以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法，所述方法包括以下步驟：以聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的一種或兩種作為負(fù)載脂肪酶的基質(zhì)將脂肪酶固定化；然后在反應(yīng)裝置中依次加入反應(yīng)物甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯；再在所述反應(yīng)物中加入固定化脂肪酶；最后攪拌進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，反應(yīng)后獲得產(chǎn)物碳酸二甲酯。本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯，不僅具有高轉(zhuǎn)化率、高選擇性、高普適性，而且工藝簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、降低成本、環(huán)境友好、固定化脂肪酶可循環(huán)利用、應(yīng)用前景廣闊。
【專利說明】以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物化工領(lǐng)域，特別是涉及ー種以固定化脂肪酶為催化劑催化制備碳
酸二甲酯的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]碳酸二甲酯(methy 1-carbonate, DMC)在常溫下為無色液體，沸點(diǎn)90.1°C,熔點(diǎn)4°C，密度1.069g/cm3，閃點(diǎn)(開杯)21.7°C，水部分混溶。但可以與醇、醚、酮等幾乎所有的有機(jī)溶劑混溶。碳酸二甲酯作為一種有機(jī)合成原料和化工產(chǎn)品，1992年在歐洲通過了非毒性化學(xué)品的注冊(cè)登記，因其分子中含有羰基、甲基和甲氧基等多種官能團(tuán)，能與酚、醇、胺、肼、酯類化合物反應(yīng)，在諸多有機(jī)合成領(lǐng)域可以全面替代光氣、硫酸二甲酯(dimethylsulfate, DMS)、氯甲烷及氯甲酸甲酯等劇毒或致癌物進(jìn)行羰基化、甲基化、甲酯化及酯交換等反應(yīng)，是ー種重要的有機(jī)合成中間體，并被譽(yù)為21世紀(jì)有機(jī)合成的“新基石”。DMC毒性很低，是ー種符合現(xiàn)代清潔エ藝要求的環(huán)保型化工原料，因此DMC的合成技術(shù)受到了國(guó)內(nèi)外化工界的廣泛重視(J.H.Clements, Ind.Eng.Chem.Res., 42 (2003):663 ;S.Fukuoka etal., Green Chem.5(2003):497 ；J.Bayarydon et al., Angew.Chem.1nt.Ed.,46(2007):5971)。
[0003]DMC最初的生產(chǎn)方法為光氣法，于1918年開發(fā)成功，但是光氣的毒性和腐蝕性限制了這一方法的應(yīng)用，特別是隨著環(huán)保受全世界重視程度的日益提高，光氣法已被淘汰。自20世紀(jì)80年代開始，對(duì)于DMC生產(chǎn)エ藝的研究開始受到普遍的關(guān)注，據(jù)Michael A.Pacheco和ChristopherL.Marshall的統(tǒng)計(jì)，有關(guān)DMC生產(chǎn)エ藝的專利自1980~1996年就超過了200項(xiàng)。20世紀(jì)80年代初，意大利的EniChem公司實(shí)現(xiàn)了以CuCl為催化劑的由甲醇氧化羰基化合成DMCエ藝的商業(yè)化，這是第一個(gè)實(shí)現(xiàn)エ業(yè)化的非光氣合成DMC的エ藝，也是應(yīng)用最廣的エ藝，此エ藝的缺陷在于高轉(zhuǎn)化率時(shí)催化劑的失活現(xiàn)象嚴(yán)重，因此其單程轉(zhuǎn)化率僅為20%。在20世紀(jì)90年代，DMC合成エ藝的研究得到了迅速的發(fā)展，日本的Ube對(duì)EniChem公司甲醇氧化羰基化合成DMC的エ藝進(jìn)行了改進(jìn)，選擇NO為催化劑，這樣避免了催化劑的失活，使轉(zhuǎn)化率幾乎達(dá)到了 100%，此エ藝已實(shí)現(xiàn)了エ業(yè)化，但該エ藝以CO為原料，CO是ー種有毒的氣體，因此CO引起的安全問題限制該エ藝的應(yīng)用；美國(guó)Texaco公司開發(fā)了先由環(huán)氧乙烷與二氧化碳反應(yīng)生成碳酸乙烯酷，再與甲醇經(jīng)過酯交換生產(chǎn)DMC的エ藝，此エ藝聯(lián)產(chǎn)乙二醇，于1992年實(shí)現(xiàn)了エ業(yè)化，此エ藝被認(rèn)為產(chǎn)率較低、生產(chǎn)成本較高，只有當(dāng)DMC年產(chǎn)量高于55kt時(shí)其投資和成本才可以與其他方法競(jìng)爭(zhēng)；此外還有一種新興的エ藝，即尿素醇解反應(yīng)，若與尿素生產(chǎn)聯(lián)合進(jìn)行可降低成本，此エ藝有望實(shí)現(xiàn)エ業(yè)化。
[0004]近年來，合成DMC的研究受到國(guó)內(nèi)外研究者的廣泛關(guān)注， 合成路線正朝著簡(jiǎn)單化、無毒化和無污染化的方向發(fā)展。目前合成DMC的緑色方法主要有CO2和甲醇直接合成法、酯交換法和尿素醇解法。其中，以碳酸乙烯酯或碳酸丙烯酯為原料，通過和甲醇酯交換來制備碳酸二甲酯和二醇的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)和エ業(yè)需求日益増大，引起各國(guó)科學(xué)家廣泛的關(guān)注。美國(guó)專利US430703公開了ー種碳酸二烷基酯的制備方法，該專利中公開了使用鉈化合物作為酯交換反應(yīng)的催化劑，在相對(duì)低溫、低催化劑濃度下，可獲得高的反應(yīng)速率，并強(qiáng)有力地抑制了副反應(yīng)的發(fā)生。例如在150°C，1.92X 10_4mol碳酸鉈存在下，反應(yīng)30分鐘后，碳酸乙烯酷(甲醇:碳酸乙烯酷=5: I)的轉(zhuǎn)化率達(dá)70%，生成DMC的選擇性達(dá)90%。通過蒸餾除去DMC和甲醇的共沸物(約70%甲醇)后，殘留物在同一條件下繼續(xù)和甲醇反應(yīng)，可獲得80%的轉(zhuǎn)化率，其副產(chǎn)物仍很少，這一反應(yīng)也可在裝有鉈催化劑的固定床反應(yīng)器中進(jìn)行。美國(guó)專利US4661609公開ー種聯(lián)產(chǎn)乙烯乙二醇和碳酸二甲酯的方法，該專利中公開了使用鈦和鋯的可溶性鹽或其絡(luò)合物作為酯交換反應(yīng)的均相催化劑，反應(yīng)溫度在20°C~200°C，甲醇和碳酸乙烯酯的配比較小。例如130°C高氯酸鋯作催化劑、甲醇和碳酸乙烯酯摩爾比為4.7吋，碳酸乙烯酯的轉(zhuǎn)化率為89%。DMC的選擇性以碳酸乙烯酯計(jì)為80%，以甲醇計(jì)為76%，乙二醇的選擇性均在95%以上。堿土金屬硅酸鹽如Na2SiO3, KHSiO3, Li2SiO3等負(fù)載在硅膠上作為反應(yīng)的催化劑，在80°C~125°C，0.7Mpa，LHSV = 1.0，CH30H/EC(mol) = 4時(shí)，其活性順序?yàn)?Na2SiO3 > KHSiO3 > Li2SiO3，其中水玻璃負(fù)載在硅膠上作為催化劑時(shí)，碳酸乙烯酯的轉(zhuǎn)化率約為30%。不過此類物質(zhì)的催化壽命不長(zhǎng)，隨反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，催化活性逐漸下降(劉宗鍵，蔡曄，酯交換法合成DMC的催化劑研究，化工生產(chǎn)與技術(shù)，1998，5 (4)，13-15)。
[0005]甲醇直接合成法、酯交換法和尿素醇解法合成DMC都存在催化劑活性或選擇性不高、產(chǎn)率低等缺點(diǎn)，因此尋找更加合適的催化劑及載體、提高催化劑的活性和選擇性是生產(chǎn)DMC的技術(shù)關(guān)鍵和研究熱點(diǎn)。
[0006]酶作為ー種生物催化劑，近年來已被人們廣泛應(yīng)用于食品生產(chǎn)與檢測(cè)、環(huán)保技木、生物技術(shù)、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。目前研究和應(yīng)用最廣泛的脂肪酶(Lipase，EC 3.1.1.3)是ー類能催化油脂和短鏈醇進(jìn)行轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)生成脂肪酸甲酯的生物催化劑，脂肪酶所介導(dǎo)的反應(yīng)具有反應(yīng)條件溫和、醇用量小、產(chǎn)品易收集純化、無污染物排放等優(yōu)點(diǎn)，目前國(guó)內(nèi)外用于轉(zhuǎn)酯化研究的脂肪酶主要`為諾維信公司生產(chǎn)的NOVOZym435，此酶為樹脂固定化酶，載體為大孔丙烯酸樹脂，價(jià)格高昂，不利于酶法制備化工原料的エ業(yè)化生產(chǎn)。由于酶是由蛋白質(zhì)組成，必須在溫和條件下使用，其高級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)熱、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑均不穩(wěn)定，在反應(yīng)中容易失活，而且酶中常常帶有雜蛋白及有色雜質(zhì)，造成產(chǎn)品分離提純困難，因此存在產(chǎn)品污染，而且酶也難以回收重復(fù)使用，造成產(chǎn)品成本較高。這一切都限制了酶催化反應(yīng)的應(yīng)用和發(fā)展。為了克服自由酶的不足，固定化酶技術(shù)產(chǎn)生了。酶的固定化是通過物理或化學(xué)的處理方法，用固體材料將酶束縛或限制在一定的區(qū)域內(nèi)，仍能進(jìn)行其特有的催化反應(yīng)，并可回收及重復(fù)使用的ー類技木。與自由酶相比，固定化酶不僅保持了自由酶的催化反應(yīng)特性，而且對(duì)熱、PH等的穩(wěn)定性提高，對(duì)抑制劑的敏感性降低且貯存穩(wěn)定性高，分離回收容易，可以多次重復(fù)使用，且酶的活力降低較少，操作連續(xù)性高，エ藝簡(jiǎn)便，且產(chǎn)品中不會(huì)帶進(jìn)酶蛋白或細(xì)胞，改善了后處理過程，降低了生產(chǎn)成本。由于脂肪酶可以催化酯交換、酯轉(zhuǎn)移、水解等反應(yīng)，所以固定化脂肪酶在油脂エ業(yè)中有廣泛應(yīng)用。比如，1，3_特異性脂肪酶可酶促酯交換反應(yīng)，將棕?cái)R油改性為代可可酷。代可可酯是生產(chǎn)巧克力的原料，價(jià)格甚高，而棕?cái)R油價(jià)廉，因此這一エ藝受到較多重視，已開展了較多工作(Blooner S, et al, J Am.0il Chem Soc,1990，67，519)。但是將固定化的脂肪酶應(yīng)用于催化制備碳酸二甲酯還未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題是提供一種以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法，不僅具有高轉(zhuǎn)化率、高選擇性、高普適性，而且工藝簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、降低成本、環(huán)境友好、固定化脂肪酶可循環(huán)利用、應(yīng)用前景廣闊。
[0008]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:提供一種以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法，所述方法包括以下步驟:
[0009]I)以基質(zhì)將脂肪酶固定化；[0010]2)在反應(yīng)裝置中依次加入反應(yīng)物甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯；
[0011]3)在所述反應(yīng)物中加入所述固定化脂肪酶；
[0012]4)攪拌進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，反應(yīng)后獲得產(chǎn)物碳酸二甲酯。
[0013]優(yōu)選地，所述以基質(zhì)將脂肪酶固定化的步驟包括:
[0014]A、在50升的容器中依次加入400克基質(zhì)、25升去離子水,形成一基質(zhì)溶液,加熱至基質(zhì)溶液沸騰，加熱過程中不斷攪拌，沸騰50分鐘左右后基質(zhì)基本溶解；冷卻至室溫后攪拌60分鐘至基質(zhì)溶液基本無色透明；
[0015]B、將100克脂肪酶與300克去離子水的混合物加入到所述基質(zhì)溶液中得到一混合溶液，攪拌所述混合溶液120分鐘后將所述混合溶液均勻地導(dǎo)入含聚四氟乙烯的培養(yǎng)皿中，在真空條件下冷凍干燥24小時(shí)后，形成一層薄膜，得到所述固定化脂肪酶。
[0016]優(yōu)選地，所述基質(zhì)為聚乙烯醇(PVA，1750±50)、羥甲基纖維素鈉(CMC，800~1200mPa.s)、輕丙基甲基纖維素(HPMC,6mPa.s)中的一種或兩種,其中，基質(zhì)為聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的兩種時(shí)，兩種基質(zhì)的質(zhì)量比為1:1~1: 10。
[0017]最優(yōu)選地，所述基質(zhì)為聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的兩種時(shí)，兩種基質(zhì)的質(zhì)量比為1: 2。
[0018]優(yōu)選地，所述步驟2)中加入醇酯摩爾比為4:1~50:1的甲醇與碳酸乙烯酯
或甲醇與碳酸丙烯酯。
[0019]最優(yōu)選地，所述步驟2)中加入醇酯摩爾比為16: I的甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯。
[0020]優(yōu)選地，所述步驟3)中加入所述反應(yīng)物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的0.1%~25%的固定化脂肪酶。
[0021]最優(yōu)選地，所述步驟3)中加入所述反應(yīng)物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的3%的固定化脂肪酶。
[0022]優(yōu)選地，所述步驟4)中加入所述碳酸乙烯酯或碳酸丙烯酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)I %的水，所述轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的反應(yīng)溫度為25°C~75°C，反應(yīng)時(shí)間為I~160小時(shí)，反應(yīng)壓力為0.1Mpa0
[0023]最優(yōu)選地，所述轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的反應(yīng)溫度為55°C，反應(yīng)時(shí)間為72小時(shí)。
[0024]脂肪酶可以來源于動(dòng)物、植物或微生物。
[0025]優(yōu)選地，所述脂肪酶為青霉脂肪酶。
[0026]最優(yōu)選地，所述脂肪酶為擴(kuò)展青霉脂肪酶。
[0027]本發(fā)明的有益效果是:區(qū)別于現(xiàn)有的碳酸二甲酯的制備中存在的轉(zhuǎn)化率低、選擇性低、工藝復(fù)雜、污染環(huán)境的情況，本發(fā)明使用固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯，由于固定脂肪酶的基質(zhì)能降低甲醇對(duì)脂肪酶酶活的不利影響，穩(wěn)定脂肪酶的酶活，以及脂肪酶的專一催化活性和無毒性，使得本發(fā)明方法不僅具有高轉(zhuǎn)化率、高選擇性、高普適性，而且工藝簡(jiǎn)單、反應(yīng)條件溫和、降低成本、環(huán)境友好、固定化脂肪酶可循環(huán)利用、應(yīng)用前景廣闊。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0028]圖1為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯的反應(yīng)式；
[0029]圖2為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯和反應(yīng)時(shí)間的關(guān)系不意圖；
[0030]圖3為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯和反應(yīng)時(shí)間的關(guān)系不意圖；
[0031]圖4為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯和反應(yīng)溫度的關(guān)系示意圖；
[0032]圖5為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯和物料摩爾比的關(guān)系示意圖；
[0033]圖6為本發(fā)明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯反應(yīng)制備碳酸二甲酯和固定化脂肪酶用量的關(guān)系示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0034]下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0035]請(qǐng)參見圖1，本發(fā) 明以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酯二甲酯的反應(yīng)式。碳酸二甲酯的制備過程:首先以基質(zhì)將脂肪酶固定化，然后在反應(yīng)裝置中依次加入反應(yīng)物甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯；再在反應(yīng)物中加入固定化脂肪酶，攪拌進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，反應(yīng)后獲得產(chǎn)物碳酸二甲酯。固定脂肪酶的過程中所用基質(zhì)為聚乙烯醇(PVA，1750±50)、羥甲基纖維素鈉(CMC，800~1200mPa.s)、羥丙基甲基纖維素(HPMC，6mPa*s)中的一種或兩種。脂肪酶可以來源于動(dòng)物、植物或微生物，尤其是青霉脂肪酶。
[0036]以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酯二甲酯的過程中，反應(yīng)選擇性用Finnigan Trace DSQ型氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀測(cè)定，所用色譜柱為HP 5MS型。
[0037]以固定化脂肪酶為催化劑催化甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯反應(yīng)制備碳酯二甲酯的過程中，碳酸二甲酯含量分析方法為:取50 μ L反應(yīng)液離心分層，取上層液樣10 μ L，用290 μ L環(huán)己烷溶解，搖勻，再加入300 μ L十二烷(2mg/ml)作為內(nèi)標(biāo)樣品進(jìn)樣，由氣相色譜測(cè)定反應(yīng)物中的碳酸二甲酯量。轉(zhuǎn)化率用山東魯南化工儀器廠的SP-6890型氣相色譜儀測(cè)定，色譜柱為SE-54型。具體的測(cè)試條件為:柱室采用程序升溫:100°C維持6分鐘，升溫速度40°C /分鐘，到200°C維持15分鐘，氣化室320°C，檢測(cè)室320°C。由測(cè)定
的碳酯二甲酯量計(jì)算出碳酸乙烯酯或碳酸丙烯酯的轉(zhuǎn)化率，計(jì)算方法如下:
[0038]
【權(quán)利要求】
1.一種以固定化脂肪酶為催化劑制備碳酸二甲酯的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 1)以基質(zhì)將脂肪酶固定化； 2)在反應(yīng)裝置中依次加入反應(yīng)物甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯； 3)在所述反應(yīng)物中加入所述固定化脂肪酶； 4)攪拌進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，反應(yīng)后獲得產(chǎn)物碳酸二甲酯。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述以基質(zhì)將脂肪酶固定化的步驟包括: A、在50升的容器中依次加入400克基質(zhì)、25升去離子水，形成一基質(zhì)溶液，加熱至基質(zhì)溶液沸騰，加熱過程中不斷攪拌，沸騰50分鐘左右后基質(zhì)基本溶解；冷卻至室溫后攪拌60分鐘至基質(zhì)溶液基本無色透明； B、將100克脂肪酶與300克去離子水的混合物加入到所述基質(zhì)溶液中得到一混合溶液，攪拌所述混合溶液120分鐘后將所述混合溶液均勻地導(dǎo)入含聚四氟乙烯的培養(yǎng)皿中，在真空條件下冷凍干燥24小時(shí)后，形成一層薄膜，得到所述固定化脂肪酶。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)為聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的一種或兩種，其中，基質(zhì)為聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的兩種時(shí)，兩種基質(zhì)的質(zhì)量比為1:1~1: 10。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述基質(zhì)為聚乙烯醇、羥甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素中的兩種時(shí)，兩種 基質(zhì)的質(zhì)量比為1: 2。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中加入醇酯摩爾比為4: I~50: I的甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中加入醇酯摩爾比為16: I的甲醇與碳酸乙烯酯或甲醇與碳酸丙烯酯。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中加入所述反應(yīng)物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的0.1 %~25%的固定化脂肪酶。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中加入所述反應(yīng)物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的3%的固定化脂肪酶。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟4)中加入所述碳酸乙烯酯或碳酸丙烯酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)I %的水，所述轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的反應(yīng)溫度為25°C~75°C，反應(yīng)時(shí)間為I~160小時(shí)，反應(yīng)壓力為0.1Mpa0
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的反應(yīng)溫度為55°C，反應(yīng)時(shí)間為72小時(shí)。
11.如權(quán)利要求1~10任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶來源于動(dòng)物、植物或微生物。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶為青霉脂肪酶。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶為擴(kuò)展青霉脂肪酶。
【文檔編號(hào)】C12N11/12GK103525873SQ201210226274
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2012年7月3日 優(yōu)先權(quán)日:2012年7月3日
【發(fā)明者】張海波, 王劍英, 劉駿, 郭宏濤, 蘭瑛, 周曉海 申請(qǐng)人:深圳市綠微康生物工程有限公司, 武漢大學(xué)