1.一種提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:包括外植體獲取、外植體消毒、外植體低溫處理和芽誘導培養工序,采集秋季生長發育成熟大百合小球作為外植體,通過對外植體無菌消毒、低溫處理后,置于適宜的溫度、濕度和光照強度條件下進行培養,誘導芽的萌發;其主要操作步驟為:
(1)外植體獲取:采集秋季生長發育成熟的大百合小球作為外植體,將采集得到的大百合小球放入封口袋,立即帶回室內;
(2)外植體消毒:對大百合小球進行洗滌預處理后,再用化學試劑進行消毒處理;
(3)外植體低溫處理:將消毒后的大百合小球用無菌吸水紙吸干表面水分,然后再將大百合小球放入溫度為3-5℃的冰箱或冷庫中低溫處理,放置40-50天;
(4)芽誘導培養:將步驟(3)低溫處理的大百合小球接種于誘導培養基中,再置于適宜的條件下進行室內培養,誘導芽萌發。
2.根據權利要求1所述的一種提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的洗滌預處理的方法是將得到的大百合小球及時用自來水沖洗2-3遍,再用脫脂棉蘸低濃度的洗潔精溶液擦拭大百合小球,最后將大百合小球裝入紗布袋內并置于流水中,沖洗15-20min。
3.根據權利要求2所述的一種提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:所述的低濃度的洗潔精溶液是體積濃度為1.5-3.0%的洗潔精水溶液。
4.根據權利要求1所述的提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的消毒處理的方法是將洗滌預處理后的大百合小球置于干凈燒杯內,用無菌水清洗2-3次,然后將大百合小球轉到超凈工作臺上,置入滅菌過的廣口三角瓶,迅速向瓶內倒入福爾馬林溶液滅菌液進行滅菌消毒,充分浸沒大百合小球后加蓋蓋好瓶口,輕輕晃動三角瓶3-5min,然后將滅菌液倒出,然后立即將大百合小球倒入無菌水輕攪漂洗3次,每次不少于2min。
5.根據權利要求1所述的提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步驟(3)中所述的低溫處理在將大百合小球放入冰箱或冷庫的過程中,必須保證每個大百合小球之間不發生接觸。
6.根據權利要求1所述的一種提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步驟(4)中所述的誘導培養基為MS培養基+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂+1.5-2.0 mg/L 6-BA+10mg/L維生素C+0.05mg/LNAA。
7.根據權利要求1所述的一種提前打破大百合休眠的方法,其特征在于:步驟(4)中所述的室內培養條件為白天溫度20 ±2℃,夜間溫度 14 ±2 ℃,采用日光燈培養,光照強度1600-1800lx,光照時數10h?d- 1。