本發明涉及一種bt可濕性粉劑及其制備方法，具體涉及一種含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑及其制備方法，屬于生物農藥技術領域。
背景技術：
蘇云金芽胞桿菌（bacillusthuringiensis，簡稱bt）是目前應用最廣的微生物殺蟲劑之一，它能對鱗翅目、雙翅目、鞘翅目、線蟲和螨類的害蟲具有一定的毒殺作用。bt在發酵的過程中能夠產生伴孢晶體，當伴孢晶體被昆蟲取食后能在昆蟲的堿性腸道下被活化成具有活性的片段。這些片段能與昆蟲中腸中的上皮細胞特異性結合，進而發生毒性作用，最終導致昆蟲死亡。雖然當前bt農藥制劑已有廣泛的應用，但是它在施用的過程中仍然存在很多問題，例如田間持效期短，有效成分易降解，容易受到溫度、光照等環境條件的影響，從而達不到穩定長效的殺蟲效果。
納米材料(nanomaterials)是指材料的尺寸在1~100nm尺度范圍，它具有獨特的結構單元因而使其具有特殊的效應，如表面效應，體積效應等，這些效應使得納米材料的光學、電學和磁學等性能發生變化。例如一些原本不導電的塊材，在某一個納米級界限時會開始導電。納米技術產品開始在高科技、軍事領域和環境保護等方面有著廣泛的應用，并涉及農藥制劑行業。已有研究表明，利用納米材料作為基質或載體，可以降低農藥的用量，提高藥效。
納米氫氧化鎂具有六方相的層狀結構，具有高比表面積、強吸附性能等特點，其在酸性廢水處理、重金屬脫除、無機阻燃填充劑、醫藥行業等有廣泛的應用。前期的研究表明，納米氫氧化鎂制備簡單，成本低，且對動物體和細胞的毒性很低，因而它被稱為是一種環境友好的納米材料。
技術實現要素：
本發明的目的是提供一種含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑及其制備方法，用于解決當前蘇云金芽孢桿菌粉劑殺蟲活性較低，不能抗紫外等問題。
本發明一種含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑的制備方法，其特征在于制備步驟如下：
（1）制備種子液：取標準菌株bthd73接種于lb固體培養基中，在30℃的恒溫培養箱中培養24小時，然后用接種環挑取單斑接種于5ml的lb液體培養基中，于30℃，200rpm培養箱中振蕩培養12小時，得到種子液；
（2）制備bt發酵液：取步驟（1）的種子液，按2%的體積比接種至lb液體培養基中，于30℃，200rpm培養箱中振蕩培養，直到芽孢脫落量以及伴孢晶體的含量均為50%，得到bt發酵液；
（3）制備胞晶混合物：將上述發酵液調節ph值至4.5，然后8000rpm，離心30分鐘收集沉淀物，得到胞晶混合物；
（4）制備含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑：按質量份組配，取步驟（3）的胞晶混合物5~18份、納米氫氧化鎂2~8份，攪拌混勻；加入乳化劑0.1~0.4份、增稠劑0.1~0.25份、分散劑0.1~0.4份、展著劑0.5~2.0份、防凍劑1.0~2.5份，攪拌混勻；在60℃條件下烘至含水率為5%，取出，研磨粉碎，過75微米的篩，得到含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑。
其中，步驟（4）中所述的按質量份組配：取步驟（3）的胞晶混合物12份、納米氫氧化鎂6份，攪拌混勻；加入乳化劑0.2份、增稠劑0.15份、分散劑0.3份、展著劑1份、防凍劑1.5份，攪拌混勻。
步驟（4）中所述的按質量份組配：取步驟（3）的胞晶混合物5份、納米氫氧化鎂4份，攪拌混勻；加入乳化劑0.3份、增稠劑0.2份、分散劑0.2份、展著劑0.5份、防凍劑2份，攪拌混勻。
步驟（4）中所述的乳化劑為吐溫60、增稠劑為黃原膠、分散劑為木質素磺酸鈣、展著劑為油酸鈉、防凍劑為異丙醇。
所述納米氫氧化鎂，由市場購得。
本發明的優點及有益之處：
1、本發明以納米氫氧化鎂作為載體，加入吐溫60作為乳化劑，黃原膠作為增稠劑，木質素磺酸鈣作為分散劑，油酸鈉作為展著劑，異丙醇作為防凍劑。且添加了新的載體、新的助劑，彌補了當前bt粉劑的缺陷。
2、本發明的bt可濕性粉劑中，以納米氫氧化鎂作為bt胞晶混合物的載體，具有較高的吸附容量，并且能夠有效的保護bt有效成分，在強紫外照射4.5h后仍能維持很高的生物活性，比不含納米氫氧化鎂的bt可濕性粉劑的致死率高5倍。
3、本發明的bt可濕性粉劑具有很好的殺蟲活性，與僅含胞晶混合物的粉劑相比，其生物活性提高了12倍；并且本發明的胞晶混合物的用量少，僅含6~18%，而現有的bt可濕性粉劑胞晶混合物含量一般為50%，cn102027999a專利的胞晶混合物含量達50%~70%，相比之下，本發明的bt可濕性粉劑，大大降低了胞晶混合物的用量，具有防治效率高且社會經濟效益高的特點。
具體實施方式為了進一步闡明本發明而不是限制本發明，以下結合實施例加以說明。下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。
實施例一、一種含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑的制備方法，包括以下步驟：
（1）制備種子液：取標準菌株bthd73接種于lb固體培養基中，在30℃的恒溫培養箱中培養24小時，然后用接種環挑取單斑接種于5ml的lb液體培養基中，于30℃，200rpm培養箱中振蕩培養12小時，得到種子液；所述的lb固體培養基：胰蛋白胨10g/l，酵母粉5g/l，氯化鈉10g/l，瓊脂粉5g/l；lb液體培養基：胰蛋白胨10g/l，酵母粉5g/l，氯化鈉10g/l，ph值7.0。
（2）制備bt發酵液：取步驟（1）的種子液，按2%的體積比接種至100ml的lb液體培養基中，于30℃,200rpm培養箱中振蕩培養，直到芽孢脫落量以及伴孢晶體的含量均為50%，得到bt發酵液；
（3）制備胞晶混合物：將上述發酵液調節ph值至4.5，然后8000rpm，離心30分鐘收集沉淀物，得到胞晶混合物；
（4）制備含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑：按質量份組配，取步驟（3）的胞晶混合物12份、納米氫氧化鎂6份，攪拌混勻；加入乳化劑0.2份、增稠劑0.15份、分散劑0.3份、展著劑1份、防凍劑1.5份，攪拌混勻，在60℃條件下烘至含水率為5%，取出，研磨粉碎，過75微米的篩，得到含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑。
實施例二、一種含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑的生物活性測定
1、確定bt胞晶混合物的質量，利用棉鈴蟲2齡幼蟲進行生物活性測定。具體測定方法為：配置新鮮的飼料至96孔板中，往孔板中均勻的加入不同重量百分比的胞晶混合物。每孔加入3只幼蟲，每個處理重復12次。具體結果如表1所示。同時以加入無菌水作為空白對照。處理后置于溫度為25±2℃，光照時間為14h的生化培養箱中培養，24h后觀察幼蟲的生長狀況，記錄死亡數,計算校正死亡率。
表1不同質量胞晶混合物的生物活性
注：發酵菌株為bthd73標準菌株。供試昆蟲為棉鈴蟲，按標準進行飼養并生測。從表1可以看出，hd73胞晶混合物對棉鈴蟲的殺蟲效果良好。計算得到其lc50值為104.2ug/l。
2、確定納米氫氧化鎂的含量，固定胞晶混合物的重量百分比為12%，具體配比以及實驗結果如表2所示。
表2不同配比的胞晶混合物和納米氫氧化鎂的生物活性
從表2可以看出，胞晶混合物和納米氫氧化鎂的質量分別為12%和6%時對供試昆蟲的殺蟲效率最好。
3、考察不同比例的助劑成分對其殺蟲效果的影響。固定胞晶混合物和納米氫氧化鎂的質量百分比分別為12%和6%，根據不同助劑單組份對bt殺蟲活性的影響，本發明通過正交試驗設計了l16=5因素4水平實驗，并測定了4組試驗產品對供試昆蟲的生物活性。各原料配比試驗結果如表3所示。
表3不同配比助劑（重量百分比）的bt可濕性粉劑的生物活性
注：除去各組分的含量，余量為水。如表3所示，2號組產品的生物活性最高。即hd73胞晶混合物、納米氫氧化鎂、吐溫20、黃原膠、木質素磺酸鈣、油酸鈉和異丙醇的質量百分數分別為：12%、6%、0.2%、0.15%、0.3%、1.0%、1.5%。
4、對于表3中組別2的樣品，測定了其lc50。結果表明，組別2的lc50值為8.75ug/l，與單獨的胞晶混合物粉劑相比，生物活性提高了12倍。
5、使用表3中組別2的配方，考察強紫外照射下含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑的殺蟲活性。取10g樣品溶解在100ml的蒸餾水中，置于254nm紫外燈30cm處照射不同的時間，然后測定其對棉鈴蟲的生物活性。同時以不含納米氫氧化鎂的bt可濕性粉劑為對照（ck），對比經紫外照射后兩種可濕性粉劑的校正死亡率。結果如表4所示。
表4含納米氫氧化鎂bt可濕性粉劑的抗紫外性能
以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋范圍。