專利名稱：用于多飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的方法和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于原核和真核細(xì)胞的培養(yǎng)方法和在該方法中使用的裝置，以便在安排和實(shí)施培養(yǎng)中實(shí)現(xiàn)高度靈活性。
背景技術(shù)：
治療蛋白質(zhì)占據(jù)了如今醫(yī)藥總量的大部分。傳統(tǒng)生產(chǎn)方法不能滿足對這些治療蛋白質(zhì)的需要。為了提供所需的大量的治療蛋白質(zhì)，使用了高度復(fù)雜的重組細(xì)胞生產(chǎn)方法。治療蛋白質(zhì)的重組細(xì)胞生產(chǎn)一般在培養(yǎng)容器內(nèi)實(shí)施。當(dāng)向上看時(shí)，該培養(yǎng)容器是一個復(fù)雜的整體，例如必須對其進(jìn)行消毒、回火、攪動和充氣。在培養(yǎng)過程中為了保證所述容器的合適的性能需要許多不同的管子、熱交換裝置、蠕動泵、閥等裝置。整個培養(yǎng)過程，包括后培養(yǎng)清潔過程，根據(jù)僅允許與預(yù)定條件有限偏離的準(zhǔn)則執(zhí)行。為了確保過程的一致性，必須對生產(chǎn)過程中的許多裝置進(jìn)行控制并且必須確定和記錄許多參數(shù)。對于原核和真核細(xì)胞的培養(yǎng)，可以使用不同的培養(yǎng)方法，例如沒有飼養(yǎng)的培養(yǎng)、流飼批量(fed-batch)培養(yǎng)或連續(xù)培養(yǎng)。在流飼批量培養(yǎng)中，例如PH值的改變觸發(fā)酸或堿溶液的添加以便調(diào)節(jié)PH值。一般地，流飼批量培養(yǎng)方法需要定義好的反饋控制以便于控制所需成分的供應(yīng)。這是通過飼養(yǎng)溶液的使用實(shí)現(xiàn)的，以便在預(yù)定的設(shè)定點(diǎn)或在預(yù)定范圍內(nèi)保持工藝參數(shù)。流飼批量培養(yǎng)方法是在最好用于大規(guī)模培養(yǎng)的時(shí)刻。除了將主要的，即由培養(yǎng)細(xì)胞消耗的復(fù)合物添加到培養(yǎng)介質(zhì)中之外，其它工藝參數(shù)，比如PH值，要保持在預(yù)定范圍內(nèi)。 某些工藝參數(shù)與預(yù)定范圍的一致性是重要的。非最佳的工藝參數(shù)不僅影響培養(yǎng)細(xì)胞的生產(chǎn)率，而且影響所生產(chǎn)的治療蛋白質(zhì)的品質(zhì)和同質(zhì)性。因此，必須執(zhí)行相關(guān)工藝參數(shù)的控制以及參數(shù)的重新調(diào)整。由此所要求的技術(shù)復(fù)雜性，對于培養(yǎng)過程中所需的基本維護(hù)和修復(fù)工作來說，已經(jīng)達(dá)到了幾乎不可接受的水平。如果培養(yǎng)需要利用多種溶液的特定飼養(yǎng)策略，例如不同的營養(yǎng)飼養(yǎng)溶液、用于pH 控制的堿和酸、抗泡沫劑等，那么在培養(yǎng)過程中在不影響維護(hù)工作的前提下不能實(shí)現(xiàn)這些溶液所需的存放單元的空間布置。在EP1266960中，描述了一種培養(yǎng)細(xì)胞或組織的方法和裝置。在US4937194中描述了一種計(jì)量添加到細(xì)胞培養(yǎng)容器中的營養(yǎng)介質(zhì)的方法。在EP1092764中描述了連續(xù)發(fā)酵。 在GB22^823中描述了一種稱重裝置。在日本專利申請公報(bào)JP2000-262372中，描述了一種用于連接框架的工具。在GB25^58中描述了一種用于比較運(yùn)動和體育器械在手上的杠桿作用的裝置。在日本專利申請公報(bào)JP2005-287425中描述了一種具有培養(yǎng)介質(zhì)包的培養(yǎng)包
發(fā)明內(nèi)容
這里所描述的一個方面是一種例如用于將細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝在托架單元下方的支撐單元，其特征在于，所述支撐單元包括在一端的用于將支撐單元安裝到托架單元的孔眼(1)和在另一端的用于拉住/保持細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的鉤(5)，孔眼(1)和鉤(5)由桿連接，所述桿在與所述孔眼連接的區(qū)段( 上沒有偏移量，在與所述鉤連接的區(qū)段C3)上具有偏移量G)，其中相對于與所述孔眼連接的所述區(qū)段( 上的桿，在與所述鉤連接的所述區(qū)段C3)上的偏移量是從5A. U.到50A.U。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這里所描述的支撐單元減小了在要求提供不同飼養(yǎng)溶液的培養(yǎng)過程中使用的存放裝置的空間需求。在利用這里所描述的裝置的情況下，液體存放單元可以安裝在培養(yǎng)容器上方，從而方便了直接接近培養(yǎng)容器。同時(shí)，這里所描述的支撐單元能夠在單個支撐單元上實(shí)現(xiàn)多達(dá)五個不同液體存放單元的安裝。同時(shí)，還可以將包式和瓶式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝到相同的支撐單元。還發(fā)現(xiàn)，通過提供附加的裝置(9)，可以使存放單元的使用甚至更靈活。通過利用另外的裝置(9)改進(jìn)所述支撐單元，一方面可以支撐已經(jīng)安裝到裝置(701)的大的包式液體存放單元，或者如果小的包式存放單元安裝到裝置(701)， 則可以安裝兩個另外的包式液體存放單元。通過裝置(9)對大的包式液體存放單元的支撐防止了將包式液體存放單元安裝到支撐單元所使用的手柄的損壞。更精確地，這里描述了一種用于將細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元放置在托架單元下方的支撐單元，其特征在于，該支撐單元包括-在所述支撐單元的上端(100)處的用于將支撐單元安裝到托架單元的第一裝置 ⑴，-在所述支撐單元的下端(200)處的用于將細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝到支撐單元的第二裝置( ，以及-用于將所述第一裝置(1)連接到所述第二裝置(5)的包括第一直區(qū)段O)的堅(jiān)實(shí)連接部(103)，其中一旦細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元已經(jīng)被安裝后，則第一裝置(1)、第一直區(qū)段O) 和支撐單元的平衡點(diǎn)共線。在一個實(shí)施方式中，該單元還包括第一直區(qū)段O)、第二直區(qū)段C3)和中間的偏置區(qū)段⑷，其中-第一直區(qū)段⑵的軸線(101)與第二直區(qū)段的軸線(201)平行，-第一直區(qū)段⑵的軸線(101)與第二直區(qū)段(3)的軸線(201)之間的偏置區(qū)段 (4)的偏移量為5-50A. U.，-所述偏置區(qū)段(4)相對于第一直區(qū)段的軸線(101)和第二直區(qū)段的軸線O01) 具有相同的角度(102)。在另一個實(shí)施方式中，所述第一裝置是從孔眼和夾持件中選擇的。在一個實(shí)施方式中，所述第二裝置是從鉤、板和凸緣中選擇的。在又一個實(shí)施方式中，所述第二裝置具有從圓形、正方形、矩形、橢圓形、梯形、平行四邊形和菱形中選擇的形狀。在一個實(shí)施方式中，該單元的特征還在于-第一直區(qū)段⑵的軸線(101)與第二直區(qū)段(3)的軸線(201)之間的偏移量是 10A. U.，
-第一裝置是卵形孔眼，用于拉住托架單元的鉤并且具有大約2 1的長度與直徑比，-直區(qū)段⑵和(3)具有相同或不同的長度，-偏置區(qū)段(4)的角度(102)是從90度到160度，-第二裝置(5)相對于第二直區(qū)段(3)的軸線O01)具有90度的角度(202)。在一個實(shí)施方式中，該支撐單元的特征還在于-第一裝置是卵形孔眼，用于拉住托架單元的鉤并且具有大約2 1的長度與直徑比，其中長度是10-16A. U.，直徑是5-8A. U.，和/或-直區(qū)段⑵和(3)具有相同的長度，從72A.U.到138A. U.，和/或-偏置區(qū)段(4)具有從8A.U.到12A. U.的長度，和/或-第二裝置(5)到偏置區(qū)段⑷的第二彎曲部具有50-60A.U.的距離。另一個方面是一種用于將一至三個細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝在托架單元下方的支撐單元，特征在于該支撐單元包括-具有上凸緣(14)、下凸緣(13)和高度(302)的中央元件(6)，-第一裝置(7)和第二裝置(701)，均用于安裝包式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元，-第三裝置(8)，用于安裝瓶式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元，-靠近所述中央元件(6)的上凸緣(14)的鏤空部(block-out)(301)，用于將支撐單元安裝到托架單元，其中-所述中央元件(6)具有等腰梯形的外形，其中上凸緣(14)處的寬度小于下凸緣 (13)處的寬度的一半，-第一裝置(7)和第三裝置(8)連接在中央元件(6)的相同側(cè)上，第一裝置(7)和第二裝置(701)連接在中央元件(6)的相對側(cè)上，-第一裝置(7)和第二裝置(701)均連接在距上凸緣(14)至多中央元件(6)的高度(302)的三分之一的距離內(nèi)，第三裝置(8)連接在距下凸緣(1 至多中央元件(6)的高度(302)的三分之一的距離內(nèi)。在一個實(shí)施方式中，該單元的特征還在于-中央元件(6)包括等腰梯形狀的鏤空部(303)，和/或-第一裝置(7)和第二裝置(701)具有相同的形狀和尺寸，并且彼此相對地連接在中央元件(6)的兩側(cè)上，和/或-第一裝置(7)和第二裝置(701)均具有L形形狀，其中，連接到中央單元(6)的面(307)垂直于中央單元(6)的面，另一面(306)平行于中央單元(6)的面，和/或-第三裝置⑶包括i)具有部分圓(segment of a circle)形狀的基板(10)，其具有大于相應(yīng)圓的半徑(5O2)的寬度(5Ol)，ii)以相對于所述基板(10)90度的角度(305)朝中央元件(6)的上凸緣(14)延伸的兩個向上的齒(11)，iii)支撐板(12)，其連接到i)基板(10)的底部和ii)中央元件(6)的下凸緣 (13)，
其中所述基板(10)以75-85度的角度(304)連接到中央元件(6)，和/或-所述中央元件(6)還包括第四裝置(9)，所述第四裝置(9)i)連接到中央元件(6)的下凸緣(13)，ii)朝第一裝置(7)以及第三裝置(8)的相對側(cè)定向，iii)以130-150度的角度(601)連接到下凸緣(13)，并分別以150-165度的角度 (602)、120-140度的角度(603)和120-140度的角度(604)朝著上凸緣(14)的方向向上彎曲三次。在另一個實(shí)施方式中，該單元的特征還在于-中央元件(6)具有-290-320A.U.的下凸緣(13)長度，-90-110A.U.的上凸緣(14)長度，-530-570A. U.的外側(cè)凸緣(15)長度，和/或-第一裝置(7)和第二裝置(701)在距中央元件(6)的上凸緣(14)150-170A. U.的距離處被連接，并且具有25-35A.U.的基板長度(307)和10-14A. U.的向上高度(306)，和 /或-連接在中央元件(6)的下部三分之一處的第三裝置(8)具有120-140A.U.的基板(10)高度、90-100A.U.的半徑、50-60A.U.的齒(11)高度、40-50A. U.的齒寬度，支撐板 (12)具有70-100A. U.的長度和關(guān)于基板(10) 140-160度的角度，和/或-第四裝置(9)具有從下凸緣(13)到第一向上彎曲部00)180-200A. U.的第一距離(16)、從第一向上彎曲部(20)到第二向上彎曲部(21) 130-150A. U.的第二距離(17)、從第二向上彎曲部到第三向上彎曲部(22)60-75A.U.的第三距離(18)和從第三向上彎曲部(22)到第四裝置的端部(23) 110-130A. U.的第四距離(19)。這里所描述的另一個方面是一種設(shè)備，其包括用于將一至三個細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝在托架單元下方的支撐單元，所述支撐單元包括第四裝置(9)和大的包式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元。在一個實(shí)施方式中，托架單元是從底部具有鉤的電子天平、機(jī)械天平、具有大于支撐單元的總體長度的固定高度的可移動臺架、或者鉤中選擇的。在一個實(shí)施方式中，所述第四裝置(9)具有U狀形狀。在另一個實(shí)施方式中，中央元件是平面的并且具有板狀形狀。這里所描述的又一個方面是一種設(shè)備，該設(shè)備包括這里所描述的支撐單元，以及從底部具有鉤的電子天平、機(jī)械天平、具有大于支撐單元的總體長度的固定高度的可移動臺架、或者鉤中選擇的托架單元。這里還描述了所述支撐單元在用于拉住/保持細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元以及將支撐單元安裝到托架單元從而所述支撐單元自由懸掛在托架單元下方的應(yīng)用。在一個實(shí)施方式中，1A. U.是Imm或Icm或1英寸。這里所描述的另一個方面是一種細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，包括a)細(xì)胞培養(yǎng)容器，b)氣源，c)至少用于酸溶液、堿溶液、抗泡沫溶液和營養(yǎng)溶液的細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元，
d)至少用于確定細(xì)胞培養(yǎng)容器中的氧濃度、二氧化碳濃度、PH值和溫度的傳感器，e)用于記錄傳感器數(shù)據(jù)和控制向細(xì)胞培養(yǎng)容器添加C)中的溶液的控制單元，f)在e)的所述控制單元的控制下用于向細(xì)胞培養(yǎng)容器添加C)中的溶液的至少一個泵，其中-多達(dá)五個存放單元連接到一個天平，-在這里所描述的支撐單元中，連接到所述天平的至少其中一個存放單元放置在天平的下方，以及-向細(xì)胞培養(yǎng)容器添加每種溶液的結(jié)束是由相應(yīng)液體存放單元從添加開始的重量損失來觸發(fā)的。在一個實(shí)施方式中，所述天平設(shè)置在操作細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的房間的地板上方1. 5米到4.0米處。在又一個實(shí)施方式中，液體存放單元經(jīng)由柔性塑料管與泵連接，所述泵經(jīng)由柔性塑料管與細(xì)胞培養(yǎng)室連接。這里所描述的又一個方面是一種使用這里所描述的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的方法。這里進(jìn)一步描述的是一種生產(chǎn)多肽的方法，包括如下步驟a)提供包含編碼多肽的核酸的細(xì)胞，b)在這里所描述的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備中培養(yǎng)細(xì)胞，c)從培養(yǎng)介質(zhì)或細(xì)胞中重新獲得多肽，d)選擇性地對所述多肽進(jìn)行純化，從而生產(chǎn)出多肽。本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明涉及用于將細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝到例如天平上的支撐單元，使用這種支撐單元的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，以及這種支撐單元在細(xì)胞培養(yǎng)的方法中的應(yīng)用。在流飼批量培養(yǎng)方法中，一般使用利用多種溶液的特定飼養(yǎng)策略，例如不同的營養(yǎng)飼養(yǎng)溶液、用于PH控制的堿和酸、抗泡沫劑等。在培養(yǎng)期間在不與培養(yǎng)設(shè)備比如培養(yǎng)容器的可接近性干涉的前提下，不能實(shí)現(xiàn)所需的液體存放單元的空間布置。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這里所描述的所述支撐單元減小了在要求提供不同飼養(yǎng)溶液的培養(yǎng)過程中的存放裝置的空間需求。通過利用這里所描述的支撐單元，不同的液體存放單元可以組合并安裝在培養(yǎng)容器上方，例如安裝到房間的天花板上，從而方便了直接接近培養(yǎng)容器。同時(shí)，這里所描述的支撐單元能夠?qū)崿F(xiàn)將多達(dá)五個不同的液體存放單元安裝到單個支撐單元上。同時(shí)，還可以將包式和瓶式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝到相同的支撐單元上。術(shù)語“包式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元”表示用于無菌流體收容的一次性柔性容器。 所述存放單元包括用于將其安裝到支撐單元或用于運(yùn)輸?shù)氖直０酱娣艈卧话闶怯啥鄬泳酆衔锉∧ぶ瞥傻?。最外部的結(jié)構(gòu)性或非使用(abuse)層可以是聚乙烯、(定向)聚酯、 或(定向)聚丙烯，但是還可以包括(定向)尼綸。該層優(yōu)選地是(反面)可印刷的并且有利地不受用于制造該包和隔室的密封溫度影響，因?yàn)樵摪拿芊庳灤┒鄬咏Y(jié)構(gòu)的整個厚度。該層的厚度可以選擇成控制包的剛度，可以是從大約 ο μ m到大約60 μ m的范圍，優(yōu)選為大約50μπι。內(nèi)層可以包括一個或多個阻擋層，這取決于哪些大氣條件(氧、濕度、光線等)可能影響包內(nèi)的產(chǎn)品。阻擋層可以是金屬化(定向)聚丙烯(PP)、鋁箔、(定向)聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)、乙烯-乙烯醇共聚物(EVOH)、尼綸或(二軸定向)尼綸、它們的混合或復(fù)合物以及它們的相關(guān)共聚物。阻擋層厚度取決于產(chǎn)品的敏感性和期望的保質(zhì)期。 包的最內(nèi)層是密封層。所述密封層選擇成對內(nèi)容物具有最小的影響、不受產(chǎn)品影響并能承受密封條件(比如液滴、油脂、灰塵等)。用在包或袋中的所述密封層可以包括乙烯共聚物， 比如低密度聚乙烯(LDPE)、線性低密度聚乙烯(LLDPE)、茂金屬聚乙烯、或具有醋酸乙烯酯或丙烯酸甲酯的乙烯共聚物、或乙烯和丙烯酸(EAA)或甲基丙烯酸(EMAA)的共聚物，任選地形成離聚物(即利用諸如Na、Zn、Mg或Li之類的金屬離子而部分中和)。密封層還可以包括聚丙烯共聚物。密封層可以是25-100 μ m厚。術(shù)語“大”表示大于5公升的容積，在一個實(shí)施方式中大于10公升，在又一個實(shí)施方式中大于20公升，在又一個實(shí)施方式中大于10 公升并小于100公升。術(shù)語“瓶式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元”表示由玻璃或塑料或金屬制成的容器，用于存放原核和真核細(xì)胞培養(yǎng)期間使用的溶液。瓶式存放單元一般是圓柱形的，沒有手柄，并且具有頸部，該頸部具有比瓶體更小的直徑。還發(fā)現(xiàn)，通過設(shè)置附加裝置(9)可以使存放單元的應(yīng)用甚至更靈活，進(jìn)而可以增加支撐單元的可靠性，尤其是當(dāng)安裝大的包式存放單元時(shí)。通過將另外的裝置(9)添加到包括中央元件(6)的支撐單元中，一方面可以支撐已經(jīng)安裝到裝置(701)上的大的包式液體存放單元，或者另一方面如果將小的包式存放單元安裝到裝置(701)上則可以安裝兩個另外的包式液體存放單元。由裝置(9)對大的包式液體存放單元的支撐例如防止了將包式液體存放單元安裝到支撐單元上使用的手柄的破壞。如果使用這里所描述的支撐單元，則按重量計(jì)向培養(yǎng)介質(zhì)中添加溶液可以實(shí)現(xiàn)可用的有限空間的更有效利用。在重量受控添加的情況下，通過利用單個天平和使用不連續(xù)定量給料方法可以控制和監(jiān)視多達(dá)五種不同溶液的添加。將具有安裝好的包含液體存放單元的支撐單元的天平附裝到執(zhí)行細(xì)胞培養(yǎng)的房間的天花板上是有利的。在附裝到天花板的情況下，接近細(xì)胞培養(yǎng)裝置和相關(guān)的技術(shù)設(shè)備是容易的，因?yàn)椴僮魅藛T可以走到天平的下方接近培養(yǎng)裝置以用于維護(hù)、修理、檢查和操縱。此外，天平和液體存放單元被防護(hù)以免受培養(yǎng)容器的攪拌器的擺動的影響。這可以通過使用柔性塑料管和連接器來進(jìn)一步改進(jìn)。此外，通過使用柔性包作為液體存放單元和這里所描述的支撐單元，可以將整個溶液添加到培養(yǎng)物中。


在圖1中，示出了這里所描述的支撐單元的示意圖。該支撐單元包括孔眼(1)形式的第一裝置、連接到孔眼的第一直區(qū)段O)、連接到鉤形式的第二裝置的第二直區(qū)段(3)、 偏置區(qū)段⑷和鉤(5)。圖2示出了沿著軸線(101)看到的第二裝置的不同實(shí)施方式，左上角除外，其中視線垂直于軸線(101)和(201)。
在圖3中，示出了第一裝置(1)、第一直區(qū)段(2)、第二直區(qū)段(3)、偏置區(qū)段(4)和第二裝置(5)的不同實(shí)施方式。在圖4中，示出了這里所描述的支撐單元的一個特定實(shí)施方式的示意圖，其中給出的數(shù)字以A. U.表示直徑和長度。圖5示出了這里所描述的支撐單元的又一特定實(shí)施方式。給出的數(shù)字以A.U.表示直徑和長度，R5表示135度。圖6示出了這里所描述的又一支撐單元的示意圖，其包括中央元件(6)、第一裝置(7)和第二裝置(701)、第三裝置(8)、支撐板12、下凸緣(13)、上凸緣(14)和外部凸緣 (15)。圖7示出了具有基板(10)和齒(11)的第三裝置⑶從上向下的示意圖。在圖8中，示出了包括第四裝置(9)的支撐單元以及單個第四裝置(9)。該第四裝置包括從下凸緣(1 到第一向上彎曲部00)的距離(16)、從第一向上彎曲部00)到第二向上彎曲部的距離(17)、從第二向上彎曲部到第三向上彎曲部02)的距離 (18)、和從第三向上彎曲部(22)到第四裝置的端部(23)的距離(19)。圖9示出了這里所描述的支撐單元的一個實(shí)施方式從第二裝置(701)和第四裝置 (9)的側(cè)面看的正視圖。給出的數(shù)字以A. U.表示直徑和長度。圖10以側(cè)視圖(左邊)和正視圖(右邊)示出了這里所描述的安裝在移動實(shí)驗(yàn)室上的天平0 下方的支撐單元04)的示例性應(yīng)用。圖11以側(cè)視圖(頂部)和正視圖(底部)示出了這里所描述的支撐單元04)的示例性應(yīng)用，該支撐單元04)安裝在天花板安裝軌上的具有控制單元06)的天平05)下方。
具體實(shí)施例方式這里所描述的一個方面是一種細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，包括a)細(xì)胞培養(yǎng)室，b)氣源，c)至少用于酸溶液、堿溶液、抗泡沫溶液和營養(yǎng)溶液的液體存放單元，d)至少用于確定細(xì)胞培養(yǎng)室中的氧濃度、二氧化碳濃度、PH值、溫度和葡萄糖濃度的傳感器，e)用于記錄傳感器數(shù)據(jù)和控制向細(xì)胞培養(yǎng)室添加溶液的控制單元，f)在e)的所述控制單元的控制下用于向細(xì)胞培養(yǎng)室添加溶液的至少一個泵，其中，-多達(dá)四個存放單元連接到一個天平，以及-向細(xì)胞培養(yǎng)室添加溶液的結(jié)束是由相應(yīng)液體存放單元從添加開始的重量損失來觸發(fā)的。 按重量計(jì)來控制向培養(yǎng)容器的溶液添加使得可以通過有限數(shù)量或者甚至單個的天平實(shí)現(xiàn)對添加的控制，從而降低了培養(yǎng)裝置的所需設(shè)備/技術(shù)的復(fù)雜性。此外還改進(jìn)了培養(yǎng)裝置的可接近性。 在一個實(shí)施方式中，至少其中一個連接到天平的存放單元在這里所描述的支撐單元中安裝在天平下方。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，尤其是當(dāng)使用由塑料制成的柔性包式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元時(shí)必須使用改進(jìn)的支撐單元。這里所描述的支撐單元防止了例如存放單元的破裂，尤其是在使用大的包式存放單元時(shí)。至于天平，可以使用任何天平，條件是該天平具有大于所使用的存放單元和液體的組合重量的最大容量以及條件是該天平具有用于將存放單元放置在其下方的裝置。在另一個實(shí)施方式中，包括存放單元和控制單元的天平位于細(xì)胞培養(yǎng)容器上方。術(shù)語“A位于B 上方”表示“A”處于“B”之上，即A的最低點(diǎn)到房間地板的距離大于B的最高點(diǎn)到房間地板的距離。在一個實(shí)施方式中，天平和存放單元的最低點(diǎn)在操作細(xì)胞培養(yǎng)裝置的房間地板上方的大于1. 5m且小于4. Om處。這里所描述的另一個方面是一種用于安裝細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的支撐單元，其中該支撐單元包括在一端的第一裝置(1)和在另一端的第二裝置(5)，它們通過桿連接，所述桿在與第一裝置(1)連接的第一直區(qū)段( 上沒有偏移量，在與第二裝置( 連接的第二直區(qū)段C3)上具有一個偏置區(qū)段(4)。當(dāng)具有安裝好的液體存放單元的支撐單元的第一裝置(1)被掛起時(shí)，所述偏置區(qū)段(4)允許具有安裝好的液體存放單元的整個支撐單元的質(zhì)量中心以這樣的方式定位，即，與第一裝置(1)連接的第一直區(qū)段( 垂直于使用該支撐單元的房間的地板。在一個實(shí)施方式中，第一直區(qū)段O)的軸線(101)與第二直區(qū)段(3) 的軸線(201)之間的偏置區(qū)段(4)相對于與第一裝置(1)連接的第一直區(qū)段O)的偏移量是 5-50A. U.。在另一個實(shí)施方式中，偏置區(qū)段⑷上的偏移量是10A. U.。所述偏置區(qū)段⑷在一個實(shí)施方式中包括具有90度到160度的角度(優(yōu)選地是135度)的第一彎曲部、直線連接器(優(yōu)選地從8A. U.到12A. U.)、以及與第一彎曲部在相反的方向上并且具有和第一彎曲部相同的角度的第二彎曲部。支撐單元的第一裝置(1)在一個實(shí)施方式中為用于拉住鉤并具有大約2 1的長度與直徑比的卵形孔眼，其優(yōu)選地具有10-16A.U.的長度和5-8A.U.的直徑。所述桿的區(qū)段(2)和(3)在一個實(shí)施方式中具有72A. U.到138A.U.的長度。在另一個實(shí)施方式中第二裝置( 具有關(guān)于桿的方向90度的角度。在一個實(shí)施方式中，第二裝置(5)具有相對于偏置區(qū)段的第二彎曲部50-60A.U.的距離。在一個實(shí)施方式中，用于安裝細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的支撐單元的特征在于，該支撐單元包括在一個端部的作為第一裝置(1)的孔眼和在另一端部的作為第二裝置(5)的鉤，它們通過桿連接，所述桿在與孔眼(1)連接的區(qū)段( 上沒有偏移量，在與鉤( 連接的區(qū)段(3)上具有偏移量，其中a)偏置區(qū)段(4)的相對于與孔眼(1)連接的區(qū)段(2)上的桿的偏移量是10A. U.，b)所述孔眼是用于拉住鉤并具有16A. U.的外部長度和8A. U.的外部直徑的卵形孔眼，c)所述桿的區(qū)段( 和C3)具有72A.U.或138A.U.的長度，d)所述偏置區(qū)段⑷包括i)具有135度角度的第一彎曲部、8A.U.-12A.U.的直線連接器、以及在與第一彎曲部相反的方向上具有與第一彎曲部相同的角度的第二彎曲部，e)所述鉤( 具有關(guān)于所述桿的方向90度的角度和到偏置區(qū)段的第二彎曲部的M-58A.U.的距離。這里所描述的另一方面是一種用于安裝細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的支撐單元，包括中央元件(6)，第一到第四裝置鉤(7)、(701)、(8)和(9)分別連接到所述中央元件(6)，其中a)兩個鉤(7)和(701)彼此相對地在中央元件(6)的每側(cè)連接在中央元件(6)的上部三分之一處，b)鉤(8)連接在中央元件(6)的下部三分之一處，c)鉤(9)連接到中央元件(6)的下凸緣(13)。在一個實(shí)施方式中，中央元件(6)是等腰梯形的形式。在一個實(shí)施方式中，中央元件(6)具有:a)下凸緣(13)，其長度是四0-320八州.，b)上凸緣(14)，其長度是90-110A. U.，c)外部凸緣(15)，其長度是530-570A.U.。在一個實(shí)施方式中，鉤(7) :a)連接在中央元件(6)的上部三分之一處，b)具有L形狀，c)以關(guān)于中央元件(6)90度的角度連接。在一個實(shí)施方式中，鉤(8)連接在中央元件(6)的下部三分之一處，并且具有部分圓形式的基板(10)(其具有大于相應(yīng)圓的半徑的高度)，以關(guān)于所述基板(10)90度的角度連接的兩個向上的齒(11)，連接到基板(10)的底部和中央元件(6)的下凸緣(13)的支撐板(12)，并且鉤(8)以75-85度的角度連接到中央元件(6)。連接到中央元件(6)的下凸緣(13)的鉤(9)指向與鉤⑶相對的一側(cè)，其以相對于中央元件(6) 130-150度的角度連接到下凸緣 (13)，并且在關(guān)于中央元件(6)分別150-165度、120-140度和120-140度的角度的方向上向上彎曲三次。在另一個實(shí)施方式中，連接在中央元件(6)的上部三分之一處的鉤(7)和(701) 中的每一個在距離中央元件(6)的上凸緣(14) 150-170A. U.處被連接，并且具有25-35A. U.的基板高度和10-14A. U.的向上高度。在另一個實(shí)施方式中，連接在中央元件(6)的下部三分之一處的鉤(8)具有120-140A. U.的基板(10)高度、90-100A. U.的半徑、50-60A. U.的齒(11)高度、40-50A.U.的齒(11)寬度，所述支撐板(12)具有70-100A. U.的長度和關(guān)于基板(10) 140-160度的角度。在另一個實(shí)施方式中，鉤(9)具有從下凸緣(13)到第一向上彎曲部00) 180-200A. U.的第一距離(16)、從第一向上彎曲部Q0)到第二向上彎曲部(21) 130-150A.U.的第二距離(17)、從第二向上彎曲部Ql)到第三向上彎曲部 (22)60-75A. U.的第三距離(18)、以及從第三向上彎曲部(22)到鉤(23)的端部110-130A. U.的第四距離(19)。在一個實(shí)施方式中，用于安裝細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的支撐單元的特征在于，該支撐單元包括等腰梯形形式的中央元件(6)，其具有305A.U.的下凸緣(1 長度、100A. U.的上凸緣(14)長度、545-565A.U.的外部凸緣(15)長度，四個裝置(7)，(701)，(8)和 (9)連接到該中央元件(6)，其中a)鉤(7)和(701)在距離中央元件的上凸緣(14) 160A. U.處相對地連接在中央元件(6)的每側(cè)，具有L形狀并且以關(guān)于中央元件(6)90度的角度連接，并且具有30A.U.的基板高度和12A.U.的向上高度，b)部分圓形式的鉤(8)，其具有關(guān)于基板(10)以90度的角度連接的兩個向上的齒(11)，并且具有連接到基板(10)的底部和中央元件(6)的下凸緣(13)的支撐板(12)，所述鉤(8)以關(guān)于中央元件(6)大約79 度的角度連接在中央元件(6)的下部三分之一處，其中所述基板(10)具有127A.U.的高度、94A.U.的半徑，齒(11)具有55A.U.的高度，43A.U.的寬度，其中支撐板(12)具有89A. U.的長度、40A.U.的寬度和關(guān)于基板147度的角度，c)鉤(9)連接到中央元件(6)的下凸緣(13)，以關(guān)于中央元件(6) 140度的角度指向與鉤(8)相對的一側(cè)，并且以158度、130度和130度的角度分別向上彎曲三次，并且具有從下凸緣(13)到第一向上彎曲部O0)190A. U.的距離(16)、從第一向上彎曲部00)到第二向上彎曲部Ol)137A.U.的距離(17)、從第二向上彎曲部到第三向上彎曲部02)67A.U.的距離(18)和從第三向上彎曲部02) 到鉤03)的端部119A.U.的距離(19)。本申請中使用的術(shù)語“添加”表示某個時(shí)間周期的溶液的添加，而不是整個量全部一次添加。該定義中還包括了溶液添加的單次開始和/或單次結(jié)束或多次開始和/或多次結(jié)束。等腰梯形是具有將一對相對邊二等分使其成為梯形的對稱線的四邊形。兩條相對邊(底邊)平行，兩條另外的邊(支腿)具有相等長度。對角線具有相等長度。等腰梯形的底角相等。具有一個對稱軸的任何四邊形一定是等腰梯形或風(fēng)箏形。術(shù)語“A.U. ”表示任意單位。利用該任意單位表示尺寸時(shí)，可以在單個說明中描述用于不同尺寸存放單元的支撐單元。尺寸比例和角度獨(dú)立于總體尺寸。在一個實(shí)施方式中， 1A.U.對應(yīng)于Imm(毫米)。在一個實(shí)施方式中，1A. U.對應(yīng)于Icm(厘米)。在一個實(shí)施方式中，1A. U.對應(yīng)于1英寸(1英寸=2. 54cm)。提供的附圖有助于理解本發(fā)明，本發(fā)明的真實(shí)范圍在所附的權(quán)利要求中給出。應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的精神的前提下可以對所闡述的內(nèi)容作出修改。
1權(quán)利要求
1.一種用于將細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元安裝在托架單元下方的支撐單元，其特征在于， 所述支撐單元包括-平面的中央元件(6)，所述中央元件(6)為板狀形狀，具有上凸緣(14)、下凸緣(13) 和高度(302)，-第一裝置(7)和第二裝置(701)，均用于安裝包式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元， -第三裝置(8)，用于安裝瓶式細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元，-靠近中央元件(6)的上凸緣(14)的鏤空部(301)，用于將支撐單元安裝到托架單元， 其中-中央元件(6)具有等腰梯形的形狀，上凸緣(14)處的寬度小于下凸緣(13)處的寬度的一半，-第一裝置(7)和第三裝置(8)在中央元件(6)的相同側(cè)上，第一裝置(7)和第二裝置 (701)在中央元件(6)的相對側(cè)上，-第一裝置(7)和第二裝置(701)均在距所述上凸緣(14)至多中央元件(6)的高度 (302)的三分之一的距離內(nèi)被連接，第三裝置(8)在距所述下凸緣(1 至多中央元件(6) 的高度(302)的三分之一的距離內(nèi)被連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單元，進(jìn)一步的特征在于-所述中央元件(6)包括等腰梯形狀的鏤空部(303)，和/或-第一裝置(7)和第二裝置(701)具有相同的形狀和尺寸，并且彼此相對地連接在中央元件(6)的兩側(cè)，和/或-第一裝置(7)和第二裝置(701)均具有L形狀，其中連接到中央元件(6)的面(307) 垂直于中央元件(6)的面，另一面(306)平行于中央元件(6)的面，和/或 -第三裝置(8)包括i)具有部分圓形狀的基板(10)，所述基板(10)的寬度(501)大于相應(yīng)圓的半徑 (502)， )相對于所述基板(10)成90度的角度(305)的兩個向上的齒(11)， iii)支撐板(12)，所述支撐板(12)連接到i)基板(10)的底部和ii)中央元件(6) 的下凸緣(13)，其中所述基板(10)以75-85度的角度(304)連接到中央元件(6)，和/或 -所述中央元件(6)還包括第四裝置(9)，所述第四裝置(9) i)連接到中央元件(6)的下凸緣(13)， )朝第一裝置(7)以及第三裝置(8)的相對側(cè)定向，iii)以130-150度的角度(601)連接到下凸緣(13)，并且分別以150-165度的角度 (602)、120-140度的角度(603)和120-140度的角度(604)向上彎曲三次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的單元，其特征在于 -所述中央元件(6)具有i)290-320A.U.長度的下凸緣(13)，ii)90-110A.U.長度的上凸緣(14)，iii)530-570A.U.長度的外部凸緣(15)，-第一裝置(7)和第二裝置(701)在距中央元件(6)的上凸緣(14) 150-170A. U.的距離處被連接，并且具有25-35A.U.的基板長度(307)和10-14A. U.的向上高度(306)，-連接在中央元件(6)的下部三分之一處的第二裝置(8)具有120-140A.U.的基板 (10)高度、90-100A.U.的半徑、50-60A.U.的齒(11)高度、40-50A. U.的齒寬度，所述支撐板(12)具有70-100A.U.的長度和相對于基板(10) 140-160度的角度，-第四裝置(9)具有從下凸緣(13)到第一向上彎曲部00)的180-200A.U.的距離 (16)、從第一向上彎曲部(20)到第二向上彎曲部(21)的130-150A.U.的距離(17)、從第二向上彎曲部到第三向上彎曲部02)的60-75A.U.的距離(18)、以及從第三向上彎曲部(22)到鉤的端部(23)的110-130A. U.的距離(19)。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的單元，其特征在于，所述托架單元選自底部具有鉤的電子天平、機(jī)械天平、具有大于支撐單元的總體長度的固定高度的可移動臺架、或者鉤。
5.一種設(shè)備，所述設(shè)備包括根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的支撐單元和選自底部具有鉤的電子天平、機(jī)械天平或具有大于支撐單元的總體長度的固定高度的可移動臺架的托架單元。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的支撐單元在用于拉住至少三個細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元和將該支撐單元安裝到托架單元從而該支撐單元自由懸掛在托架單元下方的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的單元，其特征在于，1A.U.是Imm或Icm或1英寸。
8.一種細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，包括a)細(xì)胞培養(yǎng)室，b)氣源，c)至少用于酸溶液、堿溶液、抗泡沫溶液和營養(yǎng)溶液的細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元，d)至少用于確定細(xì)胞培養(yǎng)室中的氧濃度、二氧化碳濃度、pH值和溫度的傳感器，e)用于記錄傳感器數(shù)據(jù)和控制向細(xì)胞培養(yǎng)室添加溶液的控制單元，f)在e)的所述控制單元的控制下用于向細(xì)胞培養(yǎng)室添加c)中的溶液的至少一個泵，其中-多達(dá)五個存放單元連接到一個天平，-至少其中一個連接到所述天平的存放單元在根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的支撐單元中放置在該天平下方，以及-向細(xì)胞培養(yǎng)室添加每種溶液的結(jié)束是由相應(yīng)液體存放單元從添加開始的重量損失來觸發(fā)的。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的設(shè)備，其特征在于，所述天平放置在操作所述細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的房間的地板上方1. 5m至4. Om處。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9任一項(xiàng)所述的設(shè)備，其特征在于，所述液體存放單元經(jīng)由柔性塑料管與所述泵連接，所述泵經(jīng)由柔性塑料管與細(xì)胞培養(yǎng)室連接。
11.一種使用根據(jù)權(quán)利要求8-10中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備培養(yǎng)細(xì)胞的方法。
12.—種生產(chǎn)多肽的方法，包括如下步驟a)提供包含編碼多肽的核酸的細(xì)胞，b)在根據(jù)權(quán)利要求8-10中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備中培養(yǎng)細(xì)胞，c)從培養(yǎng)介質(zhì)或細(xì)胞中重新獲得多肽，d)選擇性地對所述多肽進(jìn)行純化， 從而生產(chǎn)出多肽。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于安放可以連接到天平的細(xì)胞培養(yǎng)液體存放單元的支撐單元、使用該支撐單元的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備、以及這種支撐單元在用于細(xì)胞培養(yǎng)的方法中的應(yīng)用。
文檔編號C12M1/00GK102471751SQ201080035861
公開日2012年5月23日 申請日期2010年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月13日
發(fā)明者C·科爾肖夫斯基, R·羅滕博格 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司