶劑系統(tǒng)為正己烷-こ酸こ酯-こ腈-水，體積比為(2-5) (2-5)(2-3)(3-5),上相為固定相，下相為流動(dòng)相，色譜儀轉(zhuǎn)速為800-900rpm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高純度構(gòu)樹素的分離制備工藝，具體步驟為以劍葉龍血樹樹脂為原料，粉碎，加入4-10倍量65-90%的乙醇超聲提取，提取液加入適量硅藻土保溫脫色，脫色液濃縮，通過聚酰胺樹脂柱富集，75-85%的乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，干燥，干燥物采用高速逆流色譜法分離得到構(gòu)樹素。本發(fā)明所述方法操作簡(jiǎn)便、分離效率高、產(chǎn)品純度好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/60GK102838577SQ20121037332
公開日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月27日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司