本發明涉及玉米育種領域，具體而言，涉及一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法。
背景技術：
單倍體技術作為一項高新技術，為育種家快速選育自交系帶來廣闊的前景。在誘導玉米單倍體時將誘導系與基礎材料以一定比例錯期相間播種，四周隔離，在散粉前對母本材料人工去雄，從而依靠風力傳播父本的花粉達到授粉的目的。錯期計算一般常用方法是按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數，進行差期播種，但在單倍體誘導中，基礎材料大多都是新組配材料，其葉片數未知，再加上前期低溫后期高溫等自然環境條件極易造成實際生育期與推算生育期有較大差異，經常會出現父母本花期不育，授粉不充分，誘導率和結實率低的現象。
有鑒于此，特提出本發明。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，采用自然授粉加人工輔助授粉，提高結實率和誘導率，克服了現有技術不能準確推算錯期時間，導致花期不遇，授粉不充分，誘導結實率低的問題。
為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，以誘導系或其雜交種作為父本，以期望獲得單倍體的玉米材料作為母本，所述父本和所述母本間隔播種，并且所述父本分期播種，以進行自然授粉；
另外，在播種區域中心地帶分期播種所述父本，以進行人工輔助分段授粉。
本發明提供的提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，雜交授粉方法為自然授粉加人工輔助授粉，進而提高結實率和誘導率。
進一步地，所述誘導系選自玉米單倍體誘導系CAUHOI、玉米單倍體誘導系UH400、玉米單倍體誘導系CAU079和玉米單倍體誘導系CAU5。
進一步地，所述母本為綜合性狀優良且符合育種目標，需要提純復壯的優良自交系、雜交種、三交種、雙交種、多交種及混合授粉的基礎群體。
母本可以為已知的雜交種或自交系，如可以為鄭58、鄭單958、農大108等；而本發明更主要是針對生育期和葉片數未知的母本材料。
經試驗，本發明提供的提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，采用以上父本和母本，均達到了顯著提高結實率和誘導率的效果。
父本和母本間隔播種，是為了達到適當的自然授粉的目的，優選地，所述父本與所述母本按1:4-5的行比間隔播種。
進一步地，所述父本分期播種是將每行的父本分期播種，分期的時間間隔為7-10天。
對于生育期和葉片數已知的母本來說，母本一般是在4月中旬統一播種，計算父本和母本的葉片數，按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數，進行差期播種，兩期相間交替播種，兩期父本前后相隔7-10天；而對于生育期和葉片數未知的母本來說，只能憑工作經驗進行錯期，以盡量保證父本和母本花期相遇，成功完成自然授粉結實。
進一步地，每播種4-5株父本空置相同的距離后再播種父本，按此交替播種。
進一步地，每行中，父本的株距為0.20-0.25m。
即父本按0.20-0.25m株距，每一米種4-5株父本，分兩期播種，一期先種一米父本，再空一米留二期播種父本，兩期相間交替播種。
因為父母本均已按葉片數的多少進行錯期播種，大概按照平均每3天長出一片玉米葉片計算，或者進行估摸分期播種父本，但由于前期低溫和后期高溫等自然環境條件往往會造成實際生育期與推算生育期有較大差異，為了防止父母本花期不育，保證充分授粉，提高結實率和誘導率，還需人工輔助授粉分段授粉。
優選地，按母本播種的時間計算，在播種區域中心地帶分期播種所述父本中的分期為：提前一期、同期和推后一期，每期的時間間隔為6-8天。
播種區域中心地帶種植的父本作為采粉田，采粉田與播種區域面積比為1：15-20，通過人工在采粉田采粉，篩除花藥，裝在授粉管中以進行人工輔助分段授粉。
進一步地，人工輔助分段授粉為：在母本全部吐絲3-4天后每隔2-3天進行一次人工輔助授粉，總共進行3-4次。據統計母本全部吐絲3天后授粉，誘導率最高，相比于開始吐絲到完全吐絲也就是母本完全吐絲之前，人工輔助授粉的誘導率提高2％-3％。
當母本每行有80％以上的植株吐絲定義為母本全部吐絲。
采用人工分段輔助授粉技術，彌補了單純采用行比自然授粉而造成的花期不育現象，完全保證了母本充分授粉結實，結實率提高30％以上，誘導率提高3％以上。
為了防止其他花粉對本播種區域的玉米進行干擾，優選地，播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上或中間有屏障隔離。
另外，本發明中的母本還可以混合種植，可滿足商業化育種中多種類型的母本混合種植，誘導獲取單倍體的要求，但為了便于收獲，一般是采用不同的母本播種在不同行中。
與現有技術相比，本發明的有益效果為：
(1)一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，通過自然授粉加人工輔助授粉，提高玉米單倍體結實率和誘導率，適宜于商業化規模化育種。
(2)本發明還限定了父本和母本播種間隔以及采用分期播種，更好的達到自然授粉的目的。
(3)本發明在播種區域中心地帶分期播種父本，散粉持續時間長，花粉量大，可實現人工輔助授粉的需求，更好的實現提高玉米單倍體結實率和誘導率的效果。
(4)本發明的人工輔助授粉采用授粉管授粉，每人每天可授粉0.5畝以上，授粉成本低。
具體實施方式
下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。
實施例1
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系CAUHOI；
母本為鄭單958；
母本與父本以4:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.25m；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，一期父本通過計算父本和母本的葉片數，按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數計算父本的播種日期，二期于一期播種后的7天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比母本提前6天播種，二期與母本同期播種，三期比母本推后6天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域中間有屏障隔離；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲3天后，每隔2天進行一次，總共進行3次。收獲雜交籽粒，隨機選取30穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到雜交種的結實率為85％，誘導率為7％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為53％，誘導率為3.2％。
實施例2
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系UH400；
母本為鄭單958；
母本與父本以5:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.20m；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，一期父本通過計算父本和母本的葉片數，按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數計算父本的播種日期，二期于一期播種后的10天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比母本提前7天播種，二期與母本同期播種，三期比母本推后7天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲4天后，每隔3天進行一次，總共進行3次。
收獲雜交籽粒，隨機選取30穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到雜交種的結實率為90％，誘導率為11％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為59％，誘導率為7％。
實施例3
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系CAU5；
母本為鄭58/PH6WC//PH6WC；
母本與父本以4:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.25m；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，因母本葉片數未知，只能粗略的按經驗母本葉片數＝(鄭58葉片數+PH6WC葉片數)/2估算，再按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數計算一期父本的播種日期播種父本，二期于一期播種后的8天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比母本提前8天播種，二期與母本同期播種，三期比母本推后8天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上或中間有屏障隔離；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲3天后，每隔2天進行一次，總共進行4次。
收獲雜交籽粒，隨機選取30穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到雜交種的結實率為91％，誘導率為8.5％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為57％，誘導率為3％。
實施例4
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系CAU079；
母本為昌7-2與PH4CV組配的雜交F1代；
母本與父本以5:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.25m；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，因母本葉片數未知，只能粗略的按經驗播種父本，一期父本比母本提前5天播種，二期于一期播種后的7天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比母本提前7天播種，二期與母本同期播種，三期比母本推后7天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上或中間有屏障隔離；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲4天后，每隔3天進行一次，總共進行4次。
收獲雜交籽粒，隨機選取30穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到雜交種的結實率為90％，誘導率為11.3％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為56％，誘導率為8.2％。
實施例5
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系雜交種CAUHOI/CAU079；
母本為鄭58；
母本與父本以5:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.20m；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，一期父本通過計算父本和母本的葉片數，按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和母本的葉片數計算父本的播種日期，二期于一期播種后的8天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比母本提前6天播種，二期與母本同期播種，三期比母本推后6天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上或中間有屏障隔離；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲4天后，每隔2天進行一次，總共進行3次。
收獲雜交籽粒，隨機選取30穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到雜交種的結實率為92％，誘導率為9.8％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為60％，誘導率為6.7％。
實施例6
一種提高玉米單倍體誘導結實率的授粉方法，其步驟如下：
父本為玉米單倍體誘導系雜交種UH400/CAU5；
母本為農大108、鄭單958、豫玉22，不同母本播種不同的行中；
母本與父本以4:1的行比間隔播種，每行中的株距為0.25m；
3個母本于4月11日同期播種；
播種父本的每行中，父本分兩期播種，兩期播種的間距為1m，一期父本通過計算父本和相對應母本的葉片數，按照平均每3天長出一片玉米葉計算，根據父本和相對應母本的葉片數計算父本的播種日期，二期于一期播種后的7-10天后播種，以盡量保證父本和母本花期相遇；
另外，在播種區域的中心地帶分期播種父本，一共分三期，一期比播種母本提前7天播種，二期與播種母本同期播種，三期播種比母本推后7天播種；
播種區域與周圍其他玉米區域隔離200米以上或中間有屏障隔離；
在母本吐絲前對其進行人工去雄，依靠自然風力實現父母本之間的授粉；
同時，分期在播種區域中心地帶播種的父本作為采粉田進行采粉，篩除花藥，裝在授粉管中進行人工輔助授粉，人工輔助授粉在母本全部吐絲3天后，每隔3天進行一次，總共進行3次。
收獲雜交籽粒，每個母本品種隨機選取20穗玉米，共選取60穗玉米，計算玉米的結實率和雜交籽粒的誘導率，并記錄統計。
得到所有雜交種的結實率為91％，平均誘導率為15％。
同時，設置對照組：對照組中只采用自然授粉，未設置播種中心區域的采粉區，得到的雜交種的結實率為60％，平均誘導率為10％。
可見，本發明采用行比自然授粉加人工分段輔助授粉技術，彌補了單純采用行比自然授粉而造成的花期不育現象，保證了母本充分授粉結實，結實率提高30％以上，誘導率提高3％以上，并且可以將不同母本一起播種，集中授粉適宜商業化規模化育種。
盡管已用具體實施例來說明和描述了本發明，然而應意識到，在不背離本發明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權利要求中包括屬于本發明范圍內的所有這些變化和修改。