一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，其中，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)母液，加入6-卞氨基腺嘌呤BA、赤霉素GA3和有機(jī)添加物混合制成。所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)蝴蝶蘭花梗節(jié)間部分快速繁殖蝴蝶蘭，具有成本低，類(lèi)原球莖誘導(dǎo)率高，誘導(dǎo)時(shí)間短，生長(zhǎng)速度快等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明所提供的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法以幼嫩的花梗節(jié)間為外植體并采用所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基為培養(yǎng)基，采用此方法不僅能充分利用花梗材料，變廢為寶，節(jié)約成本，而且不損傷母本，處于花梗較低部位的花仍可用于雜交。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其涉及一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蝴蝶蘭(Phalaenopsis B1.spp.)屬熱帶氣生蘭,其花大,花期長(zhǎng),花色艷麗,色澤豐富，花形美麗別致，如蝴蝶翩翩起舞，因而得名。在熱帶蘭中有“蘭花皇后”之美稱(chēng)，是近年來(lái)最受歡迎的洋蘭之一。蝴蝶蘭是單莖性氣生蘭，植株很少發(fā)育側(cè)芽，且種子極難萌發(fā)，對(duì)其進(jìn)行常規(guī)性的繁殖，增殖速度很慢，故多采用組織培養(yǎng)的方法對(duì)其進(jìn)行快速繁殖。目前蝴蝶蘭組培工廠(chǎng)化生產(chǎn)大多使用花梗腋芽誘導(dǎo)不定芽，廢棄花梗節(jié)間部分，這樣不僅損傷母本，還浪費(fèi)花梗節(jié)間部分。
[0003]因此，現(xiàn)有技術(shù)還有待發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)蝴蝶蘭花梗節(jié)間部分快速繁殖蝴蝶蘭，旨在提供一種新的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)母液，加入6-卞氨基腺嘌呤BA、赤霉素GA3和有機(jī)添加物混合制成；6_卞氨基腺嘌呤BA的濃度為O~10g/L，赤霉素GA3的濃度為O~1.5mg/L,有機(jī)添加物的濃度為O~300g/L ;且6-卞氨基腺嘌呤BA和赤霉素GA3 的含量非零。
[0007]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基,其中,6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為3~5mg/L,赤霉素GA3的濃度為I~1.2mg/L，有機(jī)添加物的濃度為150~180g/L。
[0008]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為5mg/L，赤霉素GA3的濃度為1.2mg/L，有機(jī)添加物的濃度為150g/L。
[0009]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加有瓊脂、碳源和活性炭；其中，瓊脂的濃度為7~9g/L，碳源的濃度是20~30g/L，活性炭的濃度為I~3g/L0
[0010]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述有機(jī)添加物為椰子汁或番茄汁。
[0011 ] 所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述有機(jī)添加物為番茄汁。
[0012]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述碳源為白砂糖或蔗糖。
[0013]所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其中，所述碳源為白砂糖。
[0014]一種蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，其中，所述蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法是以花梗節(jié)間為外植體，采用如上任一所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
[0015]所述的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，其中，所述蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法包括以下步驟:[0016]取蝴蝶蘭兩花梗節(jié)之間的幼嫩部分，切成2~3mm的切段，接種于盛裝有所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，封口；將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室中，在溫度25 土 1°C、光照強(qiáng)度1500~18001x、光暗交替12h/12h條件下，培養(yǎng)42~50天。
[0017]有益效果:本發(fā)明所提供一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)蝴蝶蘭花梗節(jié)間部分快速繁殖蝴蝶蘭，具有成本低，類(lèi)原球莖誘導(dǎo)率高，誘導(dǎo)時(shí)間短，生長(zhǎng)速度快等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明所提供的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，是以幼嫩的花梗節(jié)間為外植體并采用所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基快速繁殖蝴蝶蘭。花梗節(jié)間是傳統(tǒng)組培生產(chǎn)中的廢料，采用此方法不僅能充分利用花梗材料，變廢為寶，節(jié)約成本，而且不損傷母本，處于花梗較低部位的花仍可用于雜交。
【具體實(shí)施方式】
[0018]本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基及蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0019]本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，用于誘導(dǎo)蝴蝶蘭花梗節(jié)間部分快速繁殖蝴蝶蘭。所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，是以標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)母液，加入植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和有機(jī)添加物優(yōu)化制得的。
[0020]其中，所述植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑為6-卞氨基腺嘌呤BA和赤霉素GA3。在所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加6-卞氨基腺嘌呤BA，在一定范圍(O~5mg/L，且含量非零)內(nèi)對(duì)類(lèi)原球莖的誘導(dǎo)及增殖有顯著的促進(jìn)作用，是使花梗節(jié)間誘導(dǎo)成類(lèi)原球莖的主導(dǎo)因子，可提高誘導(dǎo)率和后期的增殖系數(shù)。赤霉素GA3是一種植物激素，主要用于促進(jìn)植物莖葉生長(zhǎng)，打破休眠，促進(jìn)抽穗，增加瓜類(lèi)的雄花 數(shù)，誘導(dǎo)單性結(jié)實(shí)，少見(jiàn)用于花梗誘導(dǎo)中。在所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中創(chuàng)造性地加入了赤霉素GA3，能明顯地縮短誘導(dǎo)時(shí)間，比不添加處理提前10~15天誘導(dǎo)出類(lèi)原球莖。
[0021]所述有機(jī)添加物可以為番茄汁或椰子汁，在本發(fā)明方案中優(yōu)選為番茄汁。在所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加番茄汁，能有效地提高蝴蝶蘭類(lèi)原球莖的健壯度，減少后期增殖時(shí)的褐化和枯死。番茄汁是一種天然的有機(jī)添加劑，能避免高濃度生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的使用導(dǎo)致類(lèi)原球莖在增殖中發(fā)生變異。同時(shí)相較于起相似作用的椰子汁，番茄一年四季均有大量供應(yīng)，隨處可見(jiàn)，且價(jià)格便宜，降低了組培成本。
[0022]綜上，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，是以標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)母液，加入6-卞氨基腺嘌呤BA、赤霉素GA3和有機(jī)添加物混合制成；其中，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為O~IOg/L,赤霉素GA3的濃度為O~1.5mg/L,有機(jī)添加物的濃度為O~300g/L ;且6-卞氨基腺嘌呤BA和赤霉素GA3的含量非零。
[0023]優(yōu)選地，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為3~5mg/L，赤霉素GA3的濃度為I~1.2mg/L，番茄汁的濃度為150~180g/L。采用此組成范圍內(nèi)的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其誘導(dǎo)率較高，誘導(dǎo)時(shí)間較短，類(lèi)原球莖的生長(zhǎng)發(fā)育較為良好。
[0024]最為優(yōu)選地，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為5mg/L，赤霉素GA3的濃度為1.2mg/L，番茄汁的濃度為150g/L。采用此組成范圍內(nèi)的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其誘導(dǎo)率最高，誘導(dǎo)時(shí)間最短，且類(lèi)原球莖的生長(zhǎng)發(fā)育狀況最好。[0025]進(jìn)一步地，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，還可以添加有瓊脂、碳源和活性炭；其中，瓊脂的濃度為7~9g/L，碳源的濃度是20~30g/L，活性炭的濃度為I~3g/L。
[0026]其中，在所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加0.2%左右的活性炭，可以抑制褐化現(xiàn)象，提高類(lèi)原球莖的成活率。所述碳源可以為白砂糖或蔗糖，在本發(fā)明方案中，優(yōu)選為白砂糖作為碳源，因?yàn)樵谒龊m誘導(dǎo)培養(yǎng)基中采用白砂糖作為碳源，在對(duì)誘導(dǎo)率及誘導(dǎo)時(shí)間不受影響的前提下降低了成本。而瓊脂能夠?yàn)橹仓晏峁B(yǎng)分、水分，并能起到透氣的效用，用瓊脂代替?zhèn)鹘y(tǒng)培養(yǎng)基中的卡拉膠，在類(lèi)原球莖誘導(dǎo)率以及誘導(dǎo)時(shí)間不受影響的前提下降低了培養(yǎng)基的制備成本。
[0027]本發(fā)明所提供的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，除各種營(yíng)養(yǎng)元素母液采用蒸餾水配制以外，其余均可采用自來(lái)水代替蒸餾水，從而間接簡(jiǎn)化了組培程序及成本。
[0028]本發(fā)明中還提供一種蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，包括以下步驟:
[0029]取蝴蝶蘭兩花梗節(jié)之間的幼嫩部分，切成2~3mm的切段，迅速接種于盛裝有上述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，用瓶塞封口 ；接種后，將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室中，在溫度25±1°C、光照強(qiáng)度1500~18001x、光暗交替12h/12h條件下，培養(yǎng)42~50天。
[0030]本發(fā)明所提供的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，以幼嫩的花梗節(jié)間為外植體，不僅充分利用了花梗材料，而且不損傷母本，處于花梗較低部位的花還可用于雜交；另外，采用上述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基 ，具有成本低，類(lèi)原球莖誘導(dǎo)率高，誘導(dǎo)時(shí)間短，生長(zhǎng)速度快等優(yōu)點(diǎn)。
[0031]下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明不限于以下實(shí)施例的舉例。
[0032]實(shí)施例1:配制誘導(dǎo)培養(yǎng)基
[0033]( I)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基的成分和濃度配制所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)母液，并分裝于9個(gè)三角瓶中，并分別標(biāo)號(hào)。I號(hào)~8號(hào)三角瓶為本發(fā)明添加有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和有機(jī)添加物的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組，9號(hào)瓶為僅添加瓊脂、白砂糖和活性炭的培養(yǎng)基對(duì)照組。
[0034](2)根據(jù)表1，將6-卞氨基腺嘌呤BA母液、番茄汁和活性炭加入各三角瓶中與N6基礎(chǔ)母液混合至所需濃度。
[0035](3)取一定量自來(lái)水(代替蒸餾水)煮沸，根據(jù)表1中的濃度，用電子天平秤取瓊脂及白砂糖，將瓊脂倒入沸水中煮化，接著倒入白砂糖，溶化后，將瓊脂液分別分裝在I號(hào)~9號(hào)三角瓶中，定容至1L，加蓋滅菌。
[0036](4)將赤霉素GA3小瓶封口用75%的酒精消毒后，用一次性醫(yī)用注射器注入乙醇配成lmg/L的赤霉素GA3母液，用過(guò)濾滅菌器進(jìn)行過(guò)濾滅菌，待用。
[0037](5)待滅菌后培養(yǎng)基的溫度冷卻至40~50°C時(shí)，在無(wú)菌的超凈工作臺(tái)上根據(jù)表1在I號(hào)~8號(hào)瓶中加入不同濃度的赤霉素GA3，混勻，分裝到培養(yǎng)瓶中，得類(lèi)原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基，即本發(fā)明所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
[0038]實(shí)施例2:花梗節(jié)間的接種及培養(yǎng)
[0039]在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中進(jìn)行接種，用已消毒的手術(shù)刀切除花梗兩端與消毒劑接觸的切口，取兩花梗節(jié)之間的幼嫩部分，分切成2~3mm的切段，迅速接種至實(shí)施例1中制備得到的各誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，接種后用已消毒的瓶塞封口。
[0040]接種后，將培養(yǎng)瓶置于人工培養(yǎng)室中，培養(yǎng)瓶所處環(huán)境參數(shù)如下:[0041]培養(yǎng)條件:溫度25±1°C、光照強(qiáng)度1500~18001x、光暗交替12h/12h。
[0042]培養(yǎng)50天后，對(duì)各培養(yǎng)瓶中類(lèi)原球莖的誘導(dǎo)率、誘導(dǎo)時(shí)間及生長(zhǎng)情況進(jìn)行記錄(實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)表1)。
[0043]表1誘導(dǎo)培養(yǎng)基各成分使用濃度及實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)
[0044]
【權(quán)利要求】
1.一種蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以標(biāo)準(zhǔn)N6培養(yǎng)基為基礎(chǔ)母液，加入6-卞氨基腺嘌呤BA、赤霉素GA3和有機(jī)添加物混合制成；6_卞氨基腺嘌呤BA的濃度為O~10g/L，赤霉素GA3的濃度為O~1.5mg/L,有機(jī)添加物的濃度為O~300g/L ;其中，6-卞氨基腺嘌呤BA含量和赤霉素GA3的非零。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為3~5mg/L,赤霉素GA3的濃度為I~1.2mg/L,有機(jī)添加物的濃度為150~180g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，6-卞氨基腺嘌呤BA的濃度為5mg/L,赤霉素GA3的濃度為1.2mg/L,有機(jī)添加物的濃度為150g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加有瓊脂、碳源和活性炭；其中，瓊脂的濃度為7~9g/L，碳源的濃度是20~30g/L，活性炭的濃度為I~3g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述有機(jī)添加物為椰子汁或番爺汁。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述有機(jī)添加物為番茄汁。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述碳源為白砂糖或蔗糖。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于，所述碳源為白砂糖。
9.一種蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，其特征在于，所述蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法是以花梗節(jié)間為外植體，采用如權(quán)利要求1~8任一所述的蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法，其特征在于，所蝴蝶蘭無(wú)性繁殖方法包括以下步驟:` 取蝴蝶蘭兩花梗節(jié)之間的幼嫩部分，切成2~3_的切段，接種于盛裝有所述蝴蝶蘭誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，封口 ；將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室中，在溫度25±1°C、光照強(qiáng)度1500~18001x、光暗交替12h/12h條件下，培養(yǎng)42~50天。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103766218SQ201310746547
【公開(kāi)日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2013年12月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月27日
【發(fā)明者】陳永得 申請(qǐng)人:佛山市順德區(qū)今日景藝生物科技有限公司