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技術(shù)領(lǐng)域：
】本發(fā)明屬于農(nóng)藥制備
技術(shù)領(lǐng)域：
。更具體地，本發(fā)明涉及一種辛酰溴苯腈納米緩釋制劑，還涉及所述辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備方法，還涉及所述辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的用途。
背景技術(shù)：
：辛酰溴苯腈(3,5-二溴-4-辛酰氧苯甲腈，bromoxyniloctanoate)是一種廣譜、選擇性苗后莖葉處理觸殺型除草劑，由于該產(chǎn)品具有顯著的除草性能，可以用于防除一年生和多年生闊葉雜草，同時(shí)，它對(duì)禾本科作物具有較高的選擇性，能安全使用于作物各個(gè)生長(zhǎng)期，它廣泛用于麥田、玉米、高梁、甘蔗、亞麻、洋蔥等多種作物田，防除蓼、藜、莧、麥瓶草、龍葵、蒼耳、田旋花等多種闊葉雜草。因此，辛酰溴苯腈正越來(lái)越多地受到植保部門的關(guān)注與運(yùn)用。然而，與其他傳統(tǒng)農(nóng)藥一樣，辛酰溴苯腈依然存在著如農(nóng)藥利用率低、有效成分釋放速度快、藥效持續(xù)時(shí)間短、對(duì)水土污染嚴(yán)重等問(wèn)題。農(nóng)藥緩釋制劑開(kāi)發(fā)是解決上述傳統(tǒng)農(nóng)藥劑型問(wèn)題的重要方法，農(nóng)藥緩釋劑具有以下特點(diǎn)：它藥劑釋放劑量和時(shí)間可以得到有效地控制，藥物作用有效時(shí)間更持久。不僅如此，它還能改善藥劑的物理性能，減少飄移；能將液體農(nóng)藥固體化，方便貯存、運(yùn)輸、使用和包裝處理；可以使高毒農(nóng)藥低毒化，降低制劑的急性毒性，減輕殘留及刺激性氣味，降低高毒農(nóng)藥在使用過(guò)程中對(duì)人、畜及有益微生物的急性中毒和傷害，避免或減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染；減少農(nóng)藥在環(huán)境中的光解、水解、生物降解、揮發(fā)、流失和化學(xué)反應(yīng)等，因此農(nóng)藥使用量大大減少，而持效期大大延長(zhǎng)，減少施藥次數(shù)。納米緩釋顆粒不僅具備緩釋制劑的各種優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)由于其粒徑小而具有特殊的優(yōu)勢(shì)，目前已成為農(nóng)藥新劑型的方向和研究熱點(diǎn)。表面包裹與交聯(lián)是對(duì)納米粒子修飾的重要途徑。納米粒子經(jīng)過(guò)包裹和交聯(lián)后，致密性改變導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、親水性、生物可降解性，毒性等一系列理化活性和生物活性的改變，從而極大地拓寬了其在農(nóng)藥方面等方面的運(yùn)用。此外，納米載體的交聯(lián)度可以很大程度上影響藥物的包載效率和藥物釋放行為。因此，表面交聯(lián)是提高納米粒子載藥效率并使所包載在載體上的藥物實(shí)現(xiàn)緩釋和控釋的重要手段之一。本發(fā)明人針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的諸多技術(shù)缺陷，在總結(jié)現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)之上，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究與分析總結(jié)，終于完成了本發(fā)明。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：[要解決的技術(shù)問(wèn)題]本發(fā)明的目的是提供一種辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的用途。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備方法。該制備方法的步驟如下：a、負(fù)載辛酰溴苯腈按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)辛酰溴苯腈丙酮溶液的比1：5～20，把介孔納米二氧化硅加入到濃度為以重量計(jì)45～55％的辛酰溴苯腈在丙酮中的溶液里，使用超聲波儀進(jìn)行超聲處理5～60分鐘，再轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行旋蒸除去溶劑，得到負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅；b、殼聚糖包裹按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)殼聚糖醋酸水溶液的比1：0.2～1.0，把在步驟a得到的負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅加到濃度為以重量計(jì)3～8％殼聚糖醋酸水溶液中，接著攪拌1～3小時(shí)，再轉(zhuǎn)移到離心管中，離心分離，收集沉淀，用純水洗滌3～5遍，以除去剩余的殼聚糖，得到被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅；c、戊二醛交聯(lián)按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)純水的比1：2～10，將在步驟b收集的被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅分散在純水中，接著往該溶液滴加濃度為以重量計(jì)2.0～3.0％的戊二醛交聯(lián)劑水溶液，該溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.2～0.5，接著攪拌1～3小時(shí)；將整個(gè)反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至離心管中離心分離，收集沉淀物，再用純水洗滌除去未反應(yīng)的交聯(lián)劑，接著冷凍干燥或重新分散于磷酸鹽緩沖液中，得到辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟a中，所述介孔納米二氧化硅顆粒的粒徑分布是80～200nm，電位分布是-30～-10mv。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟a中，超聲波儀的超聲波功率是80～100w。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟b與步驟c中，在轉(zhuǎn)速6000～12000rpm的條件下離心分離。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，在步驟c中，以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)磷酸鹽緩沖液的比是1:2～4。本發(fā)明涉及所述制備方法制備得到的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式，辛酰溴苯腈納米緩釋制劑以介孔納米二氧化硅為載體，在介孔納米二氧化硅內(nèi)裝載辛酰溴苯腈，介孔納米二氧化硅表面被戊二醛交聯(lián)改性的殼聚糖包裹。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式，辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的粒徑分布是150～300nm，電位分布是10～30mv。本發(fā)明涉及所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑在農(nóng)作物除草中的用途。下面將更詳細(xì)地描述本發(fā)明本發(fā)明涉及一種辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備方法。該制備方法的步驟如下：a、負(fù)載辛酰溴苯腈按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)辛酰溴苯腈丙酮溶液的比1：5～20，把介孔納米二氧化硅加入到濃度為以重量計(jì)45～55％的辛酰溴苯腈在丙酮中的溶液里，使用超聲波儀進(jìn)行超聲處理5～60分鐘，再轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行旋蒸除去溶劑，得到負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅；介孔納米二氧化硅具有孔材料與納米材料的雙重功能，所以在催化、吸附等應(yīng)用領(lǐng)域具有非常獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。介孔納米二氧化硅因其來(lái)源廣泛、價(jià)格低廉、制備工藝簡(jiǎn)單而廣泛運(yùn)用于藥物載體、基因載藥以及生物細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記物載體。在本發(fā)明中，這個(gè)步驟使用超聲儀超聲的基本目的是介孔納米二氧化硅通過(guò)介孔將辛酰溴苯腈負(fù)載在介孔納米二氧化硅內(nèi)部并吸附在其表面上，形成復(fù)合結(jié)構(gòu)。在本發(fā)明中，使用超聲波儀在超聲波功率80～100w的條件下進(jìn)行超聲處理，如果超聲波功率超過(guò)所述的范圍，則降低負(fù)載效率。同樣地，超聲處理時(shí)間為5～60分鐘，如果超聲處理時(shí)間超過(guò)所述的范圍，則也會(huì)降低負(fù)載效率。發(fā)明使用的超聲波儀是目前市場(chǎng)上銷售的產(chǎn)品，例如由深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司以商品名超聲波清洗機(jī)銷售的產(chǎn)品。本發(fā)明使用介孔納米二氧化硅顆粒的粒徑分布是80～200nm，電位分布是-30～-10mv。如果介孔納米二氧化硅的粒徑分布或電位分布超過(guò)所述的范圍，則會(huì)穩(wěn)定性差，易形成團(tuán)聚，影響使用效果。在本發(fā)明中，介孔納米二氧化硅顆粒粒徑與電位都是使用由馬爾文公司以商品名zetasizer銷售的粒度儀檢測(cè)在其說(shuō)明書(shū)描述的條件下測(cè)定的，有關(guān)粒徑與電位測(cè)定在下面不再贅述。本發(fā)明使用的介孔納米二氧化硅是目前市場(chǎng)上銷售的產(chǎn)品，例如由上海羧菲生物醫(yī)藥有限公司以商品名msns-90銷售的產(chǎn)品。在本發(fā)明中，如果介孔納米二氧化硅與辛酰溴苯腈丙酮溶液的比大于1：5或小于1：20，均會(huì)使負(fù)載效率降低；因此，介孔納米二氧化硅與辛酰溴苯腈丙酮溶液的比為1：5～20是合理的，優(yōu)選地是1：8～16，更優(yōu)選地是1：12～14。在本發(fā)明中，辛酰溴苯腈丙酮溶液的濃度為以重量計(jì)45～55％，如果該濃度超過(guò)這個(gè)范圍時(shí)，則使辛酰溴苯腈析出或負(fù)載效率減低。在這個(gè)步驟中，使用超聲波儀進(jìn)行超聲處理的基本目的在于加速藥物通過(guò)介孔進(jìn)入二氧化硅內(nèi)部。在本發(fā)明中，使用超聲波儀在超聲波功率400～600w的條件下進(jìn)行超聲處理。本發(fā)明使用的超聲波儀是目前市場(chǎng)上銷售的產(chǎn)品，例如由濟(jì)南巴克超聲波科技有限公司以商品名小型超聲波清洗機(jī)銷售的產(chǎn)品。在這個(gè)步驟中，超聲處理的物料溶液需要在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中旋蒸除去溶劑，本發(fā)明使用的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀是目前市場(chǎng)上銷售的產(chǎn)品，例如由鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司以商品名旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀銷售的產(chǎn)品。b、殼聚糖包裹按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)殼聚糖醋酸水溶液的比1：0.2～1.0，把在步驟a得到的負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅加到濃度為以重量計(jì)3～8％殼聚糖醋酸水溶液中，接著攪拌1～3小時(shí)，再轉(zhuǎn)移到離心管中，離心分離，收集沉淀，用純水洗滌3～5遍，以除去剩余的殼聚糖，得到被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅；本發(fā)明使用包裹納米粒子的殼聚糖來(lái)源豐富，是地球上僅次于纖維素的第二大可再生資源，也是自然界中唯一的天然陽(yáng)離子高分子，具有良好的生物相容性、生物可降解性。此外，殼聚糖分子含有大量的氨基和羥基，介孔納米二氧化硅經(jīng)殼聚糖包裹，其親水性會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)，穩(wěn)定性提高，并且能有效減緩負(fù)載在介孔納米二氧化硅內(nèi)辛酰溴苯腈的釋放速度。本發(fā)明使用殼聚糖醋酸水溶液濃度為以重量計(jì)3～8％，濃度低于所述范圍則會(huì)降低包裹效率，濃度高于所述范圍則流動(dòng)性很差。在本發(fā)明中，如果介孔納米二氧化硅與殼聚糖醋酸水溶液的比大于1：0.2，則殼聚糖包裹厚度過(guò)薄；如果介孔納米二氧化硅與殼聚糖醋酸水溶液的比小于1：1.0，則殼聚糖包裹厚度過(guò)厚；因此，介孔納米二氧化硅與殼聚糖醋酸水溶液的比為1：0.2～1.0是恰當(dāng)?shù)模粌?yōu)選地是1：0.3～0.8，更優(yōu)選地是1：0.4～0.7。在這個(gè)步驟中，離心分離是在轉(zhuǎn)速6000～12000rpm的條件下進(jìn)行的。本發(fā)明使用的離心設(shè)備是目前市場(chǎng)上銷售的產(chǎn)品，例如由湖南湘立科學(xué)儀器有限公司以商品名高速冷凍離心機(jī)銷售的產(chǎn)品。使用上述的粒度儀檢測(cè)測(cè)定被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅顆粒粒徑與電位，結(jié)果顯示介孔納米二氧化硅包裹殼聚糖后，粒徑出現(xiàn)變化，電位明顯升高，并且電位從負(fù)電反轉(zhuǎn)為正電，具體結(jié)果見(jiàn)下表1。c、戊二醛交聯(lián)按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)純水的比1：2～10，將在步驟b收集的被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅分散在純水中，接著往該溶液滴加濃度為以重量計(jì)2.0～3.0％的戊二醛交聯(lián)劑水溶液，該溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.2～0.5，接著攪拌1～3小時(shí)；將整個(gè)反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至離心管中，離心分離，收集沉淀物，再用純水洗滌除去未反應(yīng)的交聯(lián)劑，接著冷凍干燥或重新分散于磷酸鹽緩沖液中，得到辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。戊二醛是醛胺縮合時(shí)最常用的縮合劑，它能有效地與殼聚糖氨基發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，從而增強(qiáng)表面殼聚糖的包裹強(qiáng)度。具體地，戊二醛與殼聚糖氨基交聯(lián)反應(yīng)的情況可以參見(jiàn)文獻(xiàn)：jessicaa,etal.nanofiber[j].biomacromolecules,2007,8:594-601在本發(fā)明中，如果介孔納米二氧化硅純水溶液與戊二醛水溶液的體積比大于1：0.2，則交聯(lián)不成功，無(wú)法達(dá)到緩釋效果；如果介孔納米二氧化硅純水溶液與戊二醛水溶液的體積比小于1：0.5，則交聯(lián)過(guò)度，使藥物釋放不出；因此，介孔納米二氧化硅純水溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.2～0.5是恰當(dāng)?shù)模瑑?yōu)選地是1：0.3～0.5，更優(yōu)選地是1：0.3～0.4。使用上述的粒度儀檢測(cè)測(cè)定在戊二醛交聯(lián)后，介孔納米二氧化硅顆粒的粒徑和電位均出現(xiàn)不同程度的降低，具體參見(jiàn)附圖2。使用電子掃描顯微鏡觀察，本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋制劑為球形，并且大小均勻，具體參見(jiàn)附圖3。在這個(gè)步驟中，以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)磷酸鹽緩沖液的比是1:2～4。本發(fā)明還涉及所述制備方法制備得到的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑是以介孔納米二氧化硅為載體，在介孔納米二氧化硅內(nèi)裝載辛酰溴苯腈，介孔納米二氧化硅表面被戊二醛交聯(lián)改性的殼聚糖包裹。所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑，其特征在于它的粒徑分布是150～300nm，電位分布是10～30mv。本發(fā)明涉及所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑在農(nóng)作物除草中的用途。根據(jù)本發(fā)明，所述的農(nóng)作物雜草例如是蓼、藜、莧、麥瓶草、龍葵、蒼耳、田旋花等多種闊葉雜草。所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑使用方法直接兌水使用后噴灑。所述的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑使用量150-300mg/畝。[有益效果]本發(fā)明的有益效果是：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制備步驟簡(jiǎn)單、條件溫和、工藝綠色環(huán)保、能耗少、無(wú)三廢及輻射與噪聲等污染，分離與提純工藝操作簡(jiǎn)便，所得體系穩(wěn)定易于保存，是一種納米緩釋制劑制備的通用工藝。所制備的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑有效延長(zhǎng)辛酰溴苯腈的釋藥時(shí)間，減少農(nóng)藥噴灑次數(shù)，降低大風(fēng)雨水天氣對(duì)藥效的影響，降低勞動(dòng)成本，提高制備效率。與此同時(shí)，噴灑時(shí)使用水代替溶劑油，減少農(nóng)藥揮發(fā)對(duì)操作人員健康造成的危害，有望帶來(lái)良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。【附圖說(shuō)明】圖1基于介二氧化硅的辛酰溴苯腈納米緩釋劑的制備流程示意圖；圖2是實(shí)施例1制備的辛酰溴苯腈納米緩釋劑的掃描電鏡圖；圖3是實(shí)施例5不同辛酰溴苯腈納米粒的藥物釋放行為曲線圖。【具體實(shí)施方式】通過(guò)下述實(shí)施例將能夠更好地理解本發(fā)明。實(shí)施例1：本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：a、負(fù)載辛酰溴苯腈按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)辛酰溴苯腈丙酮溶液的比1：5，把介孔納米二氧化硅(表1之a(chǎn))加入到濃度為以重量計(jì)50％的辛酰溴苯腈在丙酮中的溶液里，使用超聲波儀進(jìn)行超聲處理(80w，60分鐘)，再轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中旋蒸除去溶劑，得到負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅；b、殼聚糖包裹按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)殼聚糖醋酸水溶液的比1：0.2，把在步驟a得到的負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅加到濃度為以重量計(jì)5％殼聚糖醋酸水溶液中，接著攪拌1小時(shí)，再轉(zhuǎn)移到離心管中，6000rpm離心60分鐘分離并收集沉淀，用純水洗滌3遍，以除去剩余的殼聚糖，得到被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅(表1之b)；c、戊二醛交聯(lián)按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)純水的比1：5，將在步驟b收集的被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅分散在純水中，接著往該溶液滴加濃度為以重量計(jì)2.5％的戊二醛交聯(lián)劑水溶液，該溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.2，接著攪拌3小時(shí)；將整個(gè)反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至離心管中，8000rpm離心30分鐘分離并收集沉淀，再用純水洗滌除去未反應(yīng)的交聯(lián)劑，冷凍干燥，得到辛酰溴苯腈納米緩釋制劑(表1之c)，它以介孔納米二氧化硅為載體，在介孔納米二氧化硅內(nèi)裝載辛酰溴苯腈，介孔納米二氧化硅表面被戊二醛交聯(lián)改性的殼聚糖包裹。表1：制備過(guò)程中三種產(chǎn)物的粒徑分布與電位樣品粒徑(納米)電位(毫伏)a100.3±10.4-20.4±3.8b150.7±42.225.3±4.0c140.6±32.518.4±3.7附圖2的掃描電子顯微鏡結(jié)果顯示，辛酰溴苯腈納米緩釋制劑(c)納米粒粒徑分布均勻。實(shí)施例2：本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：a、負(fù)載辛酰溴苯腈按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)辛酰溴苯腈丙酮溶液的比1：10，將介孔納米二氧化硅加入到濃度為以重量計(jì)50％的辛酰溴苯腈在丙酮中的溶液里，使用超聲波儀進(jìn)行超聲處理(100w,30分鐘)，再轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中旋蒸除去溶劑，得到負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅；b、殼聚糖包裹按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)殼聚糖醋酸水溶液的比1：1.0，把在步驟a得到的負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅加到濃度為以重量計(jì)5％殼聚糖醋酸水溶液中，接著攪拌1.0小時(shí)，再轉(zhuǎn)移到離心管中，12000rpm離心10分鐘分離并收集沉淀，，用純水洗滌3遍，以除去剩余的殼聚糖，得到被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅；c、戊二醛交聯(lián)按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)純水的比1：5，將在步驟b收集的被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅分散在純水中，接著往該溶液滴加濃度為以重量計(jì)2.5％的戊二醛交聯(lián)劑水溶液，該溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.4，接著攪拌3.0小時(shí)；將整個(gè)反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至離心管中，12000rpm離心30分鐘分離并收集沉淀，收集沉淀物，再用純水洗滌除去未反應(yīng)的交聯(lián)劑，接著按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)磷酸鹽緩沖液的比為1:2.0重新分散于磷酸鹽緩沖液中，得到辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。實(shí)施例3：本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋制劑的制備該實(shí)施例的實(shí)施步驟如下：a、負(fù)載辛酰溴苯腈按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)辛酰溴苯腈丙酮溶液的比1：20，將介孔納米二氧化硅加入到濃度為以重量計(jì)50％的辛酰溴苯腈在丙酮中的溶液里，使用超聲波儀中進(jìn)行超聲處理(100w,5分鐘)，再轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中旋蒸除去溶劑，得到負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅；b、殼聚糖包裹按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)殼聚糖醋酸水溶液的比1：0.5，把在步驟a得到的負(fù)載辛酰溴苯腈的介孔納米二氧化硅加到濃度為以重量計(jì)8％殼聚糖醋酸水溶液中，接著攪拌3.0小時(shí)，再轉(zhuǎn)移到離心管中，10000rpm離心30分鐘分離心分離，收集沉淀，用純水洗滌3遍，以除去剩余的殼聚糖，得到被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅；c、戊二醛交聯(lián)按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)純水的比1：5，將在步驟b收集的被殼聚糖包裹的介孔納米二氧化硅分散在純水中，接著往該溶液滴加濃度為以重量計(jì)2.5％的戊二醛交聯(lián)劑水溶液，該溶液與戊二醛水溶液的體積比為1：0.5，接著攪拌0.5小時(shí)；將整個(gè)反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至離心管中，10000rpm離心30分鐘分離并收集沉淀，再用純水洗滌除去未反應(yīng)的交聯(lián)劑，接著按照以毫克計(jì)介孔納米二氧化硅與以毫升計(jì)磷酸鹽緩沖液的比為1:2.0重新分散于磷酸鹽緩沖液中，得到辛酰溴苯腈納米緩釋制劑。實(shí)施例4：本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋制劑藥物負(fù)載率量(c)和(lr)的檢測(cè)取毫克(m1)計(jì)按實(shí)施例3所制得的辛酰溴苯腈納米緩釋制劑，用力研磨15分鐘后，加入等質(zhì)量的丙酮，超聲2小時(shí)后，離心分離出取上清液(m2)，用外標(biāo)法測(cè)定辛酰溴苯腈的濃度(c)，按如下公式計(jì)算辛酰溴苯腈納米緩釋制劑負(fù)載率，測(cè)定結(jié)果顯示辛酰溴苯腈納米緩釋制劑負(fù)載率為73.5±5.1％。負(fù)載量(c)＝cm2負(fù)載率(lr)＝cm2/m1×100％實(shí)施例5：本發(fā)明辛酰溴苯腈納米緩釋劑藥效試驗(yàn)按實(shí)施例2的方法制備a、b、c三種辛酰溴苯腈納米粒，按實(shí)施例5的方法測(cè)定各自的藥物負(fù)載量c。按如下步驟繪制三者的釋藥行為曲線圖：1：取3毫克納米粒置于mwco14000的透析袋中，再將其放入裝有15ml磷酸鹽緩沖液的50ml離心管中，每個(gè)樣品做3組平行實(shí)驗(yàn)。將其放入搖床內(nèi)的水浴燒杯中，37℃，100rpm搖晃；2：在10min,20min,30min,6h,12h,1d，5d,10d和15d，分別取1ml透析液于離心管(用于高效液相檢測(cè))，另外取1ml磷酸鹽緩沖液加入透析液；3：將所取不同時(shí)間點(diǎn)的透析液用高效液相色譜測(cè)定辛酰溴苯腈的濃度ci，累積釋放率的計(jì)算公式為——cumulativerelease％＝(cn*15+∑i＝1-(n-1)ci)/(c)其中，c表示納米粒中辛酰溴苯腈含量；15為總的磷酸鹽緩沖液體積；4：將累積釋放率對(duì)時(shí)間作圖可得到a、b、c三種納米粒體辛酰溴苯腈外釋放曲線,如附圖3所示:隨著殼聚糖的包裹和交聯(lián)劑的加入，藥物的釋放速度明顯減慢。當(dāng)前第1頁(yè)12