專利名稱：生茶酵素的制備方法
技術領域：
本發明涉及酵素領域，尤其涉及一種生茶酵素的制備方法。
背景技術：
酵素是一種由氨基酸組成的具有特殊生物活性的物質，也稱為酶。它是一種生物催化劑，存在于所有的動、植物和微生物體內，是維持機體正常功能，消化食物，修復組織等生命活動的一種必需物質。目前，人體補充酵素主要還是生食果蔬為主。新鮮的茶葉中本身含有豐富的酵素和多種有效生理活性物質，比如多酚類、皂甙類、咖啡堿等很多對人體有益的成分。然而，由于茶葉在采摘后經過5-10個小時的自然發酵就進行炒茶殺青，烘干等加工工藝，這樣會使茶葉中的酵素已經失活和部分營養流失等。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種生茶酵素的制備方法，該方法用時短、污染少，能將生茶葉快速酵解從而獲得易被人體吸收的小分子物質，最大程度留茶葉的有效成分，大量積累生理活性物質和產生各種纖維酵素、蛋白酵素、溶纖酵素、淀粉酵素等有益的酵素，大大提高生茶酵素的綜合保健價值。為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案一種生茶酵素的制備方法，該方法包括以下步驟一次發酵步驟，對生茶進行臭氧消毒處理后，在潔凈條件下將其切細、切碎，加入黑糖混合均勻后，接入靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種，在常溫下發酵30-50天；二次發酵步驟，在經一次發酵后的半成品中接入醋酸桿菌菌種，在常溫下發酵15-20天，得到生茶酵素原液；其中，上述各組分按重量計分量如下生茶100 份；黑糖1-5 份；靈芝菌種I. 5-2份；枯草桿菌菌種2-3份；雙歧桿菌菌種1-2份；醋酸桿菌菌種2. 5-3. 5份。優選地，該方法還包括有裝罐熟成步驟，將所述二次發酵得到的生茶酵素原品進行裝罐熟成后，靜置25-35天，得到生茶酵素成品。優選地，所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種、醋酸桿菌菌種均為由斜面試管菌種擴大的液體培養菌種。優選地，所述靈芝菌種通過以下方法制得以按重量計的葡萄糖2% -5%、麥芽浸膏1% -4%、酵母抽提物O. 1% -O. 2%、以及蛋白胨O. 01%-O. I %為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120_125°C濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種靈芝斜面試管菌種1-2環，在22-28°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶靈芝菌種子。優選地，所述枯草桿菌菌種通過以下方法制得以按重量計的葡萄糖1% _5%、酵母膏1% -O. 2 %、蛋白胨O. 01%-O. I %、以及大豆水解液3%為培養基，調整PH值為4. 0-7.0、溫度為120-1251濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種枯草桿菌斜面試管菌種1- 2環，在20-32 °C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶枯草桿菌種子。優選地，所述雙歧桿菌菌種通過以下方法制得以按重量計的蛋白胨1% _3%、牛肉浸膏1% _3%、酵母提取物1% -3%、葡萄糖2% -5%、吐溫800. 05%、檸檬酸氫二銨
O.2%,MnSO4 · H2O O. 002%,MgS04 · 7H20 O. 02% -O. 08%,K2HP040. 2%為培養基，調整 PH值為4. 0-7. O、溫度為120-125°C濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種雙歧桿菌種子1-2環，常溫厭氧培養3-5天，得到雙歧桿菌種子。優選地，所述醋酸菌菌種通過以下方法獲得以按重量計的葡萄糖1% _5%、酵母粉1% -5%為培養基，調整pH為值5. 5，溫度為120-125°C濕熱滅菌15-25分鐘，冷卻到常溫后加入食用級酒精4%，接種醋酸桿菌斜面試管菌種1-2環，在20-33°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4_8天，得到搖瓶醋酸桿菌種子。優選地，所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種、醋酸桿菌菌種均為由斜面試管菌種擴大為液體菌種。優選地，所述生茶為任意單個品種或多個品種混合的采摘后未經烘炒的茶葉。優選地，上述各組分按重量計分量具體如下生茶100 份；黑糖5份；靈芝菌種2份；枯草桿菌菌種2. 5份；雙歧桿菌菌種I. 5份；醋酸桿菌菌種3份。相應地，本發明還公開了一種生茶酵素，所述生茶酵素采用上方法制備而成。本發明的有益效果是本發明的實施例通過利用靈芝菌、枯草桿菌、雙歧桿菌、醋酸菌等酵解生茶，剛采摘的新鮮茶葉通過自身酵解和多菌聯合發酵，使生茶葉迅速酵解為易被人體吸收的小分子物質，有效保留了生茶中原有的多酚類、皂甙類、咖啡堿和生茶葉中本身的各種酵素，同時有效累積了多種有生理活性功能的物質和生產各種酵素，發酵過程中雜菌污染少。靈芝菌生長迅速并能積累三萜類和靈芝多糖等多種生理活性成分。靈芝生茶酵素中含茶葉多酚類、茶皂甙、咖啡堿等有效物質和各種益生菌所產生的纖維酵素、蛋白酵素、溶纖酵素、淀粉酵素，枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽，三萜類和多糖類等有多種生理功能的活性性物質，并且含量達到較高的水平，多菌聯合發酵會產生大量有益因子等，從而大大提高了生茶酵素的綜合保健價值。
具體實施例方式下面詳細描述本發明的生茶酵素及其制備方法的一個實施例；本實施例實現一次生茶酵素的制備包括以下步驟一次發酵步驟，對生茶進行臭氧消毒處理后，在潔凈條件下將其切細，切碎，加入黑糖混合均勻后，接入靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種，在常溫下發酵30-50天；二次發酵步驟，在經一次發酵后的半成品中接入醋酸桿菌，在常溫下發酵15-20天，得到生茶酵素原液；裝罐熟成步驟，將所述二次發酵得到的生茶酵素原液進行裝罐熟成后，靜置25-35天，得到生茶酵素成品。其中，上述各組分按重量計分量如下生茶100 份；黑糖1-5 份；靈芝菌種1. 5-2份；枯草桿菌菌種2-3份；雙歧桿菌菌種1-2份；醋酸桿菌菌種2. 5-3. 5份。作為本實施例的一種實現方式，所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種醋酸桿菌菌種均可為由斜面試管菌種擴大成的液體培養菌種。具體地，所述靈芝菌種通過以下方法制得以按重量計的葡萄糖2% -5%、麥芽浸膏1% -4%、酵母抽提物O. 1% -O. 2%、以及蛋白胨O. 01%-O. I %為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120_125°C濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種靈芝斜面試管菌種1-2環，在22-28°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶靈芝菌種子。所述枯草桿菌菌種通過以下方法制得以按重量計的葡萄糖1% _5%、酵母膏1% -O. 2%、蛋白胨O. 01% -O. 1%、以及大豆水解液3%為培養基，調整PH值為4. 0-7.0、溫度為120-1251濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種枯草桿菌斜面試管菌種1-2環，在20-32 °C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶枯草桿菌種子。所述雙歧桿菌菌種通過以下方法制得以按重量計的蛋白胨1% -3 %、牛肉浸膏1% -3 %、酵母提取物1% -3 %、葡萄糖 2% -5 %、吐溫 800. 05 %、檸檬酸氫二銨 O. 2 %、MnSO4 · H2O O. 002 %, MgS04 · 7H20
O.02% -O. 08%, K2HPO4O. 2%為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120_125°C濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后，接種雙歧桿菌種子1-2環，常溫厭氧培養3-5天，得到雙歧桿菌種子。所述醋酸菌菌種通過以下方法獲得以按重量計的葡萄糖1% -5%、酵母粉1% -5%為培養基，調整pH值為5. 5，溫度為120-125°C濕熱滅菌15-25分鐘，并冷卻到常溫后加入食用級酒精4%，接種醋酸桿菌斜面試管菌種1-2環，在20-33°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4_8天，得到搖瓶醋酸桿菌種子。具體實現時，上述各組分按重量計分量具體如下生茶100 份；
黑糖5份；靈芝菌種2份；枯草桿菌菌種2. 5份；雙歧桿菌菌種I. 5份；醋酸桿菌菌種3份。或者，所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種、醋酸桿菌菌種也可均采用固體菌種。具體實現時，常溫可以是指25_33°C，上述各培養基滅菌公式均為120_125°C下濕熱滅菌15-25分鐘。實施例取生茶(包括各種類的茶葉)20公斤，進行臭氧消毒處理后，在潔凈條件下，切細，切碎，加入黑糖I公斤，混合均勻，分別加入2%靈芝菌種、2. 5%枯草桿菌菌種、I. 5%雙歧桿菌菌種，在常溫下發酵40天后，接入3%的醋酸桿菌進行15天的發酵，得生茶酵素原液。將生茶酵素原液進行裝罐熟成，2個月后得品質優良，濃黑粘稠的生茶酵素。本發明中的生茶可以是任意單個品種或多個品種混合的采摘后未經烘炒的茶葉，最好用新鮮生茶葉，茶葉越新鮮，效果越好；靈芝菌種包括靈芝屬的所有菌種。本發明具有以下優點I、靈芝菌參與生茶酵素的發酵，分解茶葉，累積三萜類，靈芝多糖等有多種有保健功效的生理活性物質。2、靈芝菌與枯草桿菌，雙歧桿菌，醋酸桿菌聯合發酵起到互補共生作用，使生茶迅速分解成小分子物質，雜菌污染少。枯草桿菌能穿過胃的惡劣環境，并定植在腸道中，保護腸道的健康，枯草桿菌能產生蛋白酵素，淀粉酵素，纖維酵素，納豆酵素，枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等多種酵素和抑菌活性物質，在消化道中與人體內的消化酵素一同發揮作用，抑制有害菌的生長，有利于機體對食物的消化和吸收。3、醋酸桿菌的最后發酵，有效把酒精轉化成醋酸或乳酸類物質和一些對人體有益的代謝產物。本發明可應用于靈芝多糖的制備、茶葉的高附加值深加工、枯草桿菌腸道保護劑和溶血栓性納豆酵素的生產領域等。以上所述，僅為本發明較好的具體實施方式
，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種生茶酵素的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟 一次發酵步驟，對生茶進行臭氧消毒處理后，在潔凈條件下將其切細、切碎，并加入黑糖混合均勻后，加入靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種，在常溫下發酵30-50天；二次發酵步驟，在經一次發酵后的半成品中接入醋酸桿菌，在常溫下發酵15-20天，得到生茶酵素原液； 裝罐熟成步驟，將所述二次發酵得到的生茶酵素原品進行裝罐熟成，靜置存放50-70天，得到生茶酵素成品。
其中，上述各組分按重量計分量如下 生茶100份； 黑糖1-5份； 靈芝菌種I. 5-2份； 枯草桿菌菌種2-3份； 雙歧桿菌菌種1-2份； 醋酸桿菌菌種2. 5-3. 5份。
2.如權利要求I所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種、以及醋酸桿菌菌種均為由斜面試管菌種擴大的液體培養菌種。
3.如權利要求2所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于，所述靈芝菌種通過以下方法制得 以按重量計的葡萄糖2% _5%、麥芽浸膏1% _4%、酵母抽提物O. 1% _0.2%、以及蛋白胨O. 01% -O. I %為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120_125°C濕熱滅菌15-25分鐘，冷卻到常溫后，接種靈芝斜面試管菌種1-2環，在22-28°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶靈芝菌種子。
4.如權利要求3所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于，所述枯草芽菌菌種通過以下方法制得 以按重量計的葡萄糖1% -5 %、酵母膏1% -O. 2%、蛋白胨O. 01%-O. I %、以及大豆水解液3%為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120-125°C濕熱滅菌15-25分鐘，冷卻到常溫后，接種枯草桿菌斜面試管菌種1-2環，在20-32°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4-8天，得到搖瓶枯草桿菌種子。
5.如權利要求4所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于，所述雙歧桿菌菌種通過以下方法獲得 以按重量計的蛋白胨1%-3 %、牛肉浸膏1% -3 %、酵母提取物1% -3 %、葡萄糖 2 % -5 %、吐溫 800. 05 %、檸檬酸氫二銨 O. 2 %、MnSO4 · H2O O. 002 %、MgSO4 · 7H20O.02-0. 08%, K2HPO4 O. 2%為培養基，調整PH值為4. 0-7. O、溫度為120_125°C濕熱滅菌15-25分鐘，冷卻到常溫后，接種雙歧桿菌種子1-2環，常溫厭氧培養3-5天，得到雙歧桿菌種子。
6.如權利要求5所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于，所述醋酸菌菌種通過以下方法獲得 以按重量計的葡萄糖1% -5%、酵母粉1% -5%為培養基，調整PH值為5. 5，溫度為120-125 濕熱滅菌15-25分鐘，冷卻到常溫后，加入食用級酒精4%，接種醋酸桿菌斜面試管菌種1-2環，在20-33°C、轉速90-200rpm/min的搖床中培養4_8天，得到搖瓶醋酸桿菌種子。
7.如權利要求I所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于所述靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種、醋酸桿菌菌種均為由斜面試管菌種擴大的液體菌種。
8.如權利要求6所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于所述生茶為任意單個品種或多個品種混合的采摘后未經烘炒的茶葉。
9.如權利要求1-8中任一項所述的生茶酵素的制備方法，其特征在于，上述各組分按重量計分量具體如下 生茶100份； 黑糖5份； 靈芝菌種2份； 枯草桿菌菌種2. 5份； 雙歧桿菌菌種I. 5份； 醋酸桿菌菌種3份。
10.一種生茶酵素，其特征在于所述生茶酵素采用如權利要求1-9中任一項所述的方法制備而成。
全文摘要
本發明公開一種生茶酵素的制備方法，包括一次發酵步驟，對生茶進行臭氧消毒處理后，在潔凈條件下將其切細、切碎，并加入黑糖混合均勻后，加入靈芝菌種、枯草桿菌菌種、雙歧桿菌菌種，在常溫下發酵30-50天；二次發酵步驟，在經一次發酵后的半成品中接入醋酸桿菌，在常溫下發酵15-20天，得到生茶酵素原液。本發明還公開了相應的生茶酵素。采用本發明制備生茶酵素用時短、污染少，能將生茶葉快速酵解獲得易被人體吸收的小分子物質，最大程度留茶葉的有效成分，并大量積累生理活性產物和各種纖維酵素、蛋白酵素、溶纖酵素、淀粉酵素等，大大提高生茶酵素的綜合保健價值。
文檔編號A23F3/10GK102613329SQ20121011625
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月19日 優先權日2012年4月19日
發明者廖威, 楊如鋼, 蔡青松, 趙宗杰 申請人:深圳市中科海外科技有限公司