專利名稱::一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6及其編碼基因和應用的制作方法
技術領域:
:本發明涉及基因工程領域,具體地,本發明涉及一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6及其編碼基因和應用。
背景技術:
:干旱、鹽堿等非生物逆境是植物的生長和發育主要限制因素。據統計,世界干旱、半干旱地區占地球陸地面積的33%,鹽堿地占地球陸地面積的7.6%。在我國,干旱地區的耕地面積約為5.7億畝,鹽堿地約為5.54億畝,每年因干旱、鹽堿等逆境對小麥造成的糧食減產達700-800億公斤。小麥是我國重要的糧食作物之一,在國民經濟中占有非常重要的地位。然而,干旱、高鹽等逆境脅迫嚴重影響著小麥的產量和品質,制約著農業生產的快速發展。植物的耐旱、耐鹽性大多屬于多基因控制的數量性狀,利用常規育種方法改良作物的抗逆性受到周期長、優異種質資源缺乏的制約。隨著現代分子生物學的發展,利用基因工程技術,從分子水平上深入研究植物與非生物逆境之間的關系,揭示植物對逆境脅迫信號傳導及基因表達調控分子機理,為培育作物抗逆新種質提供了理論基礎。目前,通過基因工程技術已將許多抗旱,耐鹽和耐低溫相關的基因(如合成各類滲透保護劑的酶類基因、轉錄因子和信號傳導有關的蛋白激酶基因)導入到作物中,從而提高作物的抗逆性已有大量的報道。例如,將抗逆相關的功能基因導入作物,Lilius等將編碼膽堿脫氫酶的基因(BetA)導入煙草和馬鈴薯,獲得了抗鹽和耐低溫的轉基因植株(Liliusetal.,1996)。Nakamura等將甜菜堿醛脫氫酶基因(BADH)導入煙草,增加了煙草中的甜菜堿的含量,同時明顯提高了煙草對鹽和寒冷脅迫的耐受能力(Nakamuraetal.,1997)。在植物體內,抗氧化系統由許多酶組成,如SOD、過氧化氫酶、過氧化物酶和谷胱甘肽還原酶。SOD是植物體內清除活性氧的關鍵酶,植物中已有幾種SOD酶基因被克隆出來并在轉基因植株中得到了活驗證性。McKEesie等將煙草Mn-SOD導入苜蓿,轉基因苜蓿在干旱脅迫環境下的產量和存活率都有了顯著提高(McKEesieetal.,1999)。植物對干旱、高鹽等逆境脅迫的耐性是多基因控制的數量性狀,其生理、生化過程是基因相互作用、共同調節的,導入單個功能基因雖然在一定程度上提高了植物的抗逆性,但提高幅度不大,往往不能達到有效增強植物抗逆性的目的(Liuetal.,1998;劉強等,2000)。近年來,通過轉錄因子的結構與功能的分析來鑒定、闡明各種條件下基因表達調控的機理得到了廣泛關注(劉強等,2000)。Yamaguchi-Shinozaki等人的研究結果表明利用rd29A啟動子啟動AtDREBlA基因的表達,能夠有效提高農作物(小麥)對干旱、高鹽和低溫的抗性(Yamaguchi-Shinozakietal.,2002;Pellegrineschietal。2004)。GmDREB3基因的超量表達能提高轉基因擬南芥和煙草植株對干旱和低溫脅迫的耐性(Chenetal.,2007)。將棉花GhDREB基因轉化小麥品種揚麥10號,轉基因小麥的耐旱、耐鹽性得到明顯提高(Gaoetal.,2009)。堿性亮氨酸拉鏈(basicleucinezi卯er,bZIP)蛋白是真核生物轉錄因子中分布最廣泛、最保守的一類蛋白。研究表明bZIP蛋白不僅參與種子貯藏基因的表達、光形態的發生以及器官建成的控制(Finkelsteinetal.,2002),還參與植物對脫落酸、光和發育中各種信號的反應(Jakobyetal.,2002)。MarcJakoby等對擬南芥基因組全序列分析發現了大量的bZIP類轉錄因子。綜上所述,轉錄因子(DREB類、bZIP類等)在調節植物的逆境反應,提高植物的抗逆性中起著至關重要的作用。目前,利用抗逆相關的轉錄因子基因改良和提高擬南芥、煙草、水稻等植物的抗逆性,取得了很大成功。
發明內容本發明的目的是提供一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6。本發明的再一目的是提供編碼上述植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6的編碼基因。本發明的另一目的是提供包含上述基因的重組載體。本發明的另一目的是提供包含上述基因的轉基因細胞系。本發明的另一目的提供上述植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6的應用。本發明所提供的抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6,來源于長穗偃麥草(其直接來源為北京草業與環境研究發展中心,其原始來源中國新疆),其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本發明的轉錄因子由367個氨基酸殘基組成,是bZIP類轉錄因子。自SEQIDNO.1的氨基末端第295-355位氨基酸殘基是保守的bZIP結構,自SEQIDNO.1的氨基末端第290-293位氨基酸殘基為核定位序列。SEQIDNO.1:MDFPGGSGRPPPQQHQHQLLPPMTPLPLTRQGSSVYSLTFDEFQSALGGPGKDFGSMNMD60ELLRNIWTAEESQAIGAGANAASSSAAAGPDHGGIQRQGSLTLPRTLSQKTVDEVWRD匪120FFGGPASASTAAEAPPPAQRQQTLGEVTLEEFLVRAGVVREDMPGPPPPVSPAPVAQAPP180PPPQPQMLFPQSNMFAPMVNPLSLANGLITGAYGQGGGGGGGAPAMVSPSPTGRPVMSNG240YGKMEDRNLSSLSPPPMPYVFNGGLRGRKPPAMEKVVERRQRRMIKNRESAARSRQRKQS300Y匪ELETEVAKLKERNEELQRKQAEMLERQKNEVFEKVTRQAGLTSKRICLRRTLTGPW359為了使蛋白EeABF6便于純化,可在由SEQIDNO.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。表1標簽的序列<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>根據本發明所公開的SEQIDNO.1序列,本發明的轉錄因子EeABF6可人工合成,也可先合成其編碼基因,再進行生物表達得到。根據本發明的EeABF6編碼基因具有如SEQIDNO.2或3所示核苷酸序列。EeABF6的表達受干旱、鹽、脫落酸和低溫脅迫的誘導。SEQIDNO.31ATGGACTTTCCGGGAGGGAGCGGGAGGCCGCCGCCGCAGCAGCACCAGCACCAGCTGCTG61CCGCCGATGACGCCGCTGCCGCTCACAAGGCAGGGGTCATCGGTCTACTCGCTCACGTTC121GACGAGTTCCAGAGCGCGCTCGGCGGGCCGGGCAAGGACTTCGGATCCATGAACATGGAC181GAGCTCCTCCGCAACATCTGGACGGCCGAGGAGTCGCAGGCCATCGGCGCCGGCGCCAAC241GCCGCCTCTTCCTCCGCCGCCGCGGGGCCAGATCACGGCGGCATCCAGCGCCAGGGCTCG301CTCACGCTGCCCAGGACGCTCAGCCAGAAGACCGTCGACGAGGTCTGGCGCGACATGATG361TTCTTCGGTGGGCCCGCCTCCGCCTCCACGGCCGCCGAGGCTCCCCCGCCGGCCCAGAGG421CAGCAGACGCTCGGGGAGGTCACGCTCGAGGAGTTCCTCGTGCGCGCCGGCGTTGTGCGC481GAGGACATGCCGGGGCCGCCGCCCCCCGTGTCGCCGGCGCCCGTGGCCCAGGCGCCGCCT541CCGCCTCCGCAGCCGCAGATGCTGTTTCCTCAGAGCAACATGTTTGCTCCTATGGTGAAT601CCTCTGTCCTTGGCCAATGGGTTGATCACCGGAGCATACGGCCAGGGAGGAGGAGGTGGT661GGTGGTGCGCCCGCTATGGTTTCGCCGTCGCCGACGGGGAGGCCGGTCATGTCCAACGGC721TACGGCAAGATGGAAGACCGCAACTTGTCCTCGCTGTCGCCGCCGCCGATGCCGTATGTT781TTCAACGGCGGGCTGAGGGGGAGGAAGCCACCGGCCATGGAGAAGGTGGTCGAGAGGAGG841CAGCGGCGGATGATCAAGAACCGGGAGTCTGCGGCGAGGTCGCGCCAGAGGAAACAGAGT901TATATGATGGAATTGGAGACTGAGGTGGCAAAGCTTAAAGAGCGGAATGAGGAGTTGCAG961AGAAAACAGGCGGAGATGCTAGAGAGGCAAAAGAATGAGGTATTCGAGAAGGTCACCCGG1021CAAGCTGGACTCACGTCGAAGAGGATCTGCCTGCGGAGGACGCTGACGGGCCCTTGG含有EeABF6基因的表達盒、重組表達載體、轉基因細胞系及重組菌均屬于本發明的保護范圍。可用現有的植物表達載體構建含有EeABF6基因的重組表達載體。所述植物表達載體包括雙元農桿菌載體和可用于植物微彈轟擊的載體等。所述植物表達載體還可包含外源基因的3'端非翻譯區域,即包含聚腺苷酸信號和任何其它參與mRNA加工或基因表達的DNA片段。所述聚腺苷酸信號可引導聚腺苷酸加入到mRNA前體的3'端,如農桿菌冠癭瘤誘導(Ti)質粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因3'端轉錄的非翻譯區均具有類似功能。使用EeABF6構建重組植物表達載體時,在其轉錄起始核苷酸前可加上任何一種增強型啟動子或組成型啟動子,如花椰菜花葉病毒(CaMV)35S啟動子、玉米的泛素啟動子(Ubiquitin),它們可單獨使用或與其它植物啟動子結合使用;此外,使用本發明的基因構建植物表達載體時,還可使用增強子,包括翻譯增強子或轉錄增強子,這些增強子區域可以是ATG起始密碼子或鄰接區域起始密碼子等,但必需與編碼序列的閱讀框相同,以保證整個序列的正確翻譯。所述翻譯控制信號和起始密碼子的來源是廣泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻譯起始區域可以來自轉錄起始區域或結構基因。為了便于對轉基因植物細胞或植物進行鑒定及篩選,可對所用植物表達載體進行加工,如加入可在植物中表達的編碼可產生顏色變化的酶或發光化合物的基因(GUS基因、螢光素酶基因等)、具有抗性的抗生素標記物(慶大霉素標記物、卡那霉素標記物等)或是抗化學試劑標記基因(如抗除莠劑基因)等。從轉基因植物的安全性考慮,可不加任何選擇性標記基因,直接以逆境篩選轉化植株。本發明的另一個目的是提供一種培育耐逆植物的方法。本發明所提供的培育耐逆植物的方法,是將上述任一種含有EeABF6基因的重組表達載體導入植物細胞中,得到耐逆植物。利用任何一種可以引導外源基因在植物中表達的載體,將本發明所提供的bZIP轉錄因子EeABF6的編碼基因導入植物細胞,可獲得對干旱和鹽等非生物逆境脅迫耐受力增強的轉基因細胞系及轉基因植株。攜帶有編碼基因的表達載體可通過使用Ti質粒、Ri質粒、植物病毒載體、直接DNA轉化、顯微注射、電導、農桿菌介導等常規生物學方法轉化植物細胞或組織,并將轉化的植物組織培育成植株。被轉化的植物宿主既可以是單子葉植物,也可以是雙子葉植物,如煙草、小麥、長穗偃麥草、擬南芥、水稻、玉米、黃瓜、番茄、楊樹、草坪草、苜宿等。所述植物耐逆性具體可為對非生物脅迫的耐逆性,如對或鹽脅迫的耐逆性。本發明以抗旱、耐鹽性較強的長穗偃麥草(Elytrigiaelongat咖L.)為實驗材茅斗,得至lj了抗逆相關的bZIP轉錄因子EeABF6(ElytrigiaelongatumABAResponsiveElementBindingFactor6)蛋白及其編碼基因,并將EeABF6基因導入煙草,顯著提高了植物的抗旱、耐鹽性。本發明的抗旱、耐鹽相關蛋白及其編碼基因對改良、增強煙草抗逆性,提高產量、加速抗逆分子育種進程,以及有效節省水資源具有十分重要的理論和實際意義。下面結合附圖及具體實施例對本發明做進一步說明。圖1為抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6編碼基因的cDNA克隆,以長穗偃麥草cDNA為模板,PCR擴增含有bZIP保守域的cDNA片段,1,2:長穗偃麥草片段;M:DL2000marker(100,250,500,750,1000,2000bp)。圖2為熒光定量PCR分析EeABF6在干旱、鹽脅迫處理下的表達特征,A.煙草經農桿菌侵染后的篩選、分化培養;B.經篩選、分化后獲得的再生植株生根培養;C.轉基因煙草6植株的PCR檢領lJ,其中,1,2,3,4:pBI35S-EeABF6轉基因煙草;5,6,7,8:pBI29A-EeABF6轉基因煙草。圖3為轉基因煙草耐旱性鑒定,A.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38在含有2%PEG培養基上的生長情況;B.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況;C.pBI29A-EeABF6轉基因煙草在和W38在含有2%PEG培養基上的生長情況;D.pBI29A-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況。圖4為轉基因煙草耐鹽性鑒定,A.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38在含有200mMNaCl培養基上的生長情況;B.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況;C.pBI29A-EeABF6轉基因煙草在和W38在含有200mMNaCl培養基上的生長情況;D.pBI29A-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況。具體實施例方式以下實施例中未作具體說明的分子生物學實驗方法,均參照《分子克隆實驗指南》(第三版)J.薩姆布魯克一書中所列的具體方法進行,或者按照試劑盒和產品說明書進行。以下的實施例便于更好地理解本發明,但并不限定本發明。實施例1:長穗偃麥草抗旱、耐鹽相關EeABF6基因的cDNA克隆。對生長45天左右的長穗偃麥草幼苗進行干旱處理5小時,用Trizol提取長穗偃麥草總RNA。應用5'RACE試劑盒(5'RACESystemforR即idAmplificationofcDNAEndsKit)(GIBCO服L,CAT.NO.18374-058)和3,RACEi式劑盒(3,RACESystemforRapidAmplificationofcDNAEndsKit)(GIBCO服L,CAT.NO.18373-019)獲得EeABF6基因。用Trizol提取長穗偃麥草幼苗的總RNA,用superscriptII(invitrogen)反轉錄酶反轉錄獲得到cDNA。根據EeABF6基因編碼區序列設計引物Pl和P2。以反轉錄得到的cDNA為模板,用引物PI和P2進行PCR擴增。引物PI和P2的序列如下P1:5'-GCGGGATGGACTTTCCGG-3,,P2:5'-CCAAGGGCCCGTCAGCGT-3,。對PCR產物進行O.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測,得到分子量約為1.0-1.2kb左右的條帶,與預期結果相符。用瓊脂糖凝膠回收試劑盒(TIANGEN)回收該片段。將該回收片段與pGEM-TEasy(Promega)連接,參照Cohen等的方法(ProcNatlAcadSci,69:2110),將連接產物轉化大腸桿菌DH5a感受態細胞,根據pGEM-TEasy載體上的氨卞青霉素抗性標記篩選陽性克隆,得到含有回收片段的重組質粒。以該重組質粒載體上的T7和SP6啟動子序列為引物對其進行核苷酸序列測定,測序結果表明擴增到的EeABF6基因的開放閱讀框(ORF)為SEQIDNo.2的自5'末端第50至1126位脫氧核糖核苷酸,編碼氨基酸序列是SEQIDNo.1的蛋白質。將含序列SEQIDNo.3所示EeABF6基因的重組載體命名為pTE-EeABF6,其cDNA克隆結果如圖l所示。EeABF6基因的序列在Genabnk上進行比對,該基因與擬南芥中bZIP類轉錄因子具有較高同源性,而在長穗偃麥草中未發現同源蛋白基因,證明EeABF6基因是一個新的基因。實施例2:用EeABF6基因培育抗旱、耐鹽轉基因植物1、重組表達載體的構建1)35S-EeABF6重組表達載體的構建以長穗偃麥草的總RNA反轉錄得到的cDNA為模板,用含有Smal和Xbal接頭序列的特異引物進行PCR擴增;然后Smal和Xbal雙酶切PCR產物,回收,將酶切產物正向插入載體PBI121的CaMV35S啟動子之后的Smal和Xbal酶切位點之間,得到重組載體35S-EeABF6。引物序列如下EeABF6[Smal]5,-GCGCCCGGGGCGGGATGGACTTTCCGG-3,EeABF6[Xbal]5,-TGCTCTAGACCAAGGGCCCGTCAGCGT—3,2)29A-EeABF6重組表達載體的構建以長穗偃麥草的總RNA反轉錄得到的cDNA為模板,用含有Smal和Spel接頭序列的特異引物進行PCR擴增;然后Smal和Spel雙酶切PCR產物,回收,將酶切產物正向插入載體pBI121的rd29A啟動子之后的Smal和Spel酶切位點之間,得到重組載體29A_EeABF6。引物序列如下EeABF6[Smal]5'-GCGCCCGGGGCGGGATGGACTTTCCGG-3'EeABF6[Spel]5'-CGGACTAGTCCAAGGGCCCGTCAGCGT-3'2、轉基因煙草的獲得和鑒定1)轉基因煙草的獲得將上述構建的重組表達載體29A-EeABF6、35S-EeABF6分別用凍融法轉化根癌農桿菌EHA105,再用葉盤法分別將整合有29A-EeABF6和35S_EeABF6的根癌農桿菌EHA105轉化煙草W38,用含100mg/L卡那霉素的MS培養基進行2輪篩選,每輪篩選10-15天,得到陽性轉基因植株。將篩選得到的陽性轉基因植株用PCR做進一步鑒定篩選,PCR所用的一對引物為P3和P4。P3(上游引物)5,-GCGGGATGGACTTTCCGG-3',P4(下游引物)5'-CCAAGGGCCCGTCAGCGT-3'。對29A-EeABF6、35S-EeABF6轉基因煙草進行PCR鑒定,陽性轉基因植株經PCR擴增可獲得1Kb左右條帶,結果獲得轉29A-EeABF6煙草、35S-EeABF6煙草各30株。同時將pBI121空載體導入煙草W38,方法同上,作為對照,獲得15個株系的轉空載體煙草(篩選獲得的轉基因煙草用T。代表示)。2)轉EeABF6基因植株耐旱、耐鹽性鑒定將T。代轉29A-EeABF6、35S-EeABF6基因煙草植株及T。代轉空載體對照植株的3周齡苗的根系分別移入含有200mMNaCl、2%PEG的培養基中進行鹽、干旱脅迫處理30天,觀察表型并拍照。轉基因煙草的熒光定量PCR分析如圖2所示。結果表明鹽脅迫處理30天后,29A-EeABF6轉基因植株在干旱、鹽脅迫條件下生長正常,根系發達,葉片顏色深綠;35S-EeABF6轉基因植株在干旱、鹽脅迫條件下也能夠正常生長,根系發達,葉片顏色深綠;所有空載體轉基因植株葉片均萎蔫或失綠、發白而導致死亡。轉基因煙草耐旱、耐鹽性鑒定結果證明EeABF6基因可以提高植物的耐旱及耐鹽性。圖3A顯示的是29A-EeABF6、35S-EeABF6轉基因植株、空載體轉基因植株干旱脅迫處理30天的照片;圖3B顯示的是29A-EeABF6、35S-EeABF6轉基因植株、空載體轉基因植株8鹽脅迫處理30天的照片。圖4為轉基因煙草耐鹽性鑒定,A.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38在含有200mMNaCl培養基上的生長情況;B.pBI35S-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況;C.pBI29A-EeABF6轉基因煙草在和W38在含有200mMNaCl培養基上的生長情況;D.pBI29A-EeABF6轉基因煙草和W38根的生長情況。0101]序列表0102]〈110〉北京市農林科學院0103]〈120〉一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6及其編碼基因和應用0104]〈160>20105]〈210>10106]〈211>3590107]〈212>PRT0108]〈213〉長穗偃麥草(ElytrigiaelongatumL.)0109]〈400>10110]MDFPGGSGRPPPQQHQHQLLPPMTPLPLTRQGSSVYSLTFDEFQSALGGP0111]GKDFGSMNMD600112]ELLRNIWTAEESQAIGAGANAASSSAAAGPDHGGIQRQGSLTLPRTLSQK0113]TVDEVWRD匪1200114]FFGGPASASTAAEAPPPAQRQQTLGEVTLEEFLVRAGVVREDMPGPPPPV0115]SPAPVAQAPP1800116]VPPPQPQMLFPQSNMFAPMVNPLSLANGLITGAYGQGGGGGGGAPAMVSPS0117]PTGRPVMSNG2400118]YGKMEDRNLSSLSPPPMPYVFNGGLRGRKPPAMEKVVERRQRRMIKNRES0119]AARSRQRKQS3000120]Y匪ELETEVAKLKERNEELQRKQAEMLERQKNEVFEKVTRQAGLTSKRIC0121]LRRTLTGPW3590122]〈210>20123]〈211>10770124]〈212>DNA0125]〈213〉長穗偃麥草(ElytrigiaelongatumL.)0126]〈400>20127]atggactttccgggagggagcgggaggccgccgccgcagcagcaccagcaccagctgctg600128]ccgccgatgacgccgctgccgctcacaaggcaggggtcatcggtctectcgctcacgttc1200129]gacgagttccagagcgcgctcggcgggccgggcaaggacttcggatccatgaacatggac1800130]gagctcctccgcaacatctggacggccgaggagtcgcaggccatcggcgccggcgccaac2400131]gccgcctcttcctccgccgccgcggggccagatcacggcggcatccagcgccagggctcg3000132]ctcacgctgcccaggacgctcagccagaagaccgtcgacgaggtctggcgcgacatgatg3600133]ttcttcggtgggcccgcctccgcctccacggccgccgaggctcccccgccggcccagagg4200134]cagcagacgctcggggaggtcacgctcgaggagttcctcgtgcgcgccggcgttgtgcgc■9gaggacatgccggggccgccgccccccgtgtcgccggcgcccgtggcccaggcgccgcct540ccgcctccgc3gCCgC3g3tgctgtttcctC3g3gC皿C3tgtttgctcctetggtg朋t600cctctgtccttggcc朋tgggttgatcaccggagcatecggcc郷g郷郷郷tggt660ggtggtgcgcccgctetggtttcgccgtcgCCg3Cgggg3ggccggtcatgtccaacggc720tecggc朋gatggaagaccgcaacttgtcctcgctgtcgccgccgccgatgccgtetgtt780ttcaacggcgggctg郷gggagg^gccaccggccatgg卿郷tggtcg卿gg郷840cagcggcggatgatc朋g朋ccgggagtctgcggcg郷tCgCgCC3g3g■tetetgatgg朋ttggagactg郷tggra3gCgg皿tg3ggagttgrag960cgg卿tgct3g3g3ggC皿皿g皿tgaggtettcgag皿ggtcacccgg1020c朋gctggactcacgtcgaag郷atctgcCtgCgg郷3cgctgacgggcccttgg107權利要求一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.—種植物抗旱、耐鹽相關基因,其特征在于,編碼權利要求1所述的植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6。3.如權利要求2所述的植物抗旱、耐鹽相關基因,其特征在于,其堿基序列如SEQIDNO.2或3所示。4.包含權利要求2或3所述植物抗旱、耐鹽相關基因的重組載體5.包含權利要求2或3所述植物抗旱、耐鹽相關基因的轉基因細胞系。6.權利要求1所述植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6的應用。7.權利要求2或3所述植物抗旱、耐鹽相關基因的應用。全文摘要本發明涉及基因工程領域,具體地,本發明涉及一種植物抗旱、耐鹽相關蛋白EeABF6及其編碼基因和應用。所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,基因序列如SEQIDNO.2所示。本發明的抗旱、耐鹽相關蛋白及其編碼基因對改良、增強煙草抗逆性,提高產量、加速抗逆分子育種進程,以及有效節省水資源具有十分重要的理論和實際意義。文檔編號C12N15/63GK101704884SQ200910238039公開日2010年5月12日申請日期2009年11月13日優先權日2009年11月13日發明者唐益苗,楊穎,王永波,趙昌平,高世慶申請人:北京市農林科學院