專利名稱：：一種真菌測試瓶的生產方法
技術領域：
：本發明涉及一種真菌測試瓶的生產方法，屬應用微生物檢測方法
技術領域：
。
背景技術：
：在科研和生產的實際工作中，常常需要對微生物的數量進行測定。對水體、空氣、土壤等環境中的微生物測定可以監測和評價其污染程度；對飲用水和工業循環冷卻水中的微生物測定可以評價其是否達標；對油田污水注水中微生物數量的測定則有助于評價污水注水水質等。因此，微生物數量的測定對科研和生產實際工作具有十分重要的指導作用和現實意義。微生物測定常用的方法有平板菌落計數法和絕跡稀釋法。平板菌落計數法是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的，取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數及稀釋倍數，計算出培養物中的活菌數；而絕跡稀釋法是將待測定的水樣逐級注入到試管中進行接種稀釋，直到最后一個試管中無菌生長為止，然后根據細菌生長情況和稀釋倍數，計算出水樣中細菌的數目。這兩種方法都有明顯的不足，平板菌落計數法測定結果誤差較大，而絕跡稀釋法操作極為繁瑣、費時。在工業循環冷卻水中普遍存在著真菌。真菌的存在會污染冷卻水水質，形成生物淤泥進而影響熱交換，并參與腐蝕。為了有效控制真菌危害，需對真菌進行準確測定。目前，國內外普遍采用平板菌落計數法測定工業循環冷卻水中的真菌，但該法測定結果誤差較大，并繁瑣、費時。因此，現有的傳統測試技術和測試手段存在明顯缺陷，遠不能滿足實際生產的要求。
發明內容為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種真菌測試瓶的生產方法，使所生產的測試瓶能夠快速準確地測定水樣中的真菌菌數。本發明是通過如下技術方案來實現上述目的的。在常溫下，分別取蛋白胨0.5%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、葡萄糖1.0%，蒸餾水98.35%，然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到容器中混合、充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調節到3.8-4.0，即配制成培養液；將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養液按每瓶9.Oml培養液裝入瓶中，然后加蓋、封口；將經加蓋封口的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、1.05Kg/cm2條件下進行高溫滅菌18分鐘，冷卻后即制成真菌測試瓶。本發明與現有的技術相比具有如下有益效果1、本發明所述的一種真菌測試瓶的生產方法，生產過程簡單，可靠性強，經濟實用。2、本發明所生產的真菌測試瓶能夠快速準確地測定水樣中的真菌的菌數，操作使用簡單、結果直接準確。3、本發明所生產的培養液的PH為3.8-4.0，只適合真菌生長，所培養出的微生物只是真菌，測試工作不會受細菌的干擾。具體實施例方式在常溫下(以配制IL培養液為例，以此類推)，分別稱取蛋白胨5.0g、磷酸二氫鉀1.0g、硫酸鎂0.5g、葡萄糖10.Og,然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到IL容量瓶中混合、再用蒸餾水定容到IL刻度線，充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調節到3.8-4.0，即配制成真菌測試瓶所需的培養液。將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養液按每瓶9.Oml培養液分裝入瓶中，然后用A-13型藥用膠塞加蓋，用普通抗生素玻璃瓶鋁蓋經專用封口器封口，最后用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、1.05Kg/cm2條件下將測試瓶進行集中滅菌18分鐘，冷卻后即制成真菌測試瓶。采用真菌測試瓶測定待測水樣中的真菌的菌數時，系采用絕跡稀釋法原理，將待測水樣用無菌注射器逐級注入測試瓶中稀釋培養，直到最后一個測試瓶無真菌生長為止，根據稀釋的倍數計算出待測水樣中真菌的數目。可采用以下的方法和步驟(1)準備數支相同的Iml醫用注射器，用蒸餾水清洗干凈后高溫滅菌(高壓蒸汽滅菌鍋12rC、1.05Kg/cm2下滅菌18分鐘)，冷卻備用。(2)根據待測水樣中真菌的大致多少，將數個上述的真菌測試瓶排成一組，并依次編上序號1、2、3、4……。(3)用上述滅菌后的無菌注射器取1.OmL待測水樣并注入到1號真菌測試瓶內，充分震蕩10秒。(4)另取一支無菌注射器從搖勻后的1號真菌測試瓶內取出1.OmL液體注入到2號真菌測試瓶內，充分震蕩10秒。(5)再另取一支無菌注射器從搖勻后的2號真菌測試瓶內取出1.OmL液體注入到3號真菌測試瓶內，充分震蕩10秒。(6)依次重復上述操作程序，一直到最后一瓶為止。(7)把上述加入待測水樣后的一組真菌測試瓶放在30°C(或現場溫度)培養箱內培養，經過3天后觀察測試瓶內的變化，判斷真菌的生長情況。(8)判斷標準無真菌存在的真菌測試瓶內的培養液無變化，而有真菌存在的真菌測試瓶內的培養液則變渾變濁，且培養液表面有真菌菌膜出現。(9)根據真菌測試瓶內指示真菌生長的情況和有真菌生長的測試瓶的瓶數，查表1可計算出待測水樣中的真菌菌數。表1單瓶真菌最大可能值<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>權利要求一種真菌測試瓶的生產方法，其特征在于在瓶內加入由蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖和蒸餾水組成的培養液，經加蓋封口、高溫蒸汽滅菌制成。2.根據權利要求1所述的一種真菌測試瓶的生產方法，其特征在于在常溫下分別取蛋白胨0.5%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、葡萄糖1.0%，蒸餾水98.35%，然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到容器中混合、充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調節到3.8-4.0，即配制成培養液。3.根據權利要求2所述的一種真菌測試瓶的生產方法，其特征在于將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養液按每瓶9.Oml培養液裝入瓶中，然后加蓋、封口。4.根據權利要求3所述的一種真菌測試瓶的生產方法，其特征在于將經加蓋封口的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、1.05Kg/cm2條件下進行高溫滅菌18分鐘。全文摘要本發明涉及一種真菌測試瓶的生產方法，屬應用微生物檢測方法
技術領域：
，其特征在于在常溫下，分別取蛋白胨0.5％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、葡萄糖1.0％、蒸餾水98.35％，然后依次用蒸餾水將其溶解，并加入到容器中混合、充分搖勻，用0.5mol/L的硫酸溶液將溶液的pH值調節到3.8～4.0，即配制成所需培養液；將所配制的培養液按每瓶9.0ml培養液裝入瓶中，然后加蓋、封口、高溫滅菌、冷卻后即制成真菌測試瓶。本發明所述的一種真菌測試瓶的生產方法，生產過程簡單，可靠性強，經濟實用。應用該測試瓶能準確測定待測水樣中真菌的菌數，操作使用簡單、提高工作效率。文檔編號C12R1/645GK101824380SQ20091007917公開日2010年9月8日申請日期2009年3月4日優先權日2009年3月4日發明者易紹金申請人:長江大學