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一種細胞保存液及其制備方法和使用方法與流程

文檔序號:11072967閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種細胞保存液,為超純水配制的溶液,其特征在于:

該溶液為多聚甲醛保存液,溶液中還包括如下濃度范圍的組分:

戊二醛 0.4-0.8wt%

枸櫞酸鉀 0.05-0.1mol/L

雙乙酸鈉 0.035-0.15mol/L

六水氯化鎂 0.1-0.3mol/L

氯化鈉 0.08-0.4mol/L

α-硫辛酸 0.003-0.005mol/L

海藻糖 0.08-0.12mol/L

苦參堿 3-5mg/L

所述多聚甲醛保存液的制備方法為:將多聚甲醛溶解于30-40℃氫氧化鈉水溶液中,用超純水定容制成8wt%的多聚甲醛溶液,然后攪拌滴入0.2-0.3%v/v的焦炭酸二乙酯,持續攪拌至溶液清亮,然后加入PB緩沖液至多聚甲醛質量百分含量為4wt%;

所述細胞保存液的pH值為7.1-7.4,滲透壓為290-315mmol/L。

2.如權利要求1所述細胞保存液,其特征在于:所述多聚甲醛保存液制備過程中使用的氫氧化鈉水溶液濃度為5-10wt%。

3.如權利要求1所述細胞保存液,其特征在于:所述PB緩沖液為0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4以體積比1:1.5-4混合配制而成。

4.如權利要求1所述細胞保存液,其特征在于:所述細胞保存液還包括0.1-0.2wt/L的氨基酸。

5.如權利要求4所述細胞保存液,其特征在于:所述氨基酸為甘氨酸、天冬氨酸、賴氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、組氨酸、精氨酸中的一種或多種。

6.如權利要求1所述細胞保存液,其特征在于:所述細胞保存液中所用原料為分析純。

7.一種制備如權利要求1-6任一所述細胞保存液的方法,其特征在于包括如下步驟:

步驟一:按照保存液配方稱取多聚甲醛保存液及其他原料;

步驟二:將其他原料倒入多聚甲醛保存液中,攪拌均勻,利用0.2mol/L的NaH2PO4和/或0.2mol/L的Na2HPO4將pH值調整至7.1-7.4;

步驟三:將步驟二中制備得到的溶液滅菌,即得到所需細胞保存液。

8.一種細胞的保存方法,其特征在于:所述方法是利用如權利要求1-6所述細胞保存液密封靜置保存。

9.如權利要求8所述細胞保存方法,其特征在于:所述細胞為口腔細胞,細胞濃度為105-108個/ml。

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