專利名稱：負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種納米微球的制備方法，尤其涉及一種負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
血糖檢測過程由化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)化為電信號的基本過程，原理是由含有葡萄糖分子的反應(yīng)液(如唾液、血液等體液)在葡萄糖反應(yīng)酶(如葡萄糖脫氫酶、葡萄糖氧化酶)的催化下進(jìn)行化學(xué)分解反應(yīng)，從而釋放出帶電粒子(如氫氧根離子、氫離子及電子)，帶電粒子通過電極及連接電極的導(dǎo)線將帶電粒子傳輸?shù)诫娦盘枡z測系統(tǒng)，根據(jù)所產(chǎn)生的電流大小判斷反應(yīng)強(qiáng)度，反應(yīng)強(qiáng)度大則反應(yīng)劇烈，葡萄糖含量就高；反之亦然。
現(xiàn)有技術(shù)中，酶層主要采用在電極上直接涂布反應(yīng)液的辦法，即直接將葡萄糖反應(yīng)酶溶液涂在電極表面，為提高反應(yīng)酶的附著強(qiáng)度，一般是將飽和葡萄糖反應(yīng)酶溶液制成易于涂布的具有一定粘性的溶液，利用高速旋涂設(shè)備，在電極表面進(jìn)行多次噴灑式旋涂。或利用絲網(wǎng)印刷的方式，在電極表面進(jìn)行多次涂布。無論是旋涂或絲網(wǎng)印刷，其電極修飾均需要進(jìn)行多次操作，無法用一道エ序一次性完成。葡萄糖反應(yīng)酶溶液無論其溶解度有多高，反應(yīng)酶都是不規(guī)則的分散在溶液中的，因此涂布到電極表面以后將形成反應(yīng)酶的不均勻分布，而且每個分布點的酶含量較低。葡萄糖反應(yīng)酶在電極表面很難形成堆疊結(jié)構(gòu)，即在某一反應(yīng)點只有少量反應(yīng)酶存在，在葡萄糖分解反應(yīng)中很容易被消耗殆盡，該點反應(yīng)進(jìn)行完畢后，局部雖然形成了葡萄糖的低濃度區(qū)，葡萄糖分子會向這一反應(yīng)區(qū)滲透，但由于反應(yīng)酶沒有可補(bǔ)償性，改點不在具有反應(yīng)酶，因此反應(yīng)沒有持續(xù)性。導(dǎo)致產(chǎn)生的電流小，且持續(xù)時間短，難于檢測判斷。為了解決上述問題，提出了一種電極的自組裝方法，要求參與反應(yīng)的納米微球具有磁性，傳統(tǒng)的納米微球不具有磁性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對以上問題，而提出的一種負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球的制備方法，具有如下步驟SI.采用氣泡液膜法，制得Fe3O4鐵氧體的前軀體；S2.將所述鐵氧體的前驅(qū)體，置于容器內(nèi)200-250攝氏度燒結(jié)10_12h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體；S3.將葡萄糖脫氫酶、こ醇、水、SiO2納米顆粒以及由步驟S2制得的鐵氧體納米粉體按一定比例投入反應(yīng)容器中，在室溫下，回流攪拌20-30分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入模具中，恒溫水浴，在恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球；所述的投入的反應(yīng)物的比例為每IL去離子水加入葡萄糖脫氫酶10g，こ醇100_150ml，
投入的葡萄糖脫氫酶與SiO2納米顆粒的質(zhì)量比為1:1. 5-1:2. 5，投入的鐵氧體納米粉體與SiO2納米顆粒的質(zhì)量比為1:1-1:1. 5。步驟S2中的燒結(jié)時間為10小時；燒結(jié)溫度為210°C。由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供 的負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球，通過ー種簡單的結(jié)構(gòu)實現(xiàn)了，既不影響負(fù)載的反應(yīng)酶的活性，自身又具有磁性，可以完全滿足電極自組裝的要求。


為了更清楚的說明本發(fā)明的實施例或現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖做ー簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。圖I為本發(fā)明實施例一的SEM圖像圖2為本發(fā)明實施例ニ的SEM圖像圖3為本發(fā)明實施例三的SEM圖像
具體實施例方式為使本發(fā)明的實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚完整的描述實例I :將通過氣泡液膜法和共沉積反應(yīng)制備Fe3O4鐵氧體的前軀體置于容器內(nèi)210攝氏度燒結(jié)10h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體。將Ig葡萄糖脫氫酶、IOmlこ醇、IOOml去離子水、
1.5g SiO2納米顆粒、I. 5g鐵氧體納米粉體投入三頸瓶中，在20攝氏度溫度下，回流攪拌30分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入PVC模具中，在25攝氏度溫度下，恒溫水浴2小時，在42. 5°C恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球。如圖I所示。實例2 將通過氣泡液膜法和共沉積反應(yīng)制備Fe3O4鐵氧體的前軀體置于容器內(nèi)210攝氏度燒結(jié)10h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體。將Ig葡萄糖脫氫酶、IOmlこ醇、IOOml去離子水、
2.5g SiO2納米顆粒、2. 5g鐵氧體納米粉體投入三頸瓶中，在25攝氏度溫度下，回流攪拌20分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入PVC模具中，在25攝氏度溫度下，恒溫水浴2小時，在40°C恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球。所得的納米微球如圖2所示。實例3 將通過氣泡液膜法和共沉積反應(yīng)制備Fe3O4鐵氧體的前軀體置于容器內(nèi)220攝氏度燒結(jié)12h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體。將Ig葡萄糖脫氫酶、IOmlこ醇、IOOml去離子水、
I.5g SiO2納米顆粒、I. 5g鐵氧體納米粉體投入三頸瓶中，在20攝氏度溫度下，回流攪拌30分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入PVC模具中，在25攝氏度溫度下，恒溫水浴2小時，在40°C恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球。所得的納米微球如圖3所示。以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式
，但本 發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球的制備方法，具有如下步驟 51.采用氣泡液膜法，制得Fe3O4鐵氧體的前軀體； 52.將所述鐵氧體的前驅(qū)體，置于容器內(nèi)200-250攝氏度燒結(jié)10-12h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體； 53.將葡萄糖脫氫酶、こ醇、水、SiO2納米顆粒以及由步驟S2制得的鐵氧體納米粉體按一定比例投入反應(yīng)容器中，在室溫下，回流攪拌20-30分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入模具中，恒溫水浴，在恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球； 所述的投入的反應(yīng)物的比例為 每IL去離子水加入葡萄糖脫氫酶10g，こ醇100-150ml， 投入的葡萄糖脫氫酶與SiO2納米顆粒的質(zhì)量比為I: I. 5-1:2. 5， 投入的鐵氧體納米粉體與SiO2納米顆粒的質(zhì)量比為1:1-1:1. 5。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種負(fù)載有多層帶酶微球電極的制備方法，其特征還在于步驟S2中的燒結(jié)時間為10小時；燒結(jié)溫度為210°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球的制備方法，具有如下步驟S1.采用氣泡液膜法，制得Fe3O4鐵氧體的前軀體；S2.將所述鐵氧體的前驅(qū)體，置于容器內(nèi)200-250攝氏度燒結(jié)10-12h，制得固結(jié)鐵氧體納米粉體；S3.將葡萄糖脫氫酶、乙醇、水、SiO2納米顆粒以及由步驟S2制得的鐵氧體納米粉體按一定比例投入反應(yīng)容器中，在室溫下，回流攪拌20-30分鐘時間，使葡萄糖脫氫酶水解生成透明溶膠，將該溶膠轉(zhuǎn)入模具中，恒溫水浴，在恒溫條件下烘干、研磨，制得負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的納米微球。本發(fā)明提供的負(fù)載有葡萄糖脫氫酶的磁性納米微球，通過一種簡單的結(jié)構(gòu)實現(xiàn)了，既不影響負(fù)載的反應(yīng)酶的活性，自身又具有磁性，可以完全滿足電極自組裝的要求。
文檔編號C12Q1/32GK102864205SQ20121024331
公開日2013年1月9日 申請日期2012年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月13日
發(fā)明者張勐, 鮑文生, 肖紅梅 申請人:蘇州文曦醫(yī)療電子有限公司