本發明屬于生物技術領域，特別涉及一種臍血造血干細胞的凍存液。
背景技術：
臍血也叫臍帶血，是指胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液，通常是廢棄不用的。近十幾年的研究發現，臍血中含有可以重建人體造血和免疫系統的造血干細胞，可用于造血干細胞移植，治療多種疾病。因此，臍血已成為造血干細胞的重要來源，特別是無血緣關系造血干細胞的來源。也是一種非常重要的人類生物資源。
臍血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成人體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞，神經細胞，骨骼細胞等等。隨著科技的發達，醫學專家研究出利用臍帶血中的干細胞來治療疾病的方法。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體。這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。近三十年來的醫學研究發現，臍血中含有非常豐富的造血干細胞(hsc)，可以重建人體造血和免疫系統，可用于造血干細胞移植，治療血液系統、免疫系統，以及遺傳代謝性及先天性疾病。因此，臍血已成為造血干細胞的重要來源，已經被廣泛地應用于臨床，是寶貴的人類生物資源。
世界范圍內，目前臍血已經用于治療各種類型白血病、再生障礙性貧血、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、神經母細胞瘤、粘多糖病、地中海貧血、骨髓發育不良癥候群、原發性免疫缺陷病、慢性肉芽腫等80多種疾病。
我國衛生部頒發的《臍帶血造血干細胞治療技術管理規范(試行)》中規定，臍帶血造血干細胞治療技術適應癥包括以下10余類：骨髓衰竭、血紅蛋白病、重癥免疫缺陷病、代謝性疾病、白血病、骨髓增生異常綜合癥、惡性淋巴瘤、多發性骨髓瘤、惡性腫瘤、重癥再生障礙性貧血和重癥放射病等。
技術實現要素：
本發明的目的是提供一種臍血造血干細胞的凍存液，以減少凍存液對臍血造血干細胞的損傷作用。
為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：
一種臍血造血干細胞的凍存液，所述凍存液由凍存保護劑、胎牛血清、培養基組成；
所述培養基由以下組分組成：
基礎培養基、人血清白蛋白、楊梅素、三七總皂苷、大黃素、亞油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、堿性成纖維細胞生長因子、丙酮酸、l-谷氨酰胺、葉酸、β-巰基乙醇、黃芪多糖、轉鐵蛋白、維生素、氨基酸。
優選的，所述培養基中，各組分的含量如下：
基礎培養基10-50g/l，人血清白蛋白5-20g/l，楊梅素5-20mg/l，三七總皂苷5-20mg/l，大黃素5-20mg/l，亞油酸2-10mg/l，胰蛋白酶1-10mg/l，抑肽酶4-10mg/l，光蛋白聚糖5-20μg/l，堿性成纖維細胞生長因子1-10μg/l，丙酮酸5-15mg/l，l-谷氨酰胺5-20mg/l，葉酸1-15mg/l，β-巰基乙醇2-10mg/l，黃芪多糖50-80mg/l，轉鐵蛋白1-10mg/l，維生素80-500mg/l，氨基酸80-500mg/l。
更優選的，所述培養基中，各組分的含量如下：
基礎培養基20-30g/l，人血清白蛋白10-15g/l，楊梅素10-15mg/l，三七總皂苷10-15mg/l，大黃素10-15mg/l，亞油酸5-8mg/l，胰蛋白酶4-8mg/l，抑肽酶6-9mg/l，光蛋白聚糖10-15μg/l，堿性成纖維細胞生長因子2-8μg/l，丙酮酸8-12mg/l，l-谷氨酰胺10-15mg/l，葉酸5-10mg/l，β-巰基乙醇5-8mg/l，黃芪多糖60-70mg/l，轉鐵蛋白2-8mg/l，維生素180-360mg/l，氨基酸180-360mg/l。
再優選的，所述培養基中，各組分的含量如下：
基礎培養基24g/l，人血清白蛋白12g/l，楊梅素12mg/l，三七總皂苷12mg/l，大黃素13mg/l，亞油酸6mg/l，胰蛋白酶5mg/l，抑肽酶8mg/l，光蛋白聚糖13μg/l，堿性成纖維細胞生長因子5μg/l，丙酮酸11mg/l，l-谷氨酰胺12mg/l，葉酸8mg/l，β-巰基乙醇6mg/l，黃芪多糖68mg/l，轉鐵蛋白5mg/l，維生素280mg/l，氨基酸260mg/l。
優選的，所述人血清白蛋白為人臍血人血清白蛋白；基礎培養基為imdm培養基；所述維生素為水溶性維生素；所述氨基酸為多種氨基酸復合物。
優選的，所述凍存保護劑為滲透性冷凍保護劑，由甘油、二甲基亞砜、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇的一種或多種組成。
優選的，所述凍存保護劑、胎牛血清、培養基的體積比為1：1～3：2～4。
有益效果：采用本發明凍存液對臍血造血干細胞進行凍存，大大減少了凍存液對造血干細胞的損傷作用，有利于臍血造血干細胞在凍存及復蘇過程中細胞活力的提高，能夠更好的保持臍血造血干細胞的生物學特征。
具體實施方式
根據下述實施例，可以更好的理解本發明。然而，本領域的技術人員容易理解，實施例所描述的具體的物料配比、工藝條件及其結果僅用于說明本發明，而不應當也不會限制權利要求書中所詳細描述的本發明。
實施例1
一種臍血造血干細胞的凍存液，由凍存保護劑、胎牛血清、培養基按照體積比為1：1：4組成；
其中，培養基中，各組分的含量如下：基礎培養基24g/l，人血清白蛋白12g/l，楊梅素12mg/l，三七總皂苷12mg/l，大黃素13mg/l，亞油酸6mg/l，胰蛋白酶5mg/l，抑肽酶8mg/l，光蛋白聚糖13μg/l，堿性成纖維細胞生長因子5μg/l，丙酮酸11mg/l，l-谷氨酰胺12mg/l，葉酸8mg/l，β-巰基乙醇6mg/l，黃芪多糖68mg/l，轉鐵蛋白5mg/l，維生素280mg/l，氨基酸260mg/l。
凍存保護劑為二甲基亞砜。
取臍血造血干細胞，加入上述凍存液中，吹打均勻，形成細胞懸液，置于凍存管中，對臍血造血干細胞進行凍存。
實施例2
一種臍血造血干細胞的凍存液，由凍存保護劑、胎牛血清、培養基按照體積比為1：2：2組成；
其中，培養基中，各組分的含量如下：基礎培養基10g/l，人血清白蛋白15g/l，楊梅素10mg/l，三七總皂苷15mg/l，大黃素10mg/l，亞油酸2mg/l，胰蛋白酶10mg/l，抑肽酶10mg/l，光蛋白聚糖10μg/l，堿性成纖維細胞生長因子1μg/l，丙酮酸5mg/l，l-谷氨酰胺15mg/l，葉酸15mg/l，β-巰基乙醇10mg/l，黃芪多糖80mg/l，轉鐵蛋白1mg/l，維生素360mg/l，氨基酸180mg/l。
凍存保護劑為二甲基亞砜、甘油、乙酰胺的混合物。
取臍血造血干細胞，加入上述凍存液中，吹打均勻，形成細胞懸液，置于凍存管中，對臍血造血干細胞進行凍存。
實施例3
一種臍血造血干細胞的凍存液，由凍存保護劑、胎牛血清、培養基按照體積比為1：3：3組成；
其中，培養基中，各組分的含量如下：基礎培養基50g/l，人血清白蛋白5g/l，楊梅素5mg/l，三七總皂苷20mg/l，大黃素5mg/l，亞油酸8mg/l，胰蛋白酶1mg/l，抑肽酶4mg/l，光蛋白聚糖20μg/l，堿性成纖維細胞生長因子8μg/l，丙酮酸8mg/l，l-谷氨酰胺5mg/l，葉酸5mg/l，β-巰基乙醇2mg/l，黃芪多糖50mg/l，轉鐵蛋白3mg/l，維生素500mg/l，氨基酸80mg/l。
凍存保護劑為二甲基亞砜、乙二醇、丙二醇的混合物。
取臍血造血干細胞，加入上述凍存液中，吹打均勻，形成細胞懸液，置于凍存管中，對臍血造血干細胞進行凍存。
實施例4
一種臍血造血干細胞的凍存液，由凍存保護劑、胎牛血清、培養基按照體積比為1：3：4組成；
其中，培養基中，各組分的含量如下：基礎培養基30g/l，人血清白蛋白10g/l，楊梅素15mg/l，三七總皂苷10mg/l，大黃素15mg/l，亞油酸8mg/l，胰蛋白酶8mg/l，抑肽酶6mg/l，光蛋白聚糖15μg/l，堿性成纖維細胞生長因子2μg/l，丙酮酸12mg/l，l-谷氨酰胺20mg/l，葉酸5mg/l，β-巰基乙醇8mg/l，黃芪多糖60mg/l，轉鐵蛋白2mg/l，維生素180mg/l，氨基酸500mg/l。
凍存保護劑為甲醇、乙二醇、丙二醇的混合物。
取臍血造血干細胞，加入上述凍存液中，吹打均勻，形成細胞懸液，置于凍存管中，對臍血造血干細胞進行凍存。
實施例5
一種臍血造血干細胞的凍存液，由凍存保護劑、胎牛血清、培養基按照體積比為1：2：4組成；
其中，培養基中，各組分的含量如下：基礎培養基50g/l，人血清白蛋白5g/l，楊梅素20mg/l，三七總皂苷5mg/l，大黃素20mg/l，亞油酸4mg/l，胰蛋白酶1mg/l，抑肽酶4mg/l，光蛋白聚糖5μg/l，堿性成纖維細胞生長因子10μg/l，丙酮酸15mg/l，l-谷氨酰胺10mg/l，葉酸1mg/l，β-巰基乙醇2mg/l，黃芪多糖50mg/l，轉鐵蛋白10mg/l，維生素240mg/l，氨基酸240mg/l。
凍存保護劑為甘油。
取臍血造血干細胞，加入上述凍存液中，吹打均勻，形成細胞懸液，置于凍存管中，對臍血造血干細胞進行凍存。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。