專利名稱：室內鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法
技術領域：
本發明涉及向日葵病菌鑒定方法，具體而言涉及一種室內鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法。
背景技術：
核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.) de Bary)是一種寄主非常廣泛的病原真菌，世界上有超過400種的作物和雜草如向日葵、油菜、大豆、花生、菜豆、胡蘿卜、擬南芥等都可以受到不同程度的侵染。由核盤菌引起的菌核病是目前影響向日葵產量的主要病害之一。篩選耐/抗菌核病的育種材料是控制菌核病發生的重要的農業措施。室內鑒定不同向日葵品種對菌核病抗性水平是向日葵抗病育種的前提，但是利用常規的PDA培養基培養核盤菌其生長速度快，僅用很小的接種量就可以在極短的時間內使所用的供試品種的葉片腐爛，因此給抗性鑒定帶來一定的困難。

發明內容
因此本發明的目的正是針對上述缺陷，提供一種能夠在室內區分不同向日葵品種的抗性水平的方法。為了實現本發明的目的，采用如下技術方案本發明一方面涉及鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法，包括如下步驟將活化好的核盤菌菌株接種在M培養基上，黑暗培養，用接菌針挑取單個菌絲瓊脂塊，準確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側，置于20-25°C自然光下保濕培養，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M-培養基每IOOOmL含有NaOH 0. 5-2g、DL-蘋果酸 2-4g、NH4NO3 l_3g、MgSO4 0. 05-0. 2g、瓊脂粉 30_50g。在本發明的一個優選實施方式中，所述的M培養基每IOOOmL含有NaOHlg、DL-蘋果酸 3g、NH4NO3 2g、MgS04 0. lg、瓊脂粉 37_40g。在本發明的一個優選實施方式中，所述的M-培養基不包括除水之外其它營養成分。本發明的方法利用M-培養基培養的核盤菌接種向日葵葉片，能夠區分不同品種的抗性，為向日葵抗性育種材料的的選育提供參考。


圖1 核盤菌菌株在PDA和M-培養基上生長活力測定；圖2 :X-8菌株在不同培養條件下致病力測定結果；圖3 食葵品種資源對菌核病抗性的室內篩選結果。
具體實施例方式實施例1 1.配置培養基，培養基的成分為
PDA 馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂粉13g、定容至1000mL。M-培養基(M-medium) =NaOH lg、DL_malic acid (蘋果酸)3g、NH4N032g、MgS04. 7H20 0. lg、39g Bacto-agar (瓊脂粉)、定容至 IOOOmL02.將核盤菌在兩種培養基上分別培養，比較核盤菌生長速度和菌核形成速度，結果如圖1和表1所示表1核盤菌菌株在不同培養基上生長活力測定
權利要求
1.鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法，包括如下步驟將活化好的核盤菌菌株接種在M培養基上，黑暗培養，用接菌針挑取單個菌絲瓊脂塊， 準確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側，置于20-25°C自然光下培養，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M-培養基每IOOOmL含有NaOH 0. 5_2g、DL-蘋果酸 2-4g、NH4NO3 l-3g、MgS04 0 . 05-0 . 2g、瓊脂粉 30_50g。
2.根據權利要求1所述的鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法，所述的M-培養基每 IOOOmL 含有 NaOH lg、DL-蘋果酸 3g、NH4NO3 2g、MgSO4O. lg、瓊脂粉 39g。
3.根據權利要求1或2所述的鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的方法，其特征在于所述的M-培養基不包 括除水之外其它營養成分。
全文摘要
本發明公開了一種鑒定向日葵品種對菌核病抗性水平的鑒定方法，包括如下步驟將活化好的核盤菌菌株接種在Minum培養基上(簡稱M培養基)，黑暗培養.然后用接菌針挑取單個菌絲瓊脂塊，準確接種在向日葵葉片主葉脈的兩側，置于20-25℃自然光下保濕培養，用十字交叉法量取病斑直徑大小以鑒定向日葵的抗性水平，所述的M培養基含有NaOH、DL-蘋果酸、NH4NO3、MgSO4、瓊脂粉。本發明的方法利用M-培養基培養核盤菌接種向日葵葉片，能夠區分不同向日葵品種的抗性，為向日葵新品種的選育和抗病育種奠定基礎。
文檔編號C12Q1/18GK102433372SQ201110397710
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月5日 優先權日2011年12月5日
發明者侯亞光, 周洪友, 娜仁, 張之為, 景蘭, 王玉杰, 石必顯, 趙君, 雷中華 申請人:內蒙古農業大學